Show: 25 50 75 100 Results

Search results: 25 out of 11,619

تاثير بعض المستخلصات النباتية على مستوى سكر الدم في ذكور الجرذان السليمة والمصابة بداء السكر التجريبي == Effect of some plant extracts on blood sugar level in normal and experimentally diabetic male rats

Author name: احمد كمال محمد الامـري
Supervisor name: صالح محمد رحيم العبيدي | حسين فاضل حسن بيرقدار
General topic: Biology
Specific topic: Zoology - Physiology
Degree: Master
University: Tikrit University - College Of Science - Department Of Biology
Language: Arabic
University location: Salahaddin
First pages:
Abstract: تم في هذه الدراسة اختبار فعالية المستخلصات المائية لكل من درنات نبات السعد Cyperus rotundus وسيقان واوراق نبات الجعدة Teucrium polium وثمار نبات الخروب Prosopis farcta في خفض مستويات الكلوكوز والكوليسترول والكليسيريدات الثلاثية في دم ذكور الجرذان السليمة والمصابة بداء السكر المستحدث بالالوكسان ومقارنتها مع تاثير الانسولين والكلبنكلامايد . وقد تبين ان المستخلصات المائية للسعد والجعدة والخروب ادت الى انخفاض معنوي في مستوى الكلوكوز في الجرذان السليمة والمصابة بداء السكر . وكما تشير النتائج الى ان المستخلص المائي لدرنات نبات السعد قد ادى الى انخفاض معنوي في مستوى الكوليسترول والكليسيريدات الثلاثية في حين ان المستخلص المائي لثمار نبات الخروب قد احدث انخفاض معنوي في مستوى الكليسيريدات الثلاثية فقط بينما لم يؤد المستخلص المائي لسيقان واوراق نبات الجعدة الى اي انخفاض معنوي في مستوى الكوليسترول والكليسيريدات الثلاثية في الجرذان المصابة بداء السكر . ومن ذلك يمكن الاستنتاج بان هذه المستخلصات المائية يمكن استخدامها في معالجة داء السكر بديلا عن الكلبنكلامايد بعد التاكد مستقبلا من عدم وجود اعراض جانبية لها . | In the present study the effect of aqueous extracts of Cyperus rotundus ,Teucrium polium and Prosopis farcta on the levels of blood glucose , cholesterol and triglycerides were investigated in normal and alloxan - induced diabetic rats. The results were compared with those treated with insulin and glibenclamide. The results indicated a significant decrease in glucose level in normal and diabetic rats. The aqueous extract of Cyperus rotundus produced significant decrease in cholesterol and triglyceride levels but the aqueous extract of Prosopis farcta produced significant decrease only in triglyceride levels wherease aqueous extract of Teucrium polium produced no significant decrease in cholesterol and triglyceride levels in diabetic rats. The results obtained in this study suggest that these extracts may be used for the treatment of diabetes mellitus in place of glibenclamide after be sure that there is no side effects for it. However, further studies must be done in this aspects in the future.

دراسة تشريحية مقارنة لانواع مختارة من العائلــــــــة المركبــــة Compositae الناميـــــة ضمن مجمع الجادريــــــة ـ جامعـــة بغداد == Comparative anatomical study of selected compositae species grown in Jadiriyah Campus , Baghdad University

Author name: سكينة عباس عليوي
Supervisor name: علي حسيـن عيسى الموسوي
General topic: Biology
Specific topic: Plant
Degree: Master
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تناول البحث الحالي دراسة تشريحية مقارنة لانواع عشرة مختارة من العائلة المركبة Compositae النامية في مجمع الجادرية - جامعة بغداد ، والانواع هي : Aster subulatus Michx.Calendula officinalis L.Calendula Persica C. A. MayCarduus pycnocephalus L.Carthamus oxycantha M. B.Eclipta alba (L.) HaussknErigeron canadensis L.Silybum marianum (L.) GarthUrospermum picroides (L.) Schmidt .Xanthium brasilicum Vellozo .حيث ركز البحث على بعض الصفات التشريحية ودراستها بصورة مقارنة ولاول مرة لهذه الانواع في العراق. وتضمنت الدراسة مميزات البشرة مثل دراسة خلايا البشرة الاعتيادية والمعقدات الثغرية. واسفرت الدراسة عن ظهور طراز جديد ولاول مرة في هذه الانواع وهو الطراز المتوازيParacytic type للنوع Eclipta alba . كما تمت دراسة نظام التعرق للانواع المذكورة انفا ومقارنتها وكذلك الخصائص التشريحية للورقة واظهرت المقاطع العمودية لنصل الورقة لاسيما شكل الحزم وعددها وسمك الطبقتين العمادية والاسفنجية وبقية الصفات حيث اعطت خصائص تصنيفية مهمة ، وامكن تقسيم الانواع على مجاميع ، وبينت الدراسة للمقاطع المستعرضة للسيقان خاصة صفات تصنيفية مهمة. ومميزة من حيث : سمك الكيوتكل وسمك طبقة البشرة ووجود الكولنكيما او عدم وجودها ، وعدد صفوفها ونوعها . وكان لصفات الحزمة الوعائية اهمية مميزة من حيث معدل طولها واعدادها واشكالها مما امكن تقسيم الانواع على مجاميع ، كذلك درس اللحاء والخشب حيث ابديا اهمية تصنيفية من جوانب عدة ، وامكن الاستفادة من الاسطوانة الوعائية في عزل الانواع سواء اكانت مستمرة ام متقطعة على شكل حزم كذلك درس اللب واعطيت له اهمية من حيث المساحة ووجود او عدم وجود البلورات وانواعها ان وجدت . وتضمن البحث دراسة المقاطع المستعرضة للجذور ، واظهر سمك البشرة والقشرة واللحاء وشكله ومساحة منطقة الخشب اهمية كبيرة في العزل والتشخيص وكان للكساء السطحي للاوراق والسيقان فائدة وقيمة تصنيفية مهمة في عزل الانواع من حيث اشكال الشعيرات واطوالها وانواعها ومن حيث وجود او عدم وجود الحليمات . واسفرت الدراسة عن ظهور نتائج وتغايرات وصفات مهمة تعرض لاول مرة ، لقد اعطت الدراسة التشريحية صفات مهمة اعطت دعما واسنادا للصفات المظهرية وساعدت على عزل وتشخيص الانواع ضمن العائلة نفسها ، هذا واورد البحث صورا للعينات الحقلية التي جمعت من مواقع مختلفة ومتعددة ضمن مجمع الجادرية ( رقعة الدراسة ) ، وتضمن صورا عديدة للمقاطع التي تمت دراستها للاعضاء النباتية المختلفة فضلا عن العديد من الجداول . وقد نوقشت النتائج لهذه الدراسة التشريحية خصوصا ما هو متعلق ببيئة هذه الانواع . | The present study dealt with ten selected species of the family compositae grown in Jadiriyah campus , university of Baghdad , were studied anatomically in a comparative way within this work . These species are : Aster subulatus Michx.Calendula officinalis L.Calendula Persica C. A. MayCarduus pycnocephalus L.Carthamus oxycantha M. B.Eclipta alba (L.) HaussknErigeron Canadensis L.Silybum marianum (L.) GarthUrospermum picroides (L.) Schmidt .Xanthium brasilicum Vellozo .Comparative anatomical characters were used for the first time in these species grown in Iraq , such as characteristics of ordinary epidermal cells and stomatal complexes . Paralytic type was recorded as new founding in these species namely in Eclipta alba . Venation system was investigated and compared , Vertical sections of leaf blades , especially the shape and number of vascular bundles , thickness of palisade of spongy layers and other mesophyll characters . These characters were important taxonomically ,according to these species were divided into groups based on these specific characters . Cross sections of stems show important taxonomic values , like thickness of cuticle , epidermis , presence or absence of collenchyma , types and rows of this collenchyma . Characteristics of the vascular bundle were important too , therefore the species were divided according to these attributes into groups. Xyelem and phloem were also used taxonomically . The vascular cylinder was useful whether it was continuous as a complete cylinder or as a separated strands.Pith of the stem and its size , presence of crystals was of a considerable importance . Other characters of the plant organs , cross sections of root were useful taxonomically , especially the thickness of epidermis , cortex , phloem and xylem .Indumentum of leaves and stems was also of a taxonomic value , therefore the shapes , length , kinds , presence of glands were used for identification of the species . This study concluded the presences of variation in characters ; and these were presented for the first time comparatively , so that the anatomical characters were of a good supporting to the exomorphological characters in the family compositae . Graphes , field photographs of the different plants and sections of plant organs were put in addition to a numerous tables in this work . The above results were discussed scientifically regarding the invironmental factors .

دراسة كفاءة خليط من مستخلصات قشور ثمار الرمان وثمار الشفلح في تضعيف حيوية الرؤيسات الاولية للمشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus. Batzsh,1786 خارج الجسم الحي وداخله == The study of efficiency of mixture extracts from Pericarp of Punica granatum L. and Fruit of Capparis spinosa L. in attenuation of protoscolices of Echinococcus granulosus. Batzsh,1786In vitro and In vivo

Author name: نهى محمد موسى الدوري
Supervisor name: فوزية احمد الشنوي
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Parasites
Degree: Master
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: ان هدف هذه الدراسة اختبار فعالية كل من المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان Punica granantum L. وثمار الشفلحL. Capparis spinosa بتراكيز )300،200،100،50 (مليغرام /مليليتر.كما تم خلط المستخلصات المائية لقشور الرمان وبتراكيز (100،50) مليغرام /مليليتر مع (200،100) مليغرام /مليليتر من المستخلص المائي لثمار الشفلح وبالتراكيزنفسها تم خلط المستخلصات الكحولية وتقويم فعاليتها في تضعيف حيوية الرؤيسات الاولية لطفيلي المشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus .Batch,1786 الماخوذة من كيس مائي لكبد احد الاغنام خارج الجسم In vitro لمعرفة جودة وفعالية التراكيز في قتل الرؤيسات الاولية ليتم اختبارها فيما بعد داخل الجسم ,اتضح من الدراسة خارج الجسم الحي (في الزجاج ) اذ انخفضت حيوية الرؤيسات الاولية عند استعمال المستخلص المائي لقشور الرمان وبتراكيز 300,200مليغرام /مليليتر والمستخلص المائي لثمار الشفلح ووبنفس التراكيز وللخليط المائي بتركيز (200+100)مليغرام /مليليتر لهما فحصل القتل التام للرؤيسات في الزمن60 ,60, 90,45,90دقيقة لكل من التراكيز .بينما تميزت المستخلصات الكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح والخليط الكحولي لهما فاحدثت القتل التام للرؤيسات في الزمن30,30 60,دقيقة عند التراكيز (200+100),300مليغرام /مليليتر وقبل اجراء اختبار فعالية المستخلصات داخل الجسم تم تحديد الجرعة المميتة المتوسطة التي بلغت 11.38,8.8,10,8.1,10.7,9.41غرام / كيلوغرام بالنسبة للمستخلصات المائية للرمان والشفلح والمستخلصات الكحولية للرمان والشفلح والخليط المائي والخليط الكحولي على التوالي, لكي تعد امينة الاستعمال وقليلة السمية . كما تضمنت الدراسة اختبار التراكيز المناسبة ومعاملتها بمجاميع الفئران المحقونة بالرؤيسات الاولية اما مجموعة السيطرة السالبة فتم حقنها بمحلول الملح الفسيولوجي Normal saline من اجل بيان تاثير المستخلصات النباتية داخل الجسم كما تم دراسة التغيرات الحاصلة في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية والنسب المئوية لاختزالها في الجسم اذ تبين حدوث انخفاض في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية الثانوية المتطورة في الفئران المعاملة بالمستخلصات المائية لنباتي الرمان والشفلح وزيادة نسب الاختزال قياسا بمجموعة السيطرة الموجبة في بقية المجاميع حيث وصلت النسبة المئوية لاختزال اعداد الاكياس العدرية الى 100%في بقية المجاميع المعاملة .اما التغيرات الحاصلة في معدلات اوزان الكبد والطحال ومعدلات التضخم فقد لوحظ حدوث تباين في معدلات الاوزان والتضخم اذ تقاربت قيم معدلات الوزن وتضخم الكبد للمجموعة المعاملة بالمستخلص المائي للشفلح والرمان مع مجموعة السيطرة الموجبة ,بينما حدث انخفاض معنوي واضح لهذه المعدلات في بقية المجاميع وكانت الافضلية للمجموعة المعاملة بالخليط الكحولي والمجموعة المعاملة بالمستخلص الكحولي للرمان اذ اقتربت من معدلات السيطرة السالبة .هذا وشملت الدراسة تقويم تاثير هذه المستخلصات النباتية والالبندازول Albendazole من دراسة التغيرات النسيجية الحاصلة في الكبد والطحال, ففي الكبد ظهرت تغيرات نسيجية عديدة اهمها وجود احتقان في بعض اوردة الكبد مع تغيرات لحجم الخلايا الكبدية وزيادة في اعداد خلايا كوفر Kupffer cells الدفاعية التي كانت اقل مما ظهر في مجموعة فئران السيطرة الموجبة ,اما الطحال فقد اظهر توسع اللب الابيض على حساب اللب الاحمر وزيادة ارتشاح الخلايا المولدة للصفيحات الدموية (خلايا النواء Megakaryocytes). وكانت هذه التغيرات اقل حدة في الفئران المعاملة بالخلط الكحولي. كما كانت التغيرات قليلة في المجاميع المعاملة بالمستخلصات الكحولية للنباتين ,لذا تبين من هذه الدراسة امكانية استخدام الخلط الكحولي والمستخلصات الكحولية بطريقة امنة عن طريق قدرتها على تحفيز الجهاز المناعي وتضعيف الرؤيسات ومنع تطورها الى اكياس عدرية ثانوية داخل الجسم الحي دون احداث اثار جانبية سلبية قياسا ببقية العقاقير الكيميائية مما يؤهلها للتقليل من المضاعفات الحاصلة في العمليات الجراحية . وباجراء التحليل الاولي للكشف عن المجاميع الفعالة في المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح تبين احتواء المستخلص المائي والكحولي لقشور الرمان على : القلويدات Alkaloids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، والفلافونيدات Flavonoids ،و فينولات Phenols ، وتانينات Tannins ، وتربينات Terpenoids ،و سترويدات Steroids بينما احتوى المستخلص الكحولي فضلاعن هذه المواد الراتنجات Resins ايضا. اما المستخلص المائي والكحولي لثمار الشفلح يبين احتوائه على : القلويدات Alkaloids ، والفلافونيدات Flavonoids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، بينما احتوى | This study aims to test the efficiency of each of the aquatic and alcoholic extracts for the Pericarp of Punica granatum L. and Fruit of Capparis spinosa L. in concentrations of ( 50 , 100 , 200 , 300 ) mg/ml. Also a mixture of aquatic extract of Punica granatum Pericarp in concentration of (50,100) mg/ml, and (100, 200) mg/ml concentrate of the aquatic extract of Capparis spinosa Fruit . And a similar mixture was prepared for the alcoholic extracts in similar concentrations. A test was performed for the efficiency of each of the prepared extracts, in attenuation of protoscolices Echinococcus granulosus. Batch,1786 which were isolated from hydatid cysts of liver in sheep In vitro to determine the optimum concentration to kill the protoscolices, where the test is then to be performed by injecting the protoscolices intraperitonealy in white mice In vivo. Actually the vitality of protoscolices had dropped drastically with the application of aquatic extracts of Punica granatum Pericarp at the concentrations of (200 , 300) mg/ml, and aquatic extracts of Capparis spinosa Fruit at the concentration of (200 , 300) mg/ml, and the mixture of both the aquatic extracts at the concentration (100+200) mg/ml, where complete death was achieved at times, 90 , 45 , 90 , 60 , 60 minutes respectively. Alcoholic extracts of Punica granatum Pericarp and Capparis spinosa Fruit , and their mixture showed complete killing of Protoscolices at the time 30 , 30 , 60 minute in concentrations of {300 & (100+200)} mg/ml.Before performing the test In vivo, we determined the average lethal doses which were 9.41 , 10.7 , 8.1 , 10 , 8.8 , 11.3 g/ kg for the aquatic extract of Punica granatum, Capparis spinosa, their Alcoholic extracts, the aquatic mixture, and the alcoholic mixture respectively. Thus, the extracts in such concentrations could be considered as safe and low poisoning . The study included testing and application of the best concentration for treatment of the white mice that were injected with protoscolices, a negative group were injected with normal saline to determine the effect of extracts In vivo. The study measured, also the changes in average numbers, weights, dimensions, and percentage of reduction of hydatid cysts In vivo. Where it showed a decrease in the average number, weight, factors of its distension of the secondary hydatid cysts which developed in mice treated with the aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa, and increase of percentage of reduction compared with the positive control group, where a 100% reduction of hydatid cysts was achieved in the treated groups.Changes in liver and spleen weights, and average of hypertrophy showed some variations. Where average of weights and hypertrophy of liver of mice treated with aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa were similar to those of the positive group. A significant drop in these averages was observed in other groups. Best results were observed in groups treated with the alcoholic mixture, as well as in those treated with the alcoholic extract of Punica granatum, where the changes were close to those of the negative group. The study included observation of the effect of treatment with the above mentioned extracts and with Albendazole, on tissue changes of liver and spleen. Where liver showed significant changes, most important of which were the changes of the liver cell and increase in the number of the kupffer cell as a defensive mechanism, which were much less than their rate in the positive control group. On the other hand, spleen showed dilation of the white pulp and the appearance of cells composing of the Hemic platelet (megakaryocytic cells) in processed mice compared with unprocessed negative control group. These tissue changes were less persistent in groups processed with the alcoholic mixture of Punica granatum and Capparis spinosa and groups processed with the mixture of alcoholic extracts. By performing physiochemical analyses for the extracts to specify their effective compounds, we came to conclude that the aquatic and alcoholic extracts of Pericarp Punica granatum contain Alkaloids ,Flavonoids ,Glycosides, Phenols, Terpenoids, Tannins, and Steroids. whereas the alcoholic extracts in addition to these compounds, contain resins. whereas the aquatic extract of carp Capparis spinosa contain Alkaloids, Flavonoids, Glycosides, Terpenoids. Alcoholic extract of fruit Capparis spinosa contains in addition to these compounds ,tannin

دراسة كيموحيوية وجزيئية لانزيم Hyaluronidase المنتج من عزلات محلية لبكتريا Pseudomonas spp. == Biochemical and Molecular Study of Hyaluronidase Produced by Local Isolates of Pseudomonas spp

Author name: ابية صباح صديق الدملوجي
Supervisor name: لينة عبد الكريم الامير | غازي منعم عزيز
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Bacteria
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: جمعت 140 عينة من مصادر مختلفة تضمنت الادرار، والخمج، والجروح، والبراز، والقشع، والتهاب الاذن، والدم، وسائل من الرئة ، وللمدة من حزيران ولغاية ايلول 2005 وتم الحصول على 55 عزلة لبكتريا Pseudomonas spp. بنسبه عزل 39.3%, وكانت اعلى نسبة عزل من الخمج والجروح اذ بلغت 38.2%.2 - اختبرت حساسية العزلات المحلية لبكتريا Pseudomonas spp .اتجاه اثنا عشر مضادا للحيوية وقد ابدت العزلات مقاومة مختلفة ومتعددة للمضادات اذ كانت العزلات جميعها مقاومة لثلاثة مضادات هي : Ampicillin ، وAugmentin ، وRifampin . وكانت 82% من العزلات مقاومة ﻟ 6 - 9 مضادات ، بينما كانت 14.5% من العزلات مقاومة ﻟ 1 - 5 مضادات و3.7% من العزلات المحلية مقاومة ﻟ 10 - 12 مضادا. كما لوحظ ان اغلب العزلات كانت حساسة لمضاد Amikacin ثم Ciprofloxacin ثم Gentamycin وتباينت مقاومة العزلات ا تجاه بقية مضادات الحيوية المستعملة.3 - تم التحري عن انتاج عوامل الضراوة المختلفة للعزلات قيد الدراسة مثل : الهيمولايسين ، والايلاستيز، واليورييز ووجد ان نسبة انتاج الهيمولايسين كانت بحدود 78.1% متوزعة بشكل اساسي في نماذج الخمج والجروح ثم الادرار ، كما اتصفت العزلات المحلية بانتاجها لانزيم الايلاستيز وبنسبة 85.4% تمركزت عند عينات الخمج والجروح ثم الاذن والادرار اما نسبة انتاج اليورييز فكانت 80% للعزلات قيد الدراسة وكانت اغلبها عائدة لعينات الادرار والبراز ثم الخمج والجروح.4 - تم التحري عن انتاج انزيم الهيالورونيديز باستعمال وسط نقيع القلب والدماغ الحاوي على حامض الهيالورونك ، واتضح ان 72.7% من العزلات المحلية تمتلك القابلية على انتاج الانزيم توزعت بشكل اساسي في عينات الادرار ثم عينات الخمج والجروح والاذن.5 - درست العلاقة بين انتاج انزيم الهيالورونيديز مع عوامل الضراوة قيد الدراسة (الهيمولايسين ، والايلاستيز ، واليورييز) . واتضح ان 43.6% من العزلات الكلية كانت منتجة لهذه العوامل مع انزيم الهيالورونيديز بينما كانت 18.18% من العزلات الكلية منتجة لعاملي ضراوة وانزيم الهيالورونيديز وتميزت ست عزلات محلية بكونها منتجة لعامل ضراوة واحد مع انزيم الهيالورونيديز ، كذلك لوحظ ازدياد عدد المجموعات الخاصة بنسق توزيع عوامل الضراوة من 7 عند ربط ثلاثة عوامل فقط الى 11 عند اضافة عامل الهيالورونيديز اليها.6 - غربلت العزلات المحلية على وسط نقيع القلب والدماغ الصلب وانتخبت خمس عزلات لاعطاءها نسب تحلل عالية لحامض الهيالورونك. 7 - لوحظ عند دراسة النسق البلازميدي لخمسة عزلات محلية (P52, P2, P10, P27 ,P30) لبكتريا Pseudomonas spp. المنتجه لانزيم الهيالورونيديز باحتوائها على حزمة بلازميدية واحدة.8 - عند محاولة تحييد البلازميدات باستعمال صبغة بروميد الايثيديوم ، لوحظ اختفاء البلازمد من العزلة P2 باستعمال تركيز 2000 مايكروغرام/مليلتر من الصبغة ، وتم اختبار قدرة العزلة المحيدة في انتاج الهيالورونيديز واظهرت هذه العزلة قدرتها في انتاج الانزيم.9 - اختبرت العزلات المحلية (التي اعطت نسب تحلل عالية على الوسط الصلب) في الوسط السائل، وتم تقدير الفعالية النوعية لها بالاعتماد على طريقة Turbidimetric assay ، واختيرت العزلة المحلية P27 Pseudomonas spp. كونها الاغزر انتاجا اذ بلغت الفعالية النوعية لها 2.7 وحدة /ملغم بروتين واستعملت في التجارب اللاحقة.10 - حددت الظروف المثلى لانتاج الهيالورونيديز باستعمال وسط مرق نقيع القلب والدماغ المدعم ﺒ 0.5% مستخلص الخميرة و0.25 ملغم/مليلتر من مادة التفاعل (حامض الهيالورونك) برقم هيدروجيني 6 والملقح بعدد خلايا 1×106 خلية/مليلتر ، والحضن بالمزارع الهزازة بسرعة 50 دورة /دقيقة لمدة 18 ساعة.11 - نقي الهيالورونيديز المنتج من العزلة المنتخبة بخطوات تضمنت الترسيب باستعمال كبريتات الامونيوم بنسبة تشبع 50% ثم استخدام تقنيتي كروماتوغرافي التبادل الايوني باستخدام المبادل DEAE - Cellulose ثم الترشيح الهلامي بعمود Sephacryl S - 300 ، وتم الحصول على عدد مرات تنقية مقدارها 10.8 وبحصيلة انزيمية 20.4%.12 - درست بعض العوامل المؤثرة في فعالية وثباتية الانزيم المنقى اذ كان الرقم الهيدروجيني الامثل للفعالية 6 وثبات الانزيم 6 - 7 وظهرت اقصى فعالية للانزيم عند درجة حراره 40 م واحتفظ الانزيم بحدود 85 - 100% من فعاليته في درجات الحرارة (30 - 45) م ، واحتفظ الانزيم ﺒ 12% فقط من فعاليته عند حضنه بدرجة حراره 50 م لمدة 30 دقيقة. كما درس تاثير بعض الايونات الفلزية في فعالية الهيالورونيديز ، وجد ان لايونات الصوديوم بتركيزي 5 و10 ملي مولار فعلا تنشيطيا للانزيم اذ احتفظ الانزيم ﺒ 107% و102% من فعاليته على التوالي. بينما ثبطت فعالية الانزيم بصورة واضحة عند معاملته بايونات الحديديك Fe+3 ، اذ احتفظ الانزيم ﺒ 50% و15% من فعاليته عند معاملته ﺒ عند معاملته 5 و10 ملي مولار على التوالي ، فضلا عن ذلك لوحظ ان تاثير كل من : ايونات الحديدوز Fe+2 ، والنحاس Cu+2 ، والخارصين Zn+2 ، والزئبق Hg+2 كان اقل من الايونات السابقة، اذ احتفظ الانزيم ﺒ 60% , و53% , و74% , و66% من فعاليته عند معاملته بتركيز 10 ملي مولار لكل من الايونات على التوالي. كذلك احتفظ الانزيم بكامل فعاليته عند معاملته بمادتي EDTA وازايد الصوديوم بتركيز 5 ملي مولار ، بينما احتفظ الانزيم ﺒ 95% و76% من فعاليته عند معاملته ﺒ 5 ملي مولار من المركب Phenyl methane sulphonyl fluoride والسيستايين. | 1 - A total of 140 Samples including urine infections wounds, burns, sputum, blood, stool and lung fluid samples were collected from different hospitals and medical centers in Baghdad city, during the period June _September 2005. Fifty five isolates belonged to Pseudomonas spp.(40.7%) of which 38.2% belonged to infections and wound samples.2 - Sensitivity of local Isolates was examined against 12 antibiotics, Results showed different and multi resistance patterns to antibiotics. All isolates were resistant to Ampicillin , Augmentin and Rifampin. 82% of which were resistant to 6 - 9 antibiotics, while 14.5% of the isolates were resistant to 1 - 5 antibiotics and only 3.7% were resistant to 10 - 12 antibiotics. Amikacin, Ciprofloxacin and Gentamycin were found to be the most effective agents against most of the isolates.3 - Detection of some virulence factors (hemolysin, elastase and urease) by the local isolates was studied. Results showed that 78.1% of the isolates produced hemolysin (mainly infection and wound isolates, then urine isolates). 85.4% of were mainly elastase producers (wound and infection, ear and urine). Results also showed that 80% of isolates were able to produce urease mostly belonged to urine, stool and infection and wound isolates.4 - Detection of the ability of Pseudomonas spp.local isolates to produce hyaluronidase enzyme by using Brain heart infusion (BHI) agar that contains hyaluronic acid was studied. 72.7% of the isolates were able to produce the enzyme.5 - The relation between hyaluronidase production and other virulence factors (hemolysin, elastase and urease) was studied. The results showed that 43.6% of the isolates produced the three studied virulence factors with hyaluronidase, while 18.18% of the isolates produced two of the virulence factors with hyaluronidase, and onlysix isolates produced one virulence factor and hyaloronidase. The results also showed that the groups concerning virulence factors increased from 7 to 11 when the hyaluronidase was added as a forth virulence factor.6 - Five isolates (P27, P30 , P10 , P2, P52) of Pseudomonas spp.producing hyaloronidase were selected to carry out studies on the plasmid profile. Results showed that all five isolates contained one plasmid.7 - The results of plasmid curing by using ethidium bromide showed that the plasmid of the local isolates P2 was curried by treatment with 2000μg/ml ethidium bromide, the curried isolate kept the ability to produce hyaluronidase. 8 - Five local isolates that gave large inhibition zones on (BHI) agar were chosen for specific activity determination by using submerged cultures. The local isolate P27 was chosen to be the most producing one, it’s specific activity was 2.7 unit/mg protein.9 - The optimum conditions for hyaloronidase production determined by using submerged cultures. Results showed that the optimum media for hyaluronidase production was (BHI) broth containing 0.5% yeast extract and 0.25 mg/ml hyaluronic acid with an inoculum of 1×106 cell/ml at an optimum pH 6, after 18 hours incubation in a shaker incubator 50 cycle/min.10 - Hyaloronidase was purified from selected local isolate by using several steps including concentration by ammonium sulphate in saturation percentage of 50%, this step was followed by DEAE - Cellulose ion exchange chromatography technique and gel filtration technique using sephacryl S - 300 colum. Purification fold and recovery were 10.8 and 20.4% respectively.11 - The optimum pH for enzyme activity and stability was 6 and 6 - 7 respectively. Maximum enzyme activity was obtained at 40C º and the enzyme retained 85 - 100% and 12% of it’s initial activity at (30 - 45) Cº and 50 C º respectively.12 - The effect of some metal ions on hyaluronidase activity was studied, 5 and 10 mμ of Na+2 increased enzyme activity to 107% and 102% respectively, while the enzyme kept only 50% and 15% of it’s initial activity when treated with 5 and 10 mμ of Fe+3 respectively. The enzyme also retained 60%, 53%, 74% and 66% of it’s activity when treated with 10mμ of Fe+2, Cu+2, Zn+2 and Hg+2 respectively. EDTA and sodium azide showed no effect on hyaluronidase activity, while retained only 95% and 76% of it’s initial activity when treated with 5 mμ of PMSF and cysteine respectively.

تاثير بعض العقاقير الطبية ومستخلص نبات الحنظل في النشاط الميكانيكي للعضلات الملساء للفائفي الفئران البيض == Effect of Some Medicinal Drugs and Colocynth Extract on Smooth Muscles of the Ileum of Albino Mice

Author name: سندس مجيد حمزة محمد
Supervisor name: اسماعيل صالح ابراهيم الكاكي
General topic: Biology
Specific topic: Zoology
Degree: Master
University: University of Al Mosul - College Of Science
Language: Arabic
University location: Mosul
First pages:
Abstract: تضمنت هذه الدراسة قطع اللفائفي المعزولة من الفار لبحث تاثير عدد من المواد الكيميائية ، العقاقير الطبية والمستخلصات النباتية في العضلات الملساء فيها ، واظهرت النتائج ان التقلصات الطبيعية للعضلات الملساء للفائفي الفار تتميز بكونها عبارة عن تقلصات ايقاعية ذاتية منتظمة وتعتمد هذه التقلصات والتقلص المحدث بالاسيتيل كولين وكلوريد البوتاسيوم في شدته وادامته على الكالسيوم الخارجي بشكل كبير ،و لوحظ ان اضافة الكالسيوم الى التقلص المحفز بالاسيتيل كولين وكلوريد البوتاسيوم في المحلول الخالي من الكالسيوم ادت الى تعزيز الطور التوتري للتقلص واستمراره. اما كلوريد الباريوم فقد استحث التقلص في هذه العضلات وبشكل يعتمد على التركيز، اذ ان التراكيز (0.3 - 0.5) ملي مول اظهرت تقلصا توتريا، في حين ان التراكيز (1 - 12) ملي مول اظهرت تقلصا ثنائي الطور، كما ان التقلص المحفز بكلوريد الباريوم لم يتاثر بازالة الكالسيوم من المحلول الخارجي . واظهر كلوريد الباريوم تاثيرا منشطا في الطور التوتري للتقلص المحدث بالاسيتيل كولين. وقد اظهر عقار الاسبرين تاثيرات مختلفة في تقلص العضلات الملساء للفائفي اعتمادا على التركيز المضاف ، فكان للتراكيز الواطئة والمتوسطة (2 - 40) ملي مول تاثير منشط ، اما التراكيز العالية (60 - 100) ملي مول فكان لها تاثير انبساطي ادى الى حصول ارتخاء ، وقد احدث المحلول الخالي من الكالسيوم فشل استجابة العضلات لعقار الاسبرين بالتراكيز التي تحدث تقلصا لها ، كما ان الاسبرين يؤدي الى استمرار الطور التوتري للتقلص المحدث بالاسيتيل كولين . اما عقار البايريميثامين فقد احدث تثبيطا معتمدا على التركيز وتسبب التراكيز العالية منه (8 - 14) ملي مول انبساطا سريعا للتقلصات الطبيعية ، وادى المحلول الخالي من الكالسيوم الى تقليل استجابة العضلات الملساء للفائفي للبايريميثامين ، وفضلا عن ذلك ادت التركيزين (2 - 8) ملي مول من العقار الى تثبيط الطور التوتري للتقلص المحدث بالاسيتيل كولين . وكان للمستخلص الكحولي للب ثمار الحنظل تاثير مثبط في التقلص الطبيعي وبشكل يعتمد على التركيز . وفشلت الاستجابة لهذا المستخلص في المحلول الفسيولوجي الخالي من الكالسيوم . كما لوحظ ان هذا المستخلص ادى الى انبساط تدريجي للعضلات المتقلصة تقلصا مستمرا بوساطة الاسيتيل كولين . واظهرت التراكيز المختلفة للمستخلص الكحولي لبذور الحنظل تاثيرات متباينة في العضلات الملساء للفائفي الفار . فالتراكيز (0.05 - 1) ملغم / مل نشطت التقلص الطبيعي ، في حين ان التراكيز العالية (2 - 4) ملغم / مل سببت تثبيطه | Isolated ileal strips of mouse were included in this study to investigate the effect of some chemical materials, medicinal drugs and plant extracts on their smooth muscles. The results showed that ileal smooth muscles of mouse exhibits regular autorhythmic contractions.This normal contraction and that induced by acetylcholine and potassium chloride mainly depended on the extracellular calcium in their tension and maintaining, Also addition of calcium to acetylcholine and potassium chloride induced contraction in solution free from calcium led to augmentation and continuation of tonic phase for the contraction. Barium chloride induced the contraction in these muscles depending on concentration, The concentrations (0.3 - 0.5) mM exhibited tonic contraction, while the concentrations (1 - 12) mM exerted biphasic contraction. Barium chloride induced contraction not affected by the removal of calcium from the extracellular solution, and the barium chloride exhibited an active effect in the tonic phase of acetylcholine induced contraction. Aspirin exerted different effects on ileal smooth muscles contraction depending upon concentration. Low and moderate concentrations (2 - 40) mM had an active effect, while high concentrations (60 - 200) mM had inhibitory effect, which led to relaxation. Free calcium solution abolished muscles response to aspirin with the concentration which caused contraction. Aspirin in turn led to continuation of acetylcholine induced contraction. Pyrimethamine exhibited relaxation in a concentration dependent and a high concentration (8 - 14) mM of it rapidly caused relaxation for a normal contraction. Free calcium solution reduced muscles response to pyrimethamine, The concentrations (2 and 8) mM led to the development of tonic phase of acetylcholine contraction. Alcoholic extract of colocynth pulp inhibited normal contraction in a concentration dependent manner, and free calcium solution completely closed muscle response to alcoholic extract. It was also observed that this extract gradually inhibited acetylcholine induced contraction. Different concentrations of the alcoholic extract of colocynth seeds had different effects on ileal smooth muscles. The concentrations (0.05 - 1) mg / ml activated normal contraction, whereas, high concentrations (2 - 4) mg / ml inhibited it.

دراسة معدل التكسر الازموزي لكريات الدم الحمر وعلاقته بعدد من المكونات الدموية والمتغيرات الكيموحيوية لدى المرضى المصابين ببعض امراض القلب == A Study on the Osmotic Fragility Rate of Red Blood Cells and their Relationship with some Biochemical characteristics of Patients Suffering from some Heart Diseases

Author name: وسن سرحان عبيد الشمري
Supervisor name: صالح محمد رحيم العبيدي | موسى جاسم محمد الحميش
General topic: Biology
Specific topic: Zoology
Degree: Master
University: Tikrit University - College Of Science
Language: Arabic
University location: Salahaddin
First pages:
Abstract: يهدف البحث الى دراسة معدل التكسر الازموزي لكريات الدم الحمر لدى المرضى المصابين ببعض امراض القلب ,والتغيرات الحاصلة في بعض المقاييس الكيموحيوية والدموية ذات العلاقة بامراض القلب ومنها الانزيمات ( Asprtatransaminase , Alanintransaminase , Lacatdehydrogenas , Creatin kinas) والدهون ( Lipid Profile ) والكلوكوز وبعض فحوصات الدم وهي : - Heamoglobin (Hb) الهيموكلوبين, Erythrocyte sedimentation Rate (ESR) معدل ترسيب كريات الدم الحمر, حجم كريات الدم المضغوطة (Packed Cell Volume (PCV . شملت الدراسة 135 مريضا ومريضة من الراقدين في وحدة العناية المركزة في مستشفى تكريت التعليمي ، وتم تقسيمها على اربعة مجاميع : - المجموعة الاولى (A) : - المرضى المصابين بالمتلازمة التاجية الحادة Acute coronary syndrome (ACS) وقد شملت المصابين بالذبحة الصدرية Angina pectoris وعددهم 29 ( 18 ذكور ، 11 اناث ) ومعدل اعمارهم تتراوح ما بين ( 45 - 65 ) سنة والمصابين باحتشاء العضلة القلبية Myocardial infarction ( MI) وعددهم (52) ( 30 ذكور و22 اناث ) واعمارهم تتراوح ما بين ( 45 - 70 ) سنة . المجموعة الثانية (B) : - ضمت المصابين بعجز القلب Heart Failure وعددهم 20 ( 10 ذكور و10 اناث ) واعمارهم تتراوح ما بين ( 45 - 65 ) سنة .المجموعة الثالثة (C) : - شملت المصابين بالارتجاف الاذيني Atrial flutter ( AF) وعددهم 18 ( 10 ذكور و8 اناث ) واعمارهم تتراوح ما بين ( 50 - 70 ) سنة .المجموعة الرابعة (D) : - والاخيرة وتضم المصابين بالوذمة الرئوية Pulmonary edema)) وعددهم 15 ( 4 ذكور و11 اناث ) واعمارهم تتراوح مابين ( 65 - 75 ) سنة .اما مجموعة السيطرة فقد ضمت 25 فردا (10 ذكور 15 اناث ) من الاصحاء والذين تتراوح اعمارهم مابين( 45 - 65 ) سنة. واظهرت الدراسة الحالية ما يلي : - 1 - انخفاض معدل التكسر الازموزي Osmotic fragilityمعنويا وعند مستوى (p<0.01) لدى المرضى المصابين ببعض امراض القلب مقارنة بمجموعة السيطرة عدا المصابين بالوذمة الرئوية ، كما سجلت مجموعة المصابين بالارتجاف الاذيني انخفاضا معنويا مقارنة بالمجاميع المرضية الاخرى ومجموعة السيطرة ولدى كلا الجنسين.2 - ارتفاع تركيز الكولسترول الكلي معنويا عند مستوى(p<0.01) لدى المجاميع المرضية مقارنة بمجموعة السيطرة ولكلا الجنسين كما ارتفع مستوى الكولسترول لدى المصابين بالمتلازمة التاجية الحادة , وعجز القلب . اما عند المقارنة ما بين الذكور والاناث هنالك ارتفاعا معنويا لدى الاناث المصابات بالوذمة الرئوية مقارنة بالذكورP < 0.01 3 - ارتفاع تركيز البروتينات الدهنية واطئة الكثافة LDL - chol معنويا لدى المجاميع المرضية مقارنة بمجموعة السيطرة وبمستوى معنوية P < 0.01 )) عدا الذكور المصابين بالارتجاف الاذيني حيث كانت النسب ضمن الحدود الطبيعية ولا يوجد فرقا معنويا بين الذكور والاناث .4 - انخفاض تركيز البروتينات الدهنية عالية الكثافة HDL - cholمعنويا وبمستوى P < 0.01) ) لدى مجاميع المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة (P < 0.01) ولدى المقارنة ما بين الذكور والاناث نجد ان هنالك ارتفاع معنوي للاناث المصابات بعجز القلب مقارنة بالذكور .5 - ارتفاع معنوي في تركيز الكليسيريدات الثلاثية عند مستوى(P< 0.01) في المجاميع المرضية ( الذكور والاناث ) مقارنة بمجموعة السيطرة ولا توجد فروقا معنوية بين الاناث والذكور في المجاميع كافة .6 - ارتفاع تركيز البروتينات الدهنية واطئة الكثافة جدا VLDL - cholلدى المجاميع المرضية ( الذكور والاناث ) وبمستوى معنوية P < 0.01) ) مقارنة بمجموعة السيطرة ولا توجد فروق معنوية بين الذكور والاناث في المجاميع كافة .7 - ارتفاع في تركيز الكلوكوز لدى المجاميع المرضية ( الذكور والاناث ) وعند مستوى معنوية P < 0.01) ) مقارنة بمجموعة السيطرة في حين لا توجد فروقا معنوية بين الذكور والاناث في المجاميع كافة .8 - عدم وجود فروقا معنوية بين المرضى ومجموعة السيطرة في تركيز PCV%, Hb )) حيث كانت ضمن الحدود الطبيعية في حين كانت مستويات ESR مرتفعة معنويا وبمستوى (P< 0.01) لدى المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة .9 - ارتفاع فعالية الانزيمات AST, LDH , CPK معنويا عند مستوى (P< 0.01) لدى المجاميع المرضية مقارنة بمجموعة السيطرة, في حين لا توجد فروقا معنوية بين المرضى ومجموعة السيطرة بالنسبة للانزيم ALT . | This study was carried out at the Tikrit Hospital , the Central Care the study sample included , 135 patients of both sexes . The patients were assigned to four groups . The first group represented the patients of the cute coronary Syndrome (ACS), who were suffering from both the angina pectoris (AP) 29 patients ( 18 male and 11 female ) , their age ranged from 45 - 65 years, and the Myocardial Infraction ( MI ) ( 52 patients , 30 male and 22 female ), their age ranged between 45 - 70 years . The second group was related to the patients with Heart failure (HF) ( 20 patients , 10 male and 10 female ) , their age ranged from 45 - 65 years . The third group was for the patients suffering from Artial Flutter (AF) , ( 8 patients , 10 male and 18 female ) . The fourth group was dealt with the patients suffering from pulmonary Edema (PE) (15 patients 4 male and 11 female , their age ranged from , 65 - 75 years . The results obtained can be summarized as follows : 1 - A decrease in the Osmotic fragility rate was recorded for all the patients groups , with the exception of the (PE) disease group , when compared with the Control group . However the (AF) disease patients showed a significant decrease ( P < 0.05 ) , as compared with other disease patients group and the control for both sexes . 2 - The total Cholestrol level was found to be higher in the patients groups for both sexes . The highest cholesterol level was found in patients suffering from both the ACS and the H F diseases . The females suffering from PE disease showed a higher total cholesterol level than the males ( P < 0.01 ) . 3 - An increase in the LDH - cholesterol level was observed for all patients groups when compared with the control group with the exception of males suffering from (AF) disease , who showed a normal range percentages . Besides the difference between sexes was not significant . 4 - HDL - cholesterol level for patients of all groups was found to be lower than that of the control group ( P <0.01) moreover a significant increase for females suffering from HF disease ( P < 0.01 ) 5 - The triglyceride concenterat9ion was recorded to be higher for the patient groups ( males and females ) , when compared with the control group ( P < 0.0 ) . Never the less the differences between sexes were not significant . 6 - The VLDL - cholesterol concentration for the patients of all disease groups was recorded to be higher , when compared with the control group ( P<0.01). Besides the difference between sexes was not significant for this trait . 7 - An increase in the glucose concentration level for the patients of all disease groups , as compared with the control group was revealed ( P <0.01) . The difference between sexes was not significaul . 8 - Anon - significant different between the patients of all the disease groups and the control group , regarding Hemoglobin Hb and the packed cell volume PCV, percentages were observed ( P < 0.01 ), Nevertheless the values for ( Erythrocyte sedimentation Rate) (ESR) were found to be higher for the patients of the disease groups when compared with control group . 9 - Enzyme Concentrations of (CPK , LDH ,AST) were found to be higher in the patients of all the disease groups , when compared with the control groups ( P <0.01) .10 - The differences between patients of all the disease groups and the control group regarding ( ALT ) enzyme were found

تقييم اختبار البروكالســيتونين في التشخيص المبكر لتسمم الدم الجرثومي في الاطفال حديثي الولادة في مستشفى تــكريــت التعليــمي == Evaluation of Procalcitonin Test for Early Diagnosis of Neonatal Sepsis in Tikrit - Teaching Hospital

Author name: سـهى ماهــر عبـد الرشـــــيد
Supervisor name: وعد محمود رؤوف | موسى جاسم محمد
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology
Degree: Master
University: Tikrit University - College Of Science
Language: English
University location: Salahaddin
First pages:
Abstract: ان تشخيص الخمج ضمن فئة حديثي الولادة يعتبر بحد ذاته تحد , نظرا لكون الاختبارات التقليدية غالبا ما تؤدي الى التضليل بدل التشخيص . صممت هذه الدراسة لاجل البت بامكانية استخدام اختبار مستوى البروكالسيتونين كمعلم للتشخيص المبكر للحالات المشكوك باصابتها بتسمم الدم الجرثومي في حديثي الولادة بالمقارنه مع زرع الدم, C - reactive protein , عدم خلايا الدم البيض الكلي والتفريقي. تم جمع العينات التي اشتملت على كلا الجنسين خلال الفترة الزمنيه من شهر اب سنة 2008 ولغاية شهر اذار سنة 2009 من حديثي الولادة الوافدين الى ردهات الخدج والاطفال في مستشفى تكريت التعليمي والمشخصه سريرا من قبل طبيب الاطفال المختص على اشتباه اصابتهم بالمرض. لقد اشتملت الدراسه على 114 حاله اجري فحص زرع الدم في جميعها بينما اجريت فحوصات الدم ل 102 حاله , تم فحص CRP ل 84 حالة واختبر مستوى البروكالسيتونين في 73 حالة حيث يعزى عدم تساوي العدد الى عدم كفاية الدم لاجراء جميع الاختبارات . اظهرت نتائج زرع الدم ان 53 (46%) من العينات كانت موجبه منها, 32 (60%) ذكور و21 (40%) اناث . عدد حالات زرع الدم السالبة كانت 61 ( 54%) منها , 31 (51%) اناث و30 (49%) ذكور.اظهرت نتيجة التشخيص المختبري بان العزلات البكتيرية الاكثر شيوعيا كانت من جنس البكتريا العنقوديه السالبة لانزيم التجلط ومن Nocardia spp. لانزيم التخثر بنسبة 22% لكليهما تتبعها بكتريا Listeria monocytogenes بنسبة 17% تليها Klebsiella pneumoniae بنسبة 9% و6 % لكل منPseudomonas aeruginosa وStaphylococcus aureus اما باقي الانواع (Citrobacter diversus, Serratia marscesens, Serratia liquifascens, Lactobacillus spp., Peptostreptococcus spp., Micrococcus spp., Streptococcus pyogenes ) فقد كانت غير شائعة واعطت نسب 2% لكل واحد . بينت هذه الدراسة ان حملة تسمم الدم الجرثومي المتاخر سجلت 67% من الحالات بينما الباقي من النسبه ( 33%) كان ل حملة تسمم الدم الجرثومي المبكر .لقد كان عدد حالات التسمم الجرثومي المؤكد بين الذكور اعلى 32 (60 ) منه في الاناث 21 (40%). تبين ان من بين جميع المظاهر السريريه , قلة الرضاعة شكل اعلى نسبة بينما اعراض تبقع الجلد والقباع اعطت اقل نسبة, كما وبينت بان 30% فقط من الاصابات كانت عند الاطفال ذوي الوزن الطبيعي بينما شكل الاطفال الذين يقل وزنهم عن الطبيعي نسبة 70% . اظهرت دراسة عوامل الخطورة في الامهات بان العامل الاكثر شيوعا كان تمزق الغشاء الامنيوني لفترة تزيد عن 18 ساعة يتبعه عامل التهاب المجاري البولية والحمى واختناق داخل الرحم بالتتابع. نسبة الوفيات كانت اعلى في الحمله المتاخره لتسمم الدم كما كانت نسبة الوفيات اعلى عند حديثي الولادة ناقصي الوزن عنه عند ذوي الوزن الطبيعي احصائيا, كان لذوي الوزن الاقل من الطبيعي اهميه من الناحيه الاحصائيه . اظهر اختبار فحص الحساسية ان عزلات البكتريا السالبة لصبغة كرام كانت ذات مقاومه عاليه للمضادات المستخدمة في الدراسة الحالية بينما كل عزلة من عزلات البكتريا الموجبة لصبغة كرام كان لها نمط مقاومه مختلف للمضادات . كما واظهرت الدراسة لعوامل الضراوة بان العزلات البكترية السالبة لصبغة كرام كانت موجبة لاختبار انتاج انزيم اليوريز واختبار انزيم الهيمولايسن واختبار انزيم اللايبيز واللسيثينيز والبروتييزبنسبة 85% , 100% , 100% , 100% و62% على التوالي بينما كانت العزلات الموجبة لصبغة كرام موجبة للاختبارات بنسبة 61% , 100%, 89%, 94% و785 عالتوالي. اظهرت فحوصات الدم الروتينيه والتي كانت ذات قيمه معنويه بان 33% من بين حالات زرع الدم الموجبة كان عدد خلايا الدم البيض فيها منخفض , 19% من الحالات كان عدد الخلايا البيض مرتفع اما باقي النسبة المؤية فقد كان نتيجة فحص عد خلايا ضمن المستوى الطبيعي فيما يتعلق بحالة تواجد الخلايا العدله غير الناضجة في الدم المحيطي فقد بينت الدراسه ان 79% من حالات زرع الدم الموجبة كانت ايضا موجبة من ناحية تواجد الخلايا العدله غير الناضجه فالدم بينما باقي النسبة ضمن حالات زرع الدم الموجب فقد كانت سالبة لتواجد هذا النوع من الخلايا.علما ان الاختلافات الاحصائيه المتعلقه بالخلايا العدله غير الناضجه كانت ذات قيمة معنويه عاليه. بالنسبة لفحص CRP كانت الفروقات الاحصائيه غير ذات قيمه معنويه مابين الحالات الموجبه لزرع الدم عن الحالات السالبه . وفيما يخص نتيجة فحص PCT الذي تم قياسه باستخدام طريقة القياس شبة الكمي الكرماتوغرافيه المناعيه فقط ظهر ان تركيز البروكالسيتونين في المصل لم يكن ذا فرق احصائي معنوي بين المرضى المصابين ببكتريا موجبه لصبغة كرام عن المصابين ببكتريا سالبة لصبغة كرام. اظهرت نتائج دراستنا ان 21% من حالات زرع الدم الموجبه اعطت مستوى بروكالسيتونين اقل من 0.5 نانوغرام لكل مل وباقي النسبة توزعت بين مستويات البروكالسيتونين الباقيه ≥0.5 ≥2 ≥10. بالنسبة لحالات زرع الدم السالبة فقد اظهرت نتيجة قياس مستوى PCT بان نسبة 49% كان ضمن مستوى البروكالسيتونين<0.5 نانوغرام لكل مل بينما 51% كانت ضمن المستويات ≥0.5 ≥2 ≥ 10 نانوغرام لكل مل بمعنى لايمكن استبعاد حصول اصابة جهازيه حتى لو كانت نتيجة الزرع الدم سلبية. كما لم تتوافق نتيجة البروكالسيتونين مع نتيجة فحص الCRP لكل الحالات فقد سجلت اعلى مستويات للبروكالسيتونين بينما كان فحص ال CRP لها سالب , ومن مقارنة نتائج عد الخلايا البيض مع نتيجة البروكالسيتونين التي اجريت لنفس الحالات ظهر بان 68 % من الحالات كانت ضمن معدل عدد الخلايا الطبيعي بالوقت الذي اعطت مستوى عالي للبروكالسيتنوين≤10 نانوغرام لكل مل و18% فقط من الحالات كان عدد الخلايا البيض مرتفع وباقي النسبة اشتملت عل حالات انخفض بها عدد الخلايا البيض عن الطبيعي . من بين كل الحالات الي اجري لها فحص مستوى البروكالسيتونين سجلت 39 حالة بنسبة 53 % ظهرت بها الخلايا البيض العدلة غير الناضجة فالدم المحيطي . عند مقارنة اختبار البروكالسيتونين مع باقي الفحوصات الروتينه المستخدمه بالدراسه اتضح بانه اكثر حساسية في تشخيص تسمم الدم الجرثومي وفقا لذلك , نستنتج بان البروكالسيتونين هو محدد اكثر حساسية من الفحوصات التقليدية( فحص زرع الدم وفحص ال CRP وفحص عد الخلايا البيض) في التشخيص المبكر لتجرثم الدم الناجم عن البكتريا عند الاطفال حديثي الولاده . | The diagnosis of neonatal infection is challenging because traditional markers of infection are often misleading instead of diagnosing. This study was conducted to determine Procalcitonin (PCT) level as an early marker for diagnosis of suspected sepsis in neonates in comparison with C - reactive protein, blood culture, total and differential white blood cell counts. From August, 2008 till March, 2009, samples were taken from neonates (males and females) admitted to the pediatrics - neonatal wards at Tikrit Teaching Hospital who were clinically suspected with sepsis as diagnosed by the physician in the hospital with any features suggestive of sepsis. The study includes a total of 114 cases. Blood cultures were done for all cases. Hematological tests were performed for 102 cases. C - reactive protein (CRP) was determined in 84 cases, while Procalcitonin level was determined in 73 cases. The differences in the number of samples involved in each test were due to the inadequate amount of blood specimens to perform all investigations. The results of blood culture showed that 53 (46%) of samples were positive, of them 32 (60%) were males and 21 (40%) were females. The number of negative cases were 61 (54%), of them 31 (51%) were females and 30 (49%)were males. The results of identification showed that the most frequent bacterial isolates were Coagulase Negative Staphylococci and Nocardia spp. (22% for each), followed by Listeria monocytogenes 17%, Klebsiella pneumoniae, 9% Pseudomonas aeruginosa 6% and Staphylococcus aureus 6%, while (Citrobacter diversus, Serratia marscesens, Serratia liquifascens, Lactobacillus spp., Peptostreptococcus spp., Micrococcus spp., Streptococcus pyogenes) were frequently less isolated recording 2% for each . This study revealed that, late - sepsis was recorded in 67% of cases while the rest (33%) were with early - sepsis and also revealed that. The number of proven sepsis were higher in males 32 (60%) than in females 21 (40%). Among all clinical manifestation, poor feeding had the highest proportion, while mottling and grunting had the smallest proportion. Only 30% of neonates were of normal birth weight, while 70% were low birth weight, very low birth weight and, extremely low birth weight respectively. Study of maternal risk factors revealed that the most frequent factor was the Prolonged Rupture of membrane followed by maternally UTI, fever and intrapartum asphyxia, respectively. The fatality rate was higher in late - sepsis cases, also it was higher in low birth weight than in normal birth weight neonates, statistically VLBW had the highest value. The antibiotics susceptibility test revealed that Gram negative isolates showed high resistance to antibiotics used in the present study. Each isolate of the Gram positive bacteria showed different pattern of resistance against the antibiotics used. Results of virulence factor showed that 85%, 100%, 100% , 100% and 62% of Gram negative isolates and 61%, 100% , 89%, 94% and 78% of Gram positive isolated produced Urease , Hemolysin, Lipase, Lecithinase and alkaline protease, respectively. Results of routine hematological tests at which the differences were statistically significant showed that 33% of culture positive cases had leucopenia, 19% of cases had leukocytosis, while the rest were in the category of normal range. Concerning the shift to left, results showed that (79%) of culture positive cases were recorded as positive and the rest were negative shift to left neutrophil the differences concerning with the shift left were statistically highly significant. For CRP, the differences were not significant among culture positive and culture neative cases. With reference to PCT test which had been measured using the immunochromatographic semi - quantitative method, that serum procalcitonin concentrations were not significantly different between the patients with Gram - positive and those with Gram negative infections. Results of our study showed that 21% of culture positive cases were <0.5 ng/ml (which were regarded as negative), while the rest which were with high level of PCT were distributed among levels of PCT≥0.5 ≥2 ≥10 ng/ml. As for culture negative cases, 49% of PCT were <0.5 ng/ml, while 51% of cases were in levels of ≥0.5 ≥2 ≥10 ng/ml which means that systemic infections cannot be excluded though they were culture negative. In addition PCT results did not fit with CRP all the time since some cases recorded higher level of PCT ≥10 ng/ml despite they were negative for CRP. The comparison between results of PCT and WBC for the same performed cases showed that 68% of cases were in the category of normal WBC range, meanwhile they had high level of PCT. Only 18% were in the category of leukocytosis, and the rest of percentage were in the category of leucopenia. Among all cases performed for PCT, 39 (53%) cases had left shift neutrophil in the peripheral blood when the differential counts were performed. when PCT was compared with other routinely measured parameters used in this study, It seemed to be significantly more sensitive in sepsis diagnosis. Accordingly, we can conclude that PCT is a more sensitive marker than other traditional tests (blood culture, CRP and WBC count) that could be used in early diagnosis of bacterial sepsis in neonates.

تاثير الترب الملوثة بالمخلفات النفطية على نمو وانتاجية صنفين من الحنطة والشعير ومعالجتها بالغسل == The Effect of the Soils Polluted with Oil Residues on the Growth & Productivity of Two Species of Wheat and Barley and its Treatment by Washing

Author name: ميسون مصطفى جاسم محمد
Supervisor name: جهاد ذياب محل الجنابي
General topic: Biology
Specific topic: Plant - Environment
Degree: Master
University: Tikrit University - Faculty Of Education
Language: Arabic
University location: Salahaddin
First pages:
Abstract: اجريت الدراسة في مختبرات قسم علوم الحياة بكلية التربية - جامعة تكريت؛ لمعرفة تاثير تلوث الترب الزراعية بالمخلفات النفطية على نمو وانتاجية صنفين من محصولي الحنطة Triticum aestivum L.والشعيرHoredum sativum L. وامكانية معالجة هذه التربة بالغسل وتاثير ذلك على الانبات.اذ تم استخدام مخلف نفطي(دهن سيارات مستخدم) وتلويث التربة بثلاث تراكيز 4000 و8000 و12000 جزء بالمليون حيث اجريت هذه الدراسة في حقل زراعي محمي( بيت سلكي) خلال الموسم الزراعي لعام2005 - 2006، وتلخصت نتائج الدراسة بما يلي : - 1 - اظهرت النتائج ان الترب الملوثة بالمخلفات النفطية ادت الى حصول خفض في سرعة الانبات في تركيز 12000ppm وكانت اعلى نسبة خفض(63.41%) في الحنطة صنف عراق و(45.37%) في محصول الشعير صنف امل اما الترب الملوثة بالتراكيز القليلة، فقد ادت الى حدوث زيادة معنوية مقارنة بمعاملة السيطرة اذ وصلت اعلى نسبة ارتفاع(10.73%) في محصول الشعير صنف امل.2 - اظهرت النتائج حصول انخفاض في بعض الصفات الحقلية للنباتات منها طول النبات، ، عدد الاوراق ، عدد الاشطاء ، الوزن الجاف للمجموع الخضري والوزن الجاف لمجموع الجذري في الترب الملوثة بتركيز 8000 و12000ppm، في حين اظهر التركيز 4000ppm تقاربا اوزيادة في نسب هذه الصفات مقارنة بمعاملة السيطرة.3 - اثرت الترب الملوثة بتراكيزعالية 8000 و12000ppm سلبيا على انتاجية محصولي الحنطة والشعير في (طول السنبلة، عدد الحبوب/سنبلة ووزن مئه حبة)، في حين حصلت زيادة معنوية مقارنة بمعاملة السيطرة في الترب الملوثة بتركيز 4000ppm .4 - خفض في كمية الكلوروفيل a،كلوروفيل b والكلوروفيل الكلي(a+b) في الترب الملوثة بالتراكيز العالية من المخلفات النفطية،وحصول زيادة او عدم حصول فرق معنوي مع معاملة السيطرة في الترب الملوثة بتركيز قليل 4000ppm .5 - حصول خفض في كمية الكاربوهيدرات في الاجزاء الخضرية في كلا الصنفين لمحصولي الحنطة والشعير في الترب الملوثة بالتراكيز العالية من المخلفات النفطية اذ وصلت اعلى نسبة خفض (41.64%) في الحنطة صنف تموز - 2 و(46.72%) في الشعير صنف بركه. في حين كان هناك تقارب مع معاملة السيطرة حدث في الترب الملوثة بالتراكيز القليلة 4000ppm.اما فيما يخص البذور فكانت اعلى نسبه خفض (24.82%) في حنطه تموز - 2 حدثت في تركيز8000ppm اما في12000ppm فلم تتكون بذور في حين لم تتكون بذور في محصول الشعير في التركيزين 8000 و12000ppm . 6 - ادى تلوث التربة بالمخلفات النفطية الى زيادة تراكم لبعض ايونات العناصر الثقيلة والصغرى(الرصاص، النحاس والزنك) في التربة بزيادة تركيز المخلفات النفطية، ومن ثم انتقال ايونات هذه العناصر الى النباتات وتراكمها في اجزاء النباتات المختلفة ووجد في الغالب تركيز ايونات العناصر في الجذور اعلى من تركيزها في الاجزاء الخضرية والبذور.7 - بينت النتائج ان عملية معالجة الترب الملوثة بالمخلفات النفطية بطريقة الغسل ادت الى حصول خفض في تركيز الملوثات في الترب وكانت اعلى نسبة ازالة في التربة الرملية ثم التربة المزيجية الغرينية، وسجلت ادنى نتيجة للغسل في الترب الطينية.حيث كانت نسبة ازالة المخلفات 87% و72% و48% للترب الثلاث على التوالي.8 - ادت عملية غسل التربة الى تقليل التاثيرات السلبية للمخلفات النفطية وذلك من خلال تاثيرها الايجابي في تحسين عملية انبات البذور.اذ حصلت اعلى نتيجة في سرعة الانبات (1.35) في التربة المزيجية الغرينية. | This study is conducted in the laboratories of Department of Biology, College of Education, Tikrit University to discover the effect of the Soils polluted with Oil residues on the Growth and Productivity of Two Species of Wheat plants Triticum aestivum L. and Barley plants Horeum sativum L. and the Possibility of its Treatment by Washing and its Effect on germination. Oil residue (used diesel and kerosin engines) was used to polluted Soil with three concentrations 4000, 8000, 12000 part per million and This study was conducted in a protected farm during the planting season of 2005 - 2006. The results of the study can be summed up in the following : 1. The results showed that the sample of Soils polluted with Oil residues resulted in redacting in the growth speed with the concentration 12000ppm, lowest rate was 63.41% in the class Iraq and 45.37% in the class Amal,whereas samples of Soil polluted with low concentration resulted in significant increasing reached 10.73% in class Amal, when compared with the control treatment. 2. The results showed a decreasing in certain features of the plants such as plant length, number of leaves, number of offshoots, the weight of dry plants and the weight of dry roots in the polluted soils with the concentration of 8000 and 12000 ppm, whereas the concentration 4000ppm shows proximity or increasing in the rate of these features compared with the control treatment.3. The polluted soils with high concentration of 8000 and 12000ppm affected negatively the productivity of wheat and barley on (length of ear, number of grains/ an ear of 100 grains) whereas a significant increasing, compared with control treatment, in Soils polluted with the concentration of 4000ppm.4. A reduction in the amount of chlorophyll a, chlorophyll b and total chlorophyll (a+b) in the soils polluted with High concentration of Oil residues, and an increasing or no significant difference with the control treatment in the Soils with low concentration 4000ppm.5. A reduction in the amount of Carbohydrates was happened in the green parts of both species, Barley and wheat, in the Soil polluted with high concentration of oil residues reached 41.64% in class Tamooz - 2 and 46.72% in class Amal, whereas there was approximate with control treatment happened in samples of Soil polluted with low con.4000 ppm but no Seeds where produced in the concentration 12000 ppm, no Seeds where produced in both concentration 8000,12000 ppm of barley.6. The Soil polluted with Oil residues resulted in an increasing in the accumulation of certain ions of heavy elements and minor elements (lead, copper and zinc) in the Soil by increasing the concentration of oil residues and the movement of the ions of these elements into the plats and their accumulation in the different parts of these plants and its found that the concentration of these ions in the roots is higher than that in green parts and seeds.7. washing treatment of Soil polluted with oil residues resulted in a reduction of pollutant concentration in the Soil. Gradient of removing rate had the following arrangement : sandy, clay, and muddy soil, according to the following rates(87,72,48) respectively.8. washing the Soil reduced the negative effects of Oil residues during the positive role improving rate of Seeds germination, High Speed of germination was(1.35) in the clay Soil

تقدير مستويات هرمونات الغدة الدرقية وبعض الهرمونات ذات العلاقة في الحمل الطبيعي والحمل المهدد بالاجهاض في مدينة تكريت == Estimation of Thyroid hormones concentrations and some related hormones in normal pregnancy and threatened abortion in Tikrit

Author name: علياء صالح جواد الناصري
Supervisor name: زيد محمد مبارك المهداوي | هدية احمد خليل
General topic: Biology
Specific topic: Zoology
Degree: Master
University: Tikrit University - College Of Science
Language: Arabic
University location: Salahaddin
First pages:
Abstract: تهدف هذه الدراسة الى اظهار العلاقة ما بين مستويات هرمونات الغدة الدرقية Thyroid hormones (الثايرونين ثلاثي اليود ,T3 الثايروكسين T4) وبين حدوث حالات الحمل المهدد بالاجهاض ، بالاضافة الى تناول دراسة التغيرات الحاصلة في هرموني الاستروجين E2 والبرولاكتين PRL وكذلك الهرمون المحفز للدرقية TSH وعدد من المقاييس الدموية والكيموحيوية (تركيز هيموغلوبين الدم Hb , النسبة المئوية لحجم خلايا الدم المضغوطة PCV% , تركيز البروتين الكلي Total protein ) اثناء الحمل الطبيعي والحمل المهدد بالاجهاض . شملت الدراسة 280 عينة دم تم اخذها من النساء اللاتي تتراوح اعمارهن بين 15 - 36 سنة وممن راجعن مستشفى تكريت التعليمي والعيادات الخارجية لبعض الاطباء, وتم تقسيمها الى ثلاثة مجاميع وهي : الاولى ضمت 160 عينة دم من النساء ذوات الحمل الطبيعي ، والثانية ضمت 80 عينة دم من النساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض والثالثة ضمت 40 عينة دم من النساء غير الحوامل كمجموعة سيطرة . اظهرت نتائج هذه الدراسة ارتفاعا معنويا في تركيز هرمونات الدرقية T3 وT4 في مجموعة النساء ذوات الحمل الطبيعي ( ولجميع اشهر الحمل ) عند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) مقارنة مع مجموعة السيطرة ، وكذلك حصول انخفاض معنوي في تركيز هرمونات الدرقية T3 وT4 في مجموعة النساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض (وللاشهر الاربعة الاولى من الحمل ) عند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) مقارنة مع مجموعة السيطرة ، بينما لم تسجل النتائج وجود فروق معنوية بين مجموعة النساء ذوات الحمل الطبيعي ( ولجميع اشهر الحمل ) ومجموعة السيطرة في تركيز هرمون TSH,اذ كانت ضمن الحدود الطبيعية , في حين تم تسجيل ارتفاع معنوي في تركيز هرمون TSH في مجموعة النساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض ( للاشهر الاربعة الاولى من الحمل ) عند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) مقارنة مع مجموعة السيطرة . اظهرت النتائج ارتفاعا معنويا في تركيز هرمون الاستروجين E2 في مجموعة النساء ذوات الحمل الطبيعي ( ولجميع اشهر الحمل ) مقارنة مع مجموعة السيطرة وعند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) وعلى خلاف ذلك اظهر تركيز هرمون الاستروجين E2 انخفاضا معنويا في مجموعة النساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض ( للاشهر الاربعة الاولى من الحمل ) مقارنة مع مجموعة السيطرة وعلى مستوى معنوية ( p < 0.01 ) . وسجلت النتائج ارتفاعا معنويا في تركيز هرمون البرولاكتين PRL في مجموعتي النساء ذوات الحمل الطبيعي والنساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض ( ولجميع اشهر الحمل) عند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) مقارنة مع مجموعة السيطرة. ولوحظ ان هناك انخفاضا معنويا في تركيز البروتين الكلي في مجموعتي النساء ذوات الحمل الطبيعي والنساء ذوات الحمل المهدد بالاجهاض ولجميع اشهر الحمل مقارنة مع مجموعة السيطرة وعند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) .واخيرا اظهرت النتائج انخفاضا معنويا في قيم بعض مقاييس الدم ( % PCV , Hb ) وفي كلا المجموعتين المدروستين ولجميع اشهر الحمل مقارنة مع مجموعة السيطرة وعند مستوى معنوية ( p < 0.01 ) . وقد اوضحت الدراسة وجود علاقة بين الانخفاض في مستوى بعض هرمونات الدرقية ونسبة معينة من النساء الحوامل المهدد حملهن بالاجهاض مما يعطي تفسيرا بان لهذه الغدة دورا مهما في التاثير على طبيعة الحمل والحفاظ عليه . | This study aims to show the relationship between thyroid gland hormones levels (Triiodothyronine T3, Thyroxine T4 ) and the incidence of threatened abortion pregnancy . the changes in Estrogen , Prolactin and Thyroid stimulating hormone were also investigated. The characteristics included in this work were some blood measurements and biochemical traits ( Hemoglobin Hb , Packed cell volume PCV% and the total protein concentration ) . The work performed through using 280 blood samples taken from women ( 15 - 36 years age ) , attending Tikrit Teaching Hospital and some private medical clinc s. The sample was divided into three groups , the first group represented normal pregnant women ( 160 blood samples ) and the second group included the threatened abortion pregnancy women ( 80 blood samples ) , where as the third group represented a non pregnant women ( 40 blood samples ) which considered as a control group . The results obtained revealed a significant increase ( p < 0.01 ) in the concentration of thyroid hormones ( T3, T4 ) for the normal pregnant women , for all the pregnant months , when compared with the control group . A significant decrease ( p < 0.01 ) was also detected in the abortive threatened pregnancy women , when compared with control group women , regarding T3 and T4 hormones concentration for the first four months of pregnancy . Non significant difference between the normal pregnant women group and the control group. It was evident that TSH concentration increase significantly ( p < 0.01 ) in the threatened abortion pregnant women for the first four pregnancy months when compared with the control group women . Estrogen hormone concentration was found to be significantly ( p < 0.01 ) higher in the normal pregnant women for all pregnancy months as compared with the control group women . On the contrary a significant decrease in estrogen hormone concentral in the abortive threatened women for the first four pregnancy months when compared the control group was found .The prolactin hormone concentration was found to be higher significantly ( p < 0.01 ) in both the normal pregnant women and the abortive threatened pregnant women for all the pregnancy months when compared with the control group . It was revealed that the total protein concentration level for both the normal and the abortive threatened pregnant women decreased significantly ( p < 0.01 ) for all pregnancy months . A significant decrease ( p < 0.01 ) in some blood characteristics ( Hb , PCV % ) for both the normal and abortive threatened pregnant women for all pregnancy months were recorded as compared with the control group . This study confirmed an apparent relationship between the decrease of some thyroid gland hormones concentration and the existence of some percentages of abortive threatened pregnant women , which indicate the importance of thyroid gland effect on the nature and the persistence of pregnancy .

دراسة السمية الوراثية لحبوب منع الحمل على الانسان والفئران البيض == Study the genotoxicity for oral contraceptive pills on human and white mice

Author name: اسراء ايوب علوان منصور القره غولي
Supervisor name: عبد الامير ناصر الركابي | سعد محمد الندا
General topic: Biology
Specific topic: Biotechnologies
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad - College Of Science - Department Of Biotechnology
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: الهدف من الدراسة الحالية هو تسليط الضوء على التاثيرات الوراثية الخلوية لحبوب منع الحمل الفموية المركبة على عينات دم ماخوذة من نساء اعتمدن هذا العقار كمانع حمل وفي الحيوانات المختبرية (الفار الابيض) بوصفه نظاما اختباريا ، وتم الاعتماد على بعض التحليلات الوراثية الخلوية شملت الانحرافات الكروموسومية في خلايا نقي العظم والطحال ، الانوية الصغيرة ومعامل الانقسام بالاضافة الى تشوهات الهيكل العظمي للاجنة في الفار الابيض، والانحرافات الكروموسومية ، الانوية الصغيرة ومعامل الانقسام في عينات دم الانسان . درست التاثيرات الوراثية لمجموعة من النساء بفئتين عمرية مختلفة بين )25 - 34) و(35 - 45) سنة والتي قسمت الى اربع مجاميع ، اظهرت النتائج عدم وجود فرق معنوي باحتمالية (P<0.05) في النسبة المئوية للانحرافات الكروموسومية الكلية لمجموعة من النساء اللواتي ياخذن حبوب منع الحمل المركبة (COCPs) ذوات الفئة العمرية )25 - 34) سنة ، بينما اظهرت وجود فرقا معنويا في النسبة المئوية للانحرافات الكروموسومية للنساء ذوات الفئة العمرية (35 - 45) سنة . كذلك لوحظ وجود فرق معنوي باحتمالية (P<0.05) في اعداد الانوية الصغيرة (MN) لمجموعة من نساء ياخذن (COCPs) في كلا الفئتين العمريتين. في التجربة الاخرى درست التحليلات الوراثية الخلوية (الانحرافات الكروموسومية) للمانع (COCPs) على الفئران، التي قسمت الى خمس مجاميع شملت مجموعة السيطرة السالبة التي تمثل الحيوانات المجرعة بدارئ (PBS) ومجموعة السيطرة الموجبة المعاملة بعقار السايكلوفوسفومايد (CP) وثلاث مجاميع معاملة بالمانع (COCPs) بالتراكيز(2.44), (1.25) (0.60) , ملغم / كغم ، اشارت النتائج ان التركيزين (2.44), (1.25) ملغم / كغم سجلا فروقا معنوية باحتمالية (P<0.05) في نسبة الانحرافات الكروموسومية بينما لم تسجل المجموعة ذات التركيز (0.60) ملغم / كغم فرقا معنويا في نسبة الانحرافات الكروموسومية لخلايا نقي العظم والطحال . واظهرت نتائج التحليل الاحصائي وجود فروقا معنوية باحتمالية (P<0.05) للجرع المختلفة للمانع (COCPs) على اعداد الانوية الصغيرة اذ كانت معدلات اعداد الانوية الصغيرة هي (1.26) , (2.50) , (3.53) للجرع ذات التراكيز (2.44) ،(1.25) ، (0.60) ملغم /كغم على التوالي. وكذلك اظهرت النتائج ان هناك فروقا معنويا باحتمالية (P<0.05) في معدل اوزان اجنة فئران المجاميع المدروسة ، فقد اظهرت مجموعة السيطرة السالبة اعلى معدل وزن للاجنة بلغ (1.55) غم، في حين سجلت معاملة السيطرة الموجبة اقل معدل وزن بلغ (0.56) غم. بينما كانت معدلات اوزان الاجنة للمجاميع المجرعة بالمانع ((COCPs ذات التراكيز (0.60) , (1.25) , (2.44) ملغم /كغم هي (1.34) , (1.32) (1.40),غم على التوالي . اما بالنسبة لحساب عدد هلاكات الاجنة فلم يوجد اي تاثير ملحوظ لحبوب منع الحمل المركبة (COCPs) على هلاكات الاجنة في حين ظهرت الهلاكات بنسبة عالية جدا في السيطرة الموجبة ، لكن عند دراسة تاثير حبوب منع الحمل المركبة على الهيكل العظمي للاجنة لم نلحظ اي تشوهات بالهياكل العظمية لجميع اجنة الفئران للمجاميع الثلاث المعاملة بحبوب منع الحمل المركبة . | Our work aimed to study the cytogenetic effects of Combined oral contraceptive pills (COCPs) on blood samples obtained from women utilized this contraceptive and lab animals (mice) treated with (COCPs). Several cytogenetic analyses (Chromosome aberrations of bone marrow and spleen , Micronuclei , Mitotic index and skeleton abnormal of embryos) in mice and (CA , MN , MI) in blood samples of human were used in this study . Studied the genetic effect for women in two age groups rang between (25 - 34) , (35 - 45) years in four groups. Result show non significant difference (P<0.05) in percentage of total chromosome aberration in women taking (COCPs) of age group rang between (25 - 34) years. While show significant differences (P<0.05) in percentage of (CA) in women of age group rang between (35 - 45) years. Also it was noticed significant differences (P<0.05) in Micronuclei (MN) of women taking oral contraceptive pills of two age groups. In other experiment studied the cytogenetic analysis for (COCPs) on mice that were divided into five groups as follows : Negative control group that animals orally treated with PBS buffer, Positive control group was treated with (CP) and three groups treated with (COCPs) with concentration (2.44) , (1.25) , (0.60) mg/kg and the result show was concentration (2.44) , (1.25) mg/kg recorded significant differences (P<0.05) while group with concentration (0.60) mg/kg non significant difference. also it was noticed Significant differences (P<0.05) in three groups treated with (COCPs) in Micronuclei rate and were the rates (3.53%) , (2.50%) , (1.26%) of concentration (2.44) , (1.25) , (0.60) mg/kg. Also result show statistically significant differences (P<0.05) in body weight of mice embryo of studied groups, Negative control group recorded rate highly in embryo body weight was (1.55) gm. While recorded Positive control group rate less in weight was (0.56) gm while were rates in embryo body weight of orally treated groups with (COCPs) with concentration (2.44) , (1.25) , (0.60) mg/kg were (1.40) , (1.32) , (1.34) gm . but non show any influences to (COCPs) in embryo number .while show died embryos in positive control group. also the results show non any abnormality in skeleton of embryos for three groups that treated with oral contraceptive pills.

العلاقة بين مرض قصور الدرقية ومقاومة الانسولين بدلالة بعض المؤشرات الالتهابية == The relationship between hypothyroidism and insulin resistance through some inflammatory markers

Author name: شيماء رزاق ابراهيم
Supervisor name: صباح ناصر العلوجي | خالد ابراهيم اللهيبي
General topic: Biology
Specific topic: Zoology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: يمتاز مرض قصور الدرقية بانخفاض مستوى هرمونات T3 وT4 الضرورية لعمليات انتاج الطاقة وحيوية الجسم ؛ لذلك ترافق هذه الحالة اضطرابات في عمليات الايض المختلفة في الجسم . اجريت الدراسة في المركز التخصصي للغدد الصم والسكري في بغداد ، وشملت 70 مريضا من مرضى قصور الدرقية ، تم تشخيص الحالة لديهم عن طريق قياس مستويات الهرمونات (TSH,T4,T3) . كما وشملت 60 شخصا اختيروا بشكل عشوائي من غير مرضى الغدة ، وقد تم التاكد من سلامة الغدة وعدم وجود قصور في وظيفتها لديهم. تضمنت الدراسة الكشف عن نسبة حدوث مقاومة الانسولين لدى مرضى الغدة ومقارنتها مع نسبة حدوثها لدى الافراد الاصحاء الغدة. وقد تم تشخيص مقاومة الانسولين باستخدام اختبارات (الببتيد الرابط C - peptide واختبار تحمل الكلوكوز الفموي Oral glucose tolerance test (OGTT) ، اذ ان ارتفاع مستوىCP والتحمل الضعيف للكلوكوز Impaired glucose tolerance (IGT) يشيران الى مقاومة مؤكدة للانسولين Definite insulin resistance (DIR) ، في حين وجود اضطراب في نتيجة احدهما يشير الى مقاومة ممكنة للانسولين Possible insulin resistance (PIR) . تشير نتائج الدراسة الحالية الى ان كلتا الحالتين المرضيتين (القصور الدرقي ومقاومة الانسولين) مترافقتان وشائعتان لدى النساء وكبار السن وكذلك لدى الافراد من فئة المفرطي الوزن (BMI=25 - 29.9 kg/m2) والبدناء(BMI>30 kg/m2) ، فقد وجد ان اغلب مرضى قصور الدرقية المؤكدي المقاومة للانسولين هم من الفئات العمرية 40 - 21 سنة و60 - 41 سنة وقد شكلوا نسبة %38.5 لكل فئة وكان اغلبهم من النساء ، وشكلوا نسبة %84.6 بالمقارنة مع نسبة %15.4 للذكور . اما المرضى الممكني المقاومة للانسولين فكان اغلبهم من الفئة العمرية 60 - 41 سنة وشكلوا نسبة %66.7 واغلبهم من النساء ايضا وشكلوا نسبة %77.8 بالمقارنة مع نسبة %22.2 للذكور . كذلك يلاحظ ان اغلب المرضى المؤكدي المقاومة للانسولين هم من فئة البدناء وشكلوا نسبة %53.8 واغلب المرضى الممكني المقاومة للانسولين هم من فئة المفرطي الوزن وشكلوا نسبة %51.9 . وجد من نتائج البحث ارتفاع نسبة حدوث مقاومة الانسولين لدى مرضى قصور الدرقية ، فقد وجد ان %18.6 منهم لديه مقاومة مؤكدة للانسولين ، في حين كانت النسبة اقل بلغت %3.3 لدى الافراد الاصحاء الغدة . وبلغت نسبة المرضى الذين لديهم مقاومة ممكنة للانسولين %38.6 بالمقارنة مع نسبة %25 للافراد الاصحاء . وهي نسبة مرتفعة تؤكد دور قصور وظيفة الغدة الدرقية في نشوء مقاومة الانسولين. تضمنت الدراسة كذلك قياس مستويات بعض المؤشرات البايوكيميائية والمناعية لدى مرضى قصور الدرقية المؤكدي او الممكني المقاومة للانسولين ومقارنتها مع مستوياتها لدى افراد السيطرة الاصحاء. وشملت هذه المؤشرات قياس مستوى الكلوكوز في حالة الصيام ، وCP ، وانواع الدهون ، واختبار OGTT ، وHbA1c ، وTNF - α ، وIL - 6 ، وCRP ، والنسبة المئوية لذوي الخلايا اللمفية في الدم المحيطي . اظهر مرضى قصور الدرقية الذين لديهم مقاومة مؤكدة للانسولين تحملا ضعيفا للكلوكوز Impaired glucose tolerance (IGT) وذلك من نتائج اختبار OGTT ، وكذلك ارتفاعا في مستوى الكلوكوز في حالة الصيام بلغ 1.24±5.77 مليمول/ لتر ، وارتفاع مستوى CP بلغ 1.71 ±5.39 نانوغرام/ مليلتر ، وارتفاع معنوي في مستوى HbA1c والبالغ 0.84± %5.86 ، وقد كان مستوى هذه المؤشرات لدى هذه المجموعة اعلى من مستوياتها لدى المجموعتين الاخريين (NIR,PIR) وبالمقارنة مع السيطرة . شملت مجموعة مرضى قصور الدرقية الممكنة المقاومة للانسولين %10 لديهم مستوى مرتفع لـ CP و%28.6 لديهم تحمل للكلوكوز ضعيف (IGT) ، وبشكل عام اظهرت هذه المجموعة ارتفاعا معنويا عاليا في مستوى الكلوكوز في حالة الصيام بلغ 1.97±5.63 مليمول/ لتر وارتفاعا معنويا عاليا (P<0.01) في مستوى CP ، اذ بلغ 2.82±3.83 نانوغرام/ مليلتر ، وارتفاعا معنويا عاليا (P<0.01) في مستوى HbA1c والبالغ 1.62±%6.21 . اما بالنسبة لاختبار ذوي الخلايا اللمفية في الدم المحيطي ، فقد لوحظ ارتفاع معنوي عال في نسبتها لدى مجاميع المرضى المقاومة للانسولين مؤكدة او ممكنة بالمقارنة مع مجموعة السيطرة. اوضحت دراسة المؤشرات المناعية وجود نمط التهابي تحت سريري لدى مرضى قصور الدرقية المؤكدي المقاومة للانسولين ، وذلك من الارتفاع المعنوي العالي(P<0.01) لمستويات كل من TNF - α وIL - 6 التي بلغت 1.02± 6.46 بيكوغرام / مليلتر و2.14 ±50.6 بيكوغرام / مليلتر على التوالي بالمقارنة مع مجموعة السيطرة. اما مستوى البروتين الفعال سي C - reactive protein (CRP) فقد لوحظ ارتفاع مستوياته لدى مرضى قصور الدرقية جميعا سواء كانوا من المقاومين ام غير المقاومين للانسولين ، مما يشير الى كونه عاملا التهابيا غير نوعي له ارتباط بمرض قصور الدرقية ولكن ليس له دور في التفريق بين الحالات المقاومة وغير المقاومة للانسولين . اظهرت دراسة العلاقات الترابطية بين المؤشرات البايوكيميائية والمناعية التي تم قياسها لدى مجاميع الدراسة وجود علاقة ترابطية سالبة معنوية (P<0.05) بين CP وكل من HbA1c وT.Ch وHDL - C وF.G (P<0.01) . كذلك وجدت علاقة ارتباطية ايجابية معنوية عالية (P<0.01) بين TNF - α وكل من T.Ch وLDL - C ، وعلاقة ارتباط سالبة معنوية عالية (P<0.01) بين TNF - αو TSH لدى مجموعة المرضى المؤكدي المقاومة للانسولين . وفي مجموعة المرضى الممكني المقاومة للانسولين لوحظ وجود علاقة ارتباطية ايجابية معنوية (P<0.05) بين مستوى IL - 6 وBMI وF.G و(P<0.01) HbA1c . اما بالنسبة للبروتين الفعال سي فقد لوحظ وجود علاقة ارتباطية سالبة معنوية (P<0.05) بين مستواه ومستوى T.Ch وعلاقة ارتباطية ايجابية معنوية (P<0.05) بين CRP وكل من F.G وCP لدى مجموعة المرضى المؤكدي المقاومة للانسولين و(P<0.01) TNF - α لدى مجموعة المرضى الممكني المقاومة للانسولين. اظهرت الدراسة ارتفاع العامل الالتهابي IL - 6 لدى المرضى المؤكدي المقاومة للانسولين ونظرا لدوره المهم في العمليات الايضية المختلفة في الجسم ؛ لذلك وجد انه من الضروري دراسة تاثيره في وظيفة الغدة الدرقية وفعاليات اخرى ومقارنته مع تاثير عقار الكاربيمازول . وقد تم ذلك عن طريق حقن ثلاث مجاميع من الجرذان ، الاولى بالانترلوكين - 6 ، والثانية بعقار الكاربيمازول ، والثالثة بالمحلول الملحي الفسيولوجي بوصفها سيطرة. بينت هذه التجربة ان كل من الانترلوكين - 6 والكاربيمازول يسببان انخفاض مستويات هرمونات الدرقية (T4,T3) عند حقنها في الحيوانات ، كما ويسببان انخفاضا معنويا في وزن الجسم في حين لم يكن لهما تاثير في وزن الكبد. لوحظ انخفاض مستوى الكلوكوز في الدم لدى الحيوانات المحقونة بعقار الكاربيمازول ، بينما لم يحدث تغير في مستواه بتاثير الانترلوكين - 6 . اما بالنسبة لانواع الدهون فقد لوحظ ارتفاع معنوي لمستوى كل من T.G وVLDL - C لدى الحيوانات المعاملة بالانترلوكين - 6 ، في حين لم تتاثر مستويات الدهون في الحيوانات المعاملة بالكاربيمازول. واخيرا ادى حقن الحيوانات بالانترلوكين - 6 والكاربيمازول الى زيادة ذوي الخلايا اللمفية في الدم المحيطي . | Hypothyroidism is a condition in which thyroid hormones levels decreased in the blood. These hormones are necessary for energy production and body viability. In many occasions this condition is accompanied or followed by different metabolic disorders. The current study is conducted in the "Specialized center for endocrinology and diabetes" and carried on 70 hypothyroid patients and 60 randomly chosen individuals with normal thyroid function .Both groups were submitted to laboratory tests to evaluate thyroid function (T3,T4.TSH). The study involved evaluation of the relationship between hypothyroidism and insulin resistance (IR) . Health problem related to many diseases , became common lately. Insulin resistance diagnosed through two important tests : C - peptide (CP) and oral glucose tolerance test (OGTT). Patients are considered to have definite insulin resistance (DIR), if they have impaired glucose tolerance (IGT) and high level of CP. If one of the tests is abnormal, the patients have possible insulin resistance (PIR). The current study show that both conditions (hypothyroidism and insulin resistance) are associated and common in women, old and overweight individuals. The results show that most hypothyroid patients with DIR are at age between 21 - 40 and 41 - 60 year, which constitute about 38.5% for each. Most of them are women constituting 84.6% compared with 15.4% for men. Most hypothyroid patients with PIR are in the ages between 41 - 60 year, constituting 66.7%. The women constitute about 77.8% compared with less percentage for men 22.2%. Also we should notice that most definite insulin resistant hypothyroid patients are obese , and constitute about 53.8% , and most possible insulin resistant hypothyroid patients are overweight, and constitute about 51.9% Insulin resistance incidence is increased in hypothyroid patients, the results show that 18.6% of hypothyroid patients have DIR compared with less percentage 3.3% in healthy individuals , and about 38.6% hypothyroid patients have PIR compared with 2.5% in healthy individuals This study also considered some biochemical and immunological parameters which include : Fasting blood glucose, (FBG), CP, Lipid profile, OGTT, HbA1c, TNF - α, IL - 6, CRP and percentage of lymphocytes apoptosis in peripheral blood. The levels of these parameters are compared between the study groups. Hypothyroid patients with DIR show impaired glucose tolerance (IGT) and high level of fasting glucose reaching 5.77±1.24 mM/l , high level of CP reaching 5.39±1.71 ng/ml and high level of HbA1c reaching 5.86% ±0.84 .The values of these parameters in this group are higher when compared with other groups and control. About 10% of hypothyroid patients with PIR have high level of CP and 28.6% have IGT. In general, PIR hypothyroid patients show a significant (P<0.01) increase in F.G reaching 5.63±1.97 mM/l , significant (P<0.01) increase in CP level reaching 3.83 ±2.82 ng/ml , and significant increase in HbA1c reaching 6.21% ±1.62. The results of peripheral lymphocytes apoptosis test show significant (P<0.01) increase in hypothyroid patients (DIR or PIR) compared to control group. The results show a significant (P<0.01) increase in levels of TNF - α reaching 6.46±1.02 pg/ml and 50.6±2.14 pg/ml respectively , in hypothyroid patients with DIR compared to control and the high levels of these parameters refer to subclinical inflammation . The non - specific inflammatory marker CRP , which refers to systemic inflammation , also increases in all hypothyroid patients (Insulin resistant or none) The current study also includes the study of correlations between. biochemical and immunological parameters in the study groups. The results show that there was a negative significant correlation between CP and each of : HbA1c, T.G, HDL - C (P<0.05) and F.G (P<0.01). There was a positive significant correlation between TNF - α and each of T.Ch, LDL - C (P<0.01) and negative significant correlation between TNF - α and TSH (P<0.01) in DIR hypothyroid patients. Patients with PIR show positive significant correlation between levels of IL - 6 and each of : BMI, F.G (P<0.05) and HbA1c (P<0.01). In DIR hypothyroid patients, the CRP correlates negatively and significantly with T.Ch (P<0.05) and correlate positively and significantly with F.G and CP (P<0.05). In PIR hypothyroid patients, the CRP correlate positively and significantly with TNF - α (P<0.01). Since the inflammatory marker (IL - 6) increased in insulin resistant cases and known by its critical role in different metabolic reactions in the body, therefore, this study involves a design for an experiment to detect the thyroid gland function and compare its effects with the effect of Carbimazole : An antithyroid drug. The experiment include three groups of rats, each injected with different material : Recombinant human interleukin - 6 (rhIL - 6), Carbimazole , Normal saline (N.S) as control . The results of the experiment show that both IL - 6 and carbimazole cause a decrease in the levels of thyroid hormones (T3,T4) in animal blood , and cause a significant decrease in animal body weight , but there is no effect on the liver weight . There was a significant decrease in glucose level in the animals injected with carbimazole, while in the IL - 6 treated animals there was no change in glucose level. There was a significant increase in the Triglyceride (T.G) and very low density lipoprotein cholesterol (VLDL - C) in the animals treated with IL - 6 , while in the animals treated with carbimazole , there was no change . Finally, injection of the animals with IL - 6 or carbimazole causes significant increase in lymphocyte apoptosis in peripheral blood.

تاثير فيتامين E في تنشيط معالم النطف في الزجاج لمرضى العقم المصابين بقلة النطف ووهنها == Effect of Vitamin E on in Vitro Sperm Activation of Oligospermic and Asthenospermic Infertile Patients

Author name: ضرغام فالح حسن الشمرتي
Supervisor name: صباح ناصر العلوجي | يحيى كاظم السلطاني
General topic: Biology
Specific topic: Life Science
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: اجريت هذه الدراسة على 217 عينة من عينات السائل المنوي التي تعود الى 207 من المرضى الذين يعانون من قلة النطف Oligospermia ، ووهن النطف Asthenospermia ، وابيضاض المني Leukospermia من مراجعي المختبر الاستشاري لكلية الطب في جامعة الكوفة ، للمدة مابين تشرين الاول 2007 وايار 2008. وتم في هذه الدراسة تنشيط النطف البشرية لاولئك المرضى في الزجاج in vitro باستعمال تقنيتين مختلفتين هما : تقنية السباحة للاعلى وتقنية الخلط technique Mixing ولمدة تحضين مقدارها ثلاثين دقيقة في المستنبت ايرل للمرة الاولى ومستنبت ايرل + فيتامين E للمرة الثانية ، ومن ثم بيان تاثير فيتامين E في معالم النطف ، وكذلك بيان تاثير الالتهابات في معالم النطف قبل العلاج وبعده. اظهرت نتائج علاج المرضى الذين يعانون من ابيضاض المني حصول انخفاض معنوي (0.05 >P) في تركيز خلايا الدم البيض والخلايا البلعمية ، في حين كان الانخفاض غير معنوي (0.05 <P) في زمن الاماعة قياسا بقيمتها قبل العلاج فضلا عن حصول تحسن معنوي (0.05 >P) في تركيز النطف ، والنسبة المئوية للنطف المتحركة ، ومعامل حركة النطف ، ودرجة نشاط النطف قياسا بقيمتها قبل العلاج وكذلك عند اجراء عملية التنشيط قبل العلاج وبعده. اشارت نتائج تنشيط نطف المرضى الذين يعانون من قلة النطف (الحاد والمعتدل) ووهن النطف (الحاد والمعتدل) باستعمال تقنية السباحة للاعلى وتقنية الخلط (مستنبت ايرل لوحده ومستنبت ايرل+ فيتامين E) حصول تحسن معنوي (0.05 >P) في النسبة المئوية للنطف المتحركة ودرجة نشاط النطف ومعامل حركة النطف عند المقارنة بقيمتها قبل التنشيط. اشارت نتائج تنشيط نطف المرضى الذين يعانون من قلة النطف (الحاد والمعتدل) ووهن النطف (الحاد والمعتدل) باستعمال تقنية السباحة للاعلى (مستنبت ايرل لوحده ومستنبت ايرل+ فيتامين E) حصول انخفاض معنوي (0.05 >P) في تركيز النطف وتركيزخلايا الدم البيض عند المقارنة بقيمتها قبل التنشيط ، في حين لم تكن هناك فروقات معنوية في المعلمين المذكورين عند استعمال تقنية الخلط . اشارت نتائج تنشيط نطف المرضى الذين يعانون من قلة النطف (الحاد والمعتدل) ووهن النطف (الحاد والمعتدل) باستعمال تقنية السباحة للاعلى (مستنبت ايرل لوحده ومستنبت ايرل+ فيتامين E) حصول تحسن معنوي (0.05 >P) في النسبة المئوية للنطف السوية المقارنة بقيمتها قبل التنشيط ، في حين لم تكن الفروق معنوية في النسبة المذكورة عند استعمال تقنية الخلط . كما لوحظ حدوث تحسن معنوي (0.05 >P) في النسبة المئوية للنطف المتحركة ، ودرجة نشاط النطف ، ومعامل حركة النطف في عملية التنشيط في تقنيتي السباحة للاعلى والخلط عند استعمال مستنبت ايرل ممزوجا مع فيتامين E عند مقارنتها بتلك التي استعمال فيها مستنبت ايرل لوحده ، في حين كان هناك تحسن معنوي (0.05 >P) في تركيز النطف في تقنية السباحة للاعلى عند استعمال مستنبت ايرل مع فيتامين E عند مقارنتها بتركيز النطف عند استعمال مستنبت ايرل لوحده. يستنتج من هذه الدراسة ان العمل على تنشيط النطف البشرية بعد علاج الالتهابات يعطي نتائج افضل بكثير من التنشيط قبل العلاج ، لما لخلايا الدم البيض والخلايا البلعمية من تاثير مهم في معالم النطف . كذلك فان اضافة فيتامين E الى مستنبت ايرل اثبت من الدراسة كفاءة عالية في الحصول على قيم جيدة لمعالم النطف سواء عند تنشيط نطف مرضى العقم المصابين بقلة النطف (الحاد والمعتدل) او نطف المصابين بوهن النطف (الحاد والمعتدل). | This Study was performed on 217 seminal fluid samples belongs to 207 patients suffering from Oligospermia , Asthenospermia and Leukospermia at the consulting Laboratory of College of Medicine Kufa University during the period between October, 2007 and May, 2008. The objective of the persent study is to activation patient sperms quality in vitro by using two different techniques which are the swim - up technique and mixing technique for 30 minute of incubation in Earl’s medium and Earl’s medium + vitamin E to findout the effect of vitamin E on the sperms parameter. Althow, also the effects of infection on the sperm parameter before and after treatment ware evaluated also. . The results showed that the treatment of patient suffering from leukospermia showed revealed significant decrease (P<0.05) in the leukocyte and phagocyte concentration. However, the decrease was insignificant at the time of liquification in comparison with thar used befor treatment . Also a significant improvement (P<0.05) was found in sperm concentration, sperm motility percent, sperm motility index and sperm grade activity in comparison to that resulted befor treatment, as well as that done at the process of activation before and after the treatment. . The sperm activation of patients suffering from Oligospermia (severe and moderate) and Asthenospermia(severe and moderate) by using the swim - up technique and mixing technique (Earl’s media and Earl’s media + vitamin E) showed that there was a significant improvement (P<0.05) in the sperm motility percent, sperm grade activity, sperm motility index in comparison to its result befor activation. The result of sperm patients suffering from Oligospermia (severe and moderate) and Ashenospermia (severe and moderate) by using the swim - up technique (Earl’s media and Earl’s media + vitamin E) showed that there was a significant decrease (P<0.05) in sperm concentration and leukocyte concentration in comparison to that used before activation. However, the results were not significant in both mentioned parameter when mixing technique was used. The result of sperm activation of patients suffering from Oligospermia (severe and moderate) and Asthenospermia(severe and moderate) by using the swim - up technique (Earl’s media and Earl’s media + vitamin E) showed that there was a significant improvement (P<0.05) in the normal sperm morphology percent in comparison to its result befor activation. However, the sperm percent was not significant when mixing technique was used. Also, a significant improvement was noticed(P<0.05) in the sperm motility percent, sperm grade activity and sperm motility index by using ng both techniques swim - up and mixing when Earl’s media was mixed with vitamin E in comparison to the process of activation in both techniques when only Earl’s media was used. However, there was a significant improvement (P<0.05) in sperm concentration swim - up technique by using Earl’s media and vitamin E when compared to that in which only Earl’s media was used . It was concluded that using a human sperm activation after the treatment of infection and inflammations can give a better results than that when used before the treatment as the presence of leukocytes and phagocytes considered important in sperm parameters . Also, it was found that the addition of vitamin E to Earl’s media improve the sperm parameters and their activation in infertile patients suffering from Oligospermia (severe and moderate) and Asthenospermia (severe and moderate)

التاثيرات المرضية للذيفان الخلوي المستخلص من بكتريا Campylobacter jejuni المعزولة محليا == Pathological Effects of the Cytotoxin Extracted from a Locally Isolated Campylobacter jejuni

Author name: سيناء محمد علي السباهي
Supervisor name: ضحى سعد صالح
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Bacteria
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: This study was done to investigate the presence of Campylobacter jejuni in bloody diarrheal stool collected from hospitalized children with gastroenteritis. Campylobacter was isolated from only 4 specimens of a total number of 186; upon identification three isolates were identified as C. jejuni while the fourth isolate was found to be C. coli.Isolation of campylobacters was done using a locally prepared modified, blood - free, charcoal selective medium. It was the first time in which such medium was used for cultivating Campylobacter locally. The efficacy of this medium was very clear in comparison with the ordinarily used blood containing medium for inhibiting almost all fecal flora.Biochemical and physiological tests were used to identify and differentiate C. jejuni from the other Campylobacter species. The antibiotic sensitivity test showed that all isolates were sensitive to erythromycin, chloramphenicol, amikacin and ciprofloxacin, while resistance was found for cephalothin, ceftriaxone cefotaxime, ampicillin and trimethoprim.Tissue culture technique was used to determine C. jejuni of high cytotoxin productivity using continuous cell lines (HeLa and Vero cell lines); this isolate was used for further investigations in the study.In this study, the cytotoxin of the highest cytotoxin producing C. jejuni isolate was extracted locally for the first time and purified, using gel filtration chromatography with Sephadex G100.The purified cytotoxin revealed a single band which was observed by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) under the denaturing conditions. The molecular weight of the purified cytotoxin was approximately equal to 43 KDa as determined by PAGE.Using newly hatched chicks (as an animal model),the ID50 value was 3.71x10 4 cfu /ml. The ID50 decreased from 3.71x10 4 to 1.66 x 10 3 cfu/ml when 50 μg of cytotoxin was mixed with the bacterial suspension, this result reflects the role of cytotoxin on the pathogenesis of C. jejuni infection.In the present study, oral inoculation of newly hatched chicks with the C. jejuni isolate resulted in clinical and histopathological damages leading to bloody diarrhea similar to that observed in humans infected with C. jejuni.The post - mortal examination of chicks' viscera showed an accumulation of fluid in chick intestines which were distended with watery fluid; also there was obvious hepatomegaly with yellow spots, and swelling of the gall bladder. The associated infection with the C. jejuni cells and their cytotoxin induced more progressive tissue damage represented by a more severe intestinal distension and congestion.The histopathological examination of the small and large intestine of chicks infected with Campylobacter cells, showed mucosal sloughing, congestion of blood vessels, infiltration of inflammatory cells in the mucosal and submucosal layers, and accumulation of edematous fluid in the mucosal layer. The examination of chicks infected with Campylobacter cells and the cytotoxin revealed the presence of the same lesion, but more severely with the presence of hemorrhage in the lumen. These results could be important evidence of the role of cytotoxin as a virulence factor on the pathogenicity of C. jejuni

دراسة بعض الجوانب المناعية لبكتريا Listeria monocytogenes المعزولة محليا == Some Immunological study 0n Listeria monocytogenes isolated Locally

Author name: ميادة فرحان درويش
Supervisor name: ضحى سعد صالح
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Immunology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تضمنت الدراسة الحالية التحري عن بكتريا Listeria monocytogenes في (148) عينه سريريه تضمنت( 123) عينة من مسحات مهبل عليا (High Vaginal Swab)، و25 عينة مشيمه (Placenta) من النساء المجهضات، وتم الحصول على اربعة عزلات من مسحات المهبل العليا بنسبة ( 2.70) % في حين لم تعزل من عينات المشيمه ، وتم تشخيص العزلات كيموحيويا وزرعت على الاوساط الانتقالية والتفريقية واختبرت حساسيتها للمضادات الحيوية المختلفة. اذ ظهر ان العزلات حساسه جميعها لمضادات الامبسلين والجنتاميسين ومقاومه لمضادات حامض النالدكسيك واللنكومايسين ، ودرست قدرة العزلات البكتيرية على استحثاث الجهاز المناعي في الفئران المختبرية المحقونة باحد العزلات من خلال اجراء عدد من الاختبارات المناعية ومنها الفعالية البلعمية، وقابلية التحول اللمفاوي، وفرط الحساسية الاني والاجل، اظهرت النتائج ان العزلة التي اعطيت الرمز M4 - Lis هي الاكفا بين العزلات . حضرت اللقاحات من بكترياListeria monocytogenes العزله Lis - M4 بطريقة التضعيف (Live attenuated listeria) ولاول مرة محليا ، وكذلك حضرت بطريقة القتل بالحرارة ( listeria Heat killed) . تم حساب قيمة الجرعة القاتلة النصفية للفئران المحقونة بالعالق البكتيري العزله Lis - M4 والجرعه القاتله النصفيه اللقاح الحي المضعف واللقاح المقتول بالحراره المحضرين منها على النحوالاتـي (107×2.12 , 107×3.3 , 104×2.6) وحدة مكونه للمستعمرات / 1مليلتروعلى التوالي. وتم اختيار التركيز 107و 106 , 108 لغرض تقويم التركيزالاكفا في تعزيز الاستجابة المناعية .قيمت بعض جوانب الاستجابة المناعية في الفئران باستخدام الفحوصات الاتية فحص التحول اللمفاوي ، اختبار البلعمة ، واختبار فرط الحساسية الاني والاجل ، كما تم قياس الفعالية النوعية لانزيم الادينوسين دي امينيزAdenosin deaminase (ADA) وباستخدام تراكيز ثلاث CFU 108 , 107 , 106 في 1 مليلتر من اللقاحين والعالق البكتيري وبواقع ثلاث فئران لكل معاملة مع وجود مجموعة سيطرة حقنت بماء الملح الوظيفي . اظهرت النتائج ان اللقاح الحي المضعف هوالاكفاء وباستخدام جرعة منشطة واحدة بعد ثمان ايام من التلقيح حيث ظهر اعلى معدل لنسب الخلايا البلعمية الملتهمة واعلى نسب للخلايا اللمفاوية المتحولة واعلى معدل في تفاعل فرط الحساسية المتاخر والاني ، واعلى معدل للفعالية النوعية لانزيم ADA ، وان زيادة عدد جرع اللقاح المقتول بالحرارة ولحد الجرعة الثالثة يزيد من الاستجابة المناعية لهذا اللقاح . كذلك قيمت بعض جوانب الاستجابة المناعية في النساء المجهضات نتيجة الاصابة ببكتريا الليستريا والمجهضات لاسباب اخرى ، اظهرت النتائج وبوضوح ارتفاع معدل كلا من γINF - ( 10.97 vs 6.25) وIL - 12 ( 289.19 vs 159.54) وبفارق عالي المعنوية (p<0.00) عند المقارنة بين مجموعة السيطرة والمجهضات بسبب الاصابة بالليستريا وكذلك ارتفاع قيم IgG , IgM , IgA وارتفاع كلا من C3 , C4 نتيجة الاصابة ببكتريا Listeria monocytogenes ، اكدت النتائج قدرة الليستريا على تحفيز الجهاز المناعي بصورة جيدة من خلال تحفيزها للحركيات الخلوية ، اعطت هذه الحقيقة دعما لامكانية استخدام لقاح الليستريا في دراسات اخرى بوصفه علاجا مناعيا ضد العديد من الامراض . | The present study was achieved to investigate the Listeria monocytogenes in clinical samples such as high vaginal swabs and placenta from women with repeated abortion beside samples of blood . Listeria monocytogenes was isolated in percentage of (2.7%) from high vaginal swabs (123) samples but not isolated from placenta 25samples,and the isolates diagnosed dependent on the biochemical test and growth characteristic on selective and differential culter media. The susceptabibility of isolates to different antimicrobial agent was studied , It appeared that all isolates were totally sensitive to Gentamycine and Ampicillin but they were totally resistant to Lincomycine and Nalidaxic acid . The activity of isolates to stimulate immune response in mouse injected by one of these isolates througe number of immune testing which it : phagocytosis , lymphocyte transformation assay , immediate and delayed hypersensitivity reaction ,The result show the Lis - M4 is the best between them . The vaccine prepared from listeria monocytogenes in tow ways , live attenuated listeria is first prepared from bacterium listeria monocytogenes in our country ; also heat killed listeria was prepared . Calculated LD50 in injected mice by Lis - M4 listeria and mice injected by live attenuated vaccine and heat killed listeria vaccine ,So the result as following ( 2.6 ×104 ;3.3 ×107 ; 2.12 ×107 ) in 0.1 ml respectively , and chose the 106 ,107,108 to evalute the best concentration the in stimulate immune response. Immune response in mice evaluated by using the following assay : lymphocyte transformation assay , phagocytosis , immediate and delated hypersensitivity , also Adenosine deaminase specific activity was studied , by use three concentration 106 , 107 , 108 in 0.1ml from tow vaccines and bacterial suspention in 3 mice to each test in addition to control group injected by phosphate buffer saline . The results of this study confirmed that , live attenuated vaccine in boosting dose after 8 days from vaccination is the best efficient and gave highest mean in phagocytosis , lymphocyte transformation assay and significant increase in delayed hypersensitivity and arthus reaction , and highest mean in specific activity in adenosine deaminase enzyme , also show increase vaccine dose stimulate immune response for this vaccine. The immune response in abortion women which infected by Listeria monocytogenes compared with abortion women as aresult different causes , the result observed increase mean in INF - γ (10.97 vs 6.25) and IL - 12 (289.19 vs 159.54 ) by compared with control group , also highest mean in IgG , IgA , IgM , and C3 , C4 as a result Listeria infection . This result amphesis the ability of Listeria to premote immune response through out stimulate cytokines and demonstrate used this vaccine as immunotherapy in several disease

التعبير السايتوبلازمي للانزيمات المحللة للبروتين MMP - 2, - 9 ومثبطاتها في النسيج TIMP - 1, - 2 وتعبير مستقبل الموت Fas ورابطه النوعي Fas ligand في سرطان الخلايا الانتقالية للمثانة البولية == Cytoplasmic expression of matrixmetalloproteinases (MMPs) Vs Tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP - 1, - 2) and expression of death receptor (Fas) , and it's specific ligand (FasL)in Transitional cell Carcinoma of the urinary bladder

Author name: مي خليل اسماعيل
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: صممت هذه الدراسة باستخدام 36 نموذجا نسيجيا مطمورا بشمع البرافين ماخوذا من مرضى مصابين بسرطان الخلايا الانتقالية في المثانةTransitional cell carcinoma (TCC ) بالاضافة الى 10 نماذج نسيجية طبيعية ماخوذة من معهد الطب العدلي . النماذج جميعها خضعت لتقنية التصبيغ الكيميائي النسيجي المناعي Immunohistochemistry للتحري عن التعبير السايتوبلازمي لانزيمات MMP - 2 وMMP - 9 ومثبطاتها النسيجية TIMP - 1 وTIMP - 2 فضلا عن التحري عن التعبير الموضعي للحامض الرايبي الرسول mRNA لكل من مستقبل الموت Fas ورابطه النوعي FasL باستخدام تقنية التهجين الموضعي In situ hybridization .اظهرت نتائج هذه الدراسة ان نسبة اصابة الذكور الى الاناث بـTCC هي 1 : 3 وان معدل اعمار المصابين كان 60 سنة . واعتمادا على نتائج التصبيغ الكيميائي النسيجي المناعي اظهرت النتائج وجود زيادة معنوية في التعبير السايتوبلازمي عن MMP - 2(P<0.05) يقابلها انخفاض معنوي في التعبير عن TIMP - 2 في الانسجة السرطانية مقارنة بالانسجة الطبيعية (P<0.05) . وعندما صنفت النماذج السرطانية اعتمادا على التغيرات النسيجية المرضية وجد ان كلا من انزيمي MMP - 2 وMMP - 9 يملكان علاقة ايجابية بتطور درجات الورم Tumor grades اذ يزداد التعبير السايتوبلازمي عن هذين الانزيمين كلما ازدادت درجة الورم (p<0.05) ، (p<0.05) بالتتابع . الا انه لم تظهر اية فروقات معنوية في التعبير عن هذه الانزيمات ومثبطاتها بتطور مرحلة الورم Tumor stages (p>0.05) .اما نتائج التعبير الموضعي للحامض الرايبي الرسول لكل من مستقبل الموت Fas ورابطه النوعي FasL فقد اظهرت زيادة معنوية في التعبير عنهما في الانسجة السرطانية عندما قورنت بالانسجة الطبيعية (P<0.05) و(P<0.05) بالتتابع كما لوحظ ان تعبير الخلايا السرطانية الانتقالية عن FasL يتناسب طرديا مع تقدم كل من درجة الورم ومرحلته Tumor grade and stage فهناك فرق معنوي في التعبير عن FasL بين الدرجة الاولى والثالثة (P<0.05) وبين المرحلة T1 وT2(p<0.05 ) .اما تعبير هذه الخلايا عن المستقبل Fas فقد لوحظ انه يتناسب عكسيا مع تطور درجات الورم ومراحله فهناك فرق معنوي في تعبير هذه الخلايا عن Fas بين درجة واخرى (p<0.05) وبين مرحلة واخرى (p<0.05) . في الوقت الذي لم يظهر فيه تعبير الخلايا اللمفاوية عن Fas وFasL اختلافا مع تطور درجات الورم ومراحله(P>0.05) و(P>0.05) بالتتابع .وعندما قورنت المعلمات الثمانية احصائيا مع درجات تطور الورم ومراحله ظهرت علاقة طردية معنوية بين MMP - 2 ودرجة الورم (P<0.05) وبين MMP - 9 ودرجة الورم ومرحلته (P<0.01) و(p<0.05) على التوالي . كما لوحظت علاقة طردية عالية المعنوية في تعبير الخلايا السرطانية عن FasL مع تقدم درجة الورم ومرحلته (P<0.01) و(P<0.01) على التوالي .من هذه الدراسة نستنتج ان فرط التعبير عن كل من MMP - 2وMMP - 9 وFasL له علاقة بتقدم اورام TCC واجتياحها. | This study was designed by using 36 paraffin embedded tumor tissues obtained from TCC patients , and 10 normal bladder tissues obtained from forensic medicine institute . All specimens undergone to Immunohistochemistry technique to investigate the cytoplasmic expression of MMP - 2, MMP - 9 and their tissue inhibitors TIMP - 1 and TIMP - 2 ; in addition to the in situ mRNA expression of each death receptor (Fas) and its specific Ligand (FasL ) by using in situ hybridization technique. This study showed that male to female infection ratio was 3 : 1 and the mean age of patients was 60 years . Regarding immunohistochemical staining ; MMP - 2 cytoplasmic expression showed significant increase (P<0.05) with significant TIMP - 2 dicrease in tumor tissues compared with normal tissues (P<0.05).According to the histopathological criteria of malignant tissues ; MMP - 2 and MMP - 9 showed a positive relation with tumor grade progression ; so cytoplasmic expression of there enzymes was increased with tumor grade increase (p<0.05) , (p<0.05) respectively ; but there was no significant difference in there enzymes and their inhibitors expression with tumor stage progression (p>0.05).Rgarding in situ mRNA expression of Fas and Fas L ;results of this study reveled that a high significant expression in malignant tissues compaired with normal tissues (p< 0.05 ), (P > 0.05) respectively .Moreover ,FasL expression on transitional malignant cells has a linear increase with tumor grade and stage progression ; there was a significant difference in FasL expression between grade I and grade III(P < 0.05) and between stage T1 and T2 (P < 0.05) . while we found an inverse relation between Fas expression on these cells and tumor grades and stages progression ; there was a significant difference among grades and among stages (P < 0.05) , (P < 0.05) respectively. while there was no significant differences in Fas /FasL expression on lymphocytes and tumor grade and stage progression (P>0.05), (P>0.05) respectively. When we statistically compare the eight markers with tumor grades and stage ; we showed a significant linear relation between MMP - 2 and tumor grade (p<0.05) ; also between MMP - 9 and tumor grade and stage (p<0.01), (p<0.05) respectively. On the other hand , a highly significant liner relation was showed between Fas L expression on transitional malignant cells tumor grade and stage progression (p<0.01) , (p<0.01) respectively .From this study we conclude that overexpression of MMP - 2 , MMP - 9 and FasL are correlated with TCC invasion and progression

تنشيط النطف خارج الجسم باستخدام الاوكسيتوسين في مرضى العقم == In Vitro Sperm Activation by Oxytocin in the Infertile Patients

Author name: مكارم قاسم داود اللامي
Supervisor name: عدنان صالح الجنابي | فريال عبد المناف المهداوي
General topic: Biology
Specific topic: Zoology - Physiology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: اجريت الدراسة على ١٨۰ مريضا يعانون من وهن النطف اثناء مراجعتهم لمعهد ابحاث الاجنة وعلاج العقم / جامعة النهرين. كان الهدف الرئيس لهذه الدراسة هو استقصاء تاثير اضافة الاوكسيتوسين الى السائل المنوي للمرضى لغرض التحقق من تحسين خصائص الحركة العائدة الى النطف، وكان التركيز على هذا الهرمون بوصفه مادة طبيعية ينتجها الجسم وله وظائف معروفة غير التي هدفت اليها هذه الدراسة. اما الهدف الثانوي فهو دراسة علاقة الترابط بين قيم بعض المعايير الكيمياحياتية للمني ومستوى الهرمونات التكاثرية للمصل من جهة واختبارات وظيفة النطف من جهة اخرى.تم تحليل السائل المنوي للمرضى قبل تنشيط النطف، ومن ثم تم تقسيم المرضى الى ثلاث مجاميع رئيسة متساوية. جمعت عينات الدم من مرضى المجموعة الاخيرة لغرض تعيين مستوى الهرمونات التكاثرية الاربعة في المصل وهى : التيستوستيرون، البرولاكتين، الهرمون اللوتيني، والهرمون المحفز للجريب. كذلك تم قياس مستوى بعض المعايير الكيمياحياتية للسائل المنوي لمرضى هذه المجموعة والتي تضمنت : البروتين الكلي، الكوليستيرول، الكالسيوم، انزيم الكرياتين كاينيز، والفركتوز.استخدمت طريقتان لتنشيط النطف خارج الجسم in vitro وهما : الطريقة المباشرة (باستخدام مزيج الاوكسيتوسين ووسط تحضير النطف) والطريقة غير المباشرة (باستخدام التقنية الطباقية البسيطة) وبتطبيق ثلاثة تراكيز من الاوكسيتوسين وهي : ۲،٤، و٦ وحدة دولية/مل لاختيار التركيز الاكثر تاثيرا على اختبارات وظيفة النطف. اظهرت نتائج الطريقة غير المباشرة حدوث تحسن معنوي ملحوظ (P<0.001) في النسبة المئوية للنطف المتحركة ودرجة نشاط النطف عند التركيز۲ وحدة دولية/مل مقارنة مع عينات السيطرة. وقد كان هناك ميلا الى تناقص درجة نشاط النطف مع زيادة تركيز الاوكسيتوسين. اما نتائج الطريقة المباشرة فقد اظهرت حدوث زيادة معنوية (P<0.05) في درجة نشاط النطف وقد كان هناك ايضا ميلا الى تناقص معيار الحركة هذا مع زيادة تركيز الاوكسيتوسين. بناء على هذه النتائج، تم استعمال التركيز۲ وحدة دولية/مل للاوكسيتوسين مع تطبيق الطريقتين المباشرة وغير المباشرة وذلك في حالتين هما وجود وسط تحضير النطف وعدم وجوده. اظهرت حصيلة الطريقة غير المباشرة لتنشيط النطف وعند وجود وسط تحضير النطف زيادة معنوية ملحوظة (P<0.001) في خصائص الحركة (النسبة المئوية للنطف المتحركة ودرجة نشاط النطف) في كلا المجموعتين (المعاملة بالاوكسيتوسين ومجموعة السيطرة) مقارنة مع قيم ما قبل التنشيط. اما مقارنة المجموعتين معا فقد اظهرت بان افضل تحسن معنوي ملحوظ ((P<0.001 في خصائص الحركة كان في المجموعة المعاملة. عند غياب وسط تحضير النطف كان هنالك تحسنا معنويا (P<0.05) في خصائص الحركة في المجموعة المعاملة فقط مقارنة مع قيم ما قبل التنشيط . عند تطبيق الطريقة المباشرة كانت النتائج مماثلة لما حدث عند تطبيق الطريقة غير المباشرة في حالة وجود وسط تحضير النطف. اما عند غياب وسط تحضير النطف لم يحدث اي تغيير معنوي (P>0.05) في تلك المعايير بعد فترة الحضانة. واظهرت النتائج ايضا بان هناك استجابات محفزة بالاوكسيتوسين (رغم انها غير معنوية) في تلك المعايير مقارنة مع مجموعة السيطرة. تشير جميع هذه النتائج الى التاثير المحفز للاوكسيتوسين عند التركيز۲ وحدة دولية/مل على خصائص حركة النطف، كذلك فان استعمال وسط تحضير النطف ادى الى دعم ذلك التاثير.تم تقييم علاقة الترابط بين المعايير الكيمياحياتية لبلازما المني ومعايير المني، وقد اشارت النتائج الى وجود ترابط موجب وبشكل معنوي (r = +0.29, P<0.05) بين مستوى الكوليستيرول وتركيز النطف، وبين مستوى الكالسيوم وكل من النسبة المئوية للنطف المتحركة (r = +0.27, P<0.05) ودرجة نشاط النطف(r = +0.37, P<0.05) . بينما كان هناك ترابط سالب وبشكل معنوي بين مستوى الفركتوز من جهة وكل من تركيز النطف - 0.41, P<0.001) (r =، النسبة المئوية للنطف المتحركة (r = - 0.28, P<0.05) ، ودرجة نشاط النطف (r = - 0.32, P<0.05) من جهة اخرى.عند مقارنة مستوى هذه المعايير الكيمياحياتية بين المجموعة المعاملة بالاوكسيتوسين ومجموعة السيطرة، كان واضحا بان الاوكسيتوسين ربما يكون سببا في فقدان الكوليستيرول من الغشاء البلازمي للنطف وبالتالي زيادة مستواه وبشكل معنوي ملحوظ ((P<0.001 في الوسط الخارجي. كذلك فان الاوكسيتوسين ربما ادى الى تحوير نقل الكالسيوم عبر الغشاء البلازمي وبالنتيجة زيادة تركيز الكالسيوم داخل الخلية وانخفاض مستواه وبشكل معنوي ملحوظ ((P<0.001 في الوسط الخارجي. بالاضافة الى الانخفاض المعنوي الملحوظ ((P<0.001 في مستوى الفركتوز في الوسط الخارجي والذي يشير الى استخدامه المتزايد من قبل النطف بسبب تنشيط الحركة.اظهرت نتائج فحوصات الهرمونات التكاثرية ارتفاعا معنويا ملحوظا ((P<0.001 في مستوىالبرولاكتين وانخفاضا معنويا (P<0.05)في مستوى الهرمون اللوتيني في الحالات المدروسة عند المقارنة مع القيم الطبيعية. وجدت علاقة ترابط سالبة وبشكل معنوي (r = - 0.29, P<0.05) بين مستوى برولاكتين المصل وتركيز النطف، وقد وجدت علاقة مشابهة ايضا (r = - 0.28, P<0.05) بين مستوى الهرمون المحفز للجريب في المصل وتركيز النطف.

تقييم لقاح الحصبة لدى الاطفال والبالغين باستخدام طرق مصلية مختلفة == Evaluation of Measles Vaccine in Children and Adults Using Various Serological Methods

Author name: كريم مؤمن ليلو الساعدي
Supervisor name: ضحى سعد صالح | فيصل غازي الحمداني
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Viruses
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: بالرغم من نسبه التغطيه (العاليه ) من التلقيح في العراق الا ان وباء الحصبه مستمر في الحدوث وازدياد نسبة المعرضين للاصابه بمرورالزمن الى مستوى ينتشر فيه المرض بسهوله. ان السيطره على هذا مرض في بلدنا عمليه صعبه لسهولة انتقال الفيروس بين الملامسين بالاضافه الى عدم تطور البنيه التحتيه لانجاز عملية التلقيح ومراقبة الاصابات للحد من انتشار المرض . شمل البحث دراسة الاستجابه المناعيه ضد فايروس الحصبه لنمادج من المصل لاشخاص عراقيين من بغداد ولاطفال من زامبيا مدينة لوساكا .فيما يخص نماذج العراقيين تم اخذ 165 نموذج دم لاطفال وبالغين بواقع 95 ملقحين و70 مصابين من بينهم 34 مصاب بالحصبه على الرغم من التلقيح ضد المرض باعمار تتراوح بين ( 8 شهر - 30 سنه) وللمده ( من شباط / 2007 الى حزيران / 2007 ) , قسمت النماذج الى ستة مجاميع اعتمادا على المدى العمري . شخصت الاصابات التي وقعت عام 2007 سريريا في المراكز الصحيه ومن ثم تاكيدها مختبريا في مختبر الصحه العامه المركزي في بغداد , تم تقييم الاستجابه المناعيه المتخصصه ضد فايروس الحصبه باستخدام ثلاثة طرق مصليه مختلفه وهي : التعادل المصلي الدقيق وقياس الكلوبيولين المناعي صنف G وطريقة تثبيط التلازن الدموي اجريت هذه التجارب في مختبر تقييم اللقاحات الفايروسيه والزراعه النسيجبه في المركز الوطني للرقابه والبحوث الدوائيه . اظهرت نتائج طريقة التعادل المصلي ان جميع المشاركين بالدراسه يمتلكون الاجسام المضاده ( وهم الذين يمتلكون عياريه مساويه او اعلى من ( 128 ) المتخصصه ضد فيروس الحصبه ولكن بمستويات مختلفه , حيث كان مستوى الحمايه المصليه بنسبة 79% للملقحين و94,2% للمصابين وهذا يؤكد على بقاء الاجسام المضادة هذه لفتره طويله بعد حصول الاصابه والتلقيح . وكان معدل الانتشار المصلي لمختلف اعمار الملقحين : 923± 258 , 714± 336 , 705 ± 384 , 268 ± 289 , 278 ± 214 للاعمار (6 - 10 ),(11 - 15) , (16 - 20) ,(21 - 25) , (26 - 30) سنه بالتعاقب , اذ تبين عدم وجود مؤشر احصائي معنوي (P>0.05)عند المقارنه بين الملقحين بالعمر(6 - 10 ) سنه مع المصابين حديثا باعمار اقل من 6 سنوات, اما الملقحين بعمر (11 - 15) سنه قد اظهر وجود مؤشر احصائي مختلف (P<0.01) عند المقارنه بين الملقحين بالعمر(6 - 10 ) سنه , اما الفئات العمريه (16 - 20) , (26 - 30) سنه من الملقحين فقد اظهرت مؤشرات احصائيه مختلفه (P<0.01)بالمقارنه مع نفس الفئات العمريه من المصابين ولم تظهر الفئه العمريه (21 - 25) سنه من الملقحين مؤشر احصائي مختلف مع المقارنه لنفس الفئه من المصابين . اظهرت النتائج نسبه 97 - 100% للحمايه المصليه لفئة الملقحين في المدى العمري (6 - 10) سنه بعد ذلك تبدا بالانخفاض بتقدم العمر , وكانت نسبة الحمايه المصليه 95 - 100% للمصابين بالمرض من مختلف الفئات العمريه المشاركه في الدراسه . اجريت دراسه ايضا بقياس الحمايه المصليه بالاعتماد على عدد جرع اللقاح المعطاة باستخدام طريقة التعادل المصلي وكانت النتائج (1 : 838 ± 403) , ( (1 : 938± 244) للاشخاص الذين اعطوا 5 و6 جرع على التوالي واظهرت اختلاف احصائي(P<0.01) عن الذين اعطو (1 - 2)جرعه من لقاح الحصبه .تمت دراسة فترة بقاء الاجسام المضادة المتخصصة ضد فايروس الحصبه للملقحين والمصابين اذ وجدت بنسبة عاليه قبل مرور فترة 3 سنوات من اعطاء اخر جرعه من اللقاح حيث اظهرت مؤشر احصائي مختلف من الذين امضوا اكثر من 3 سنوات باستلامهم اخر جرعه , بينما لا توجد مؤشرات احصائيه مختلفه من اعطاء اخر جرعه لفترة (3 - 10)سنه واكثر من 10 سنوات , وهذا يعطي دليل بانخفاض مستوى الاجسام المضاده مع مرور الوقت سواء بعد التلقيح او الاصابه الطبيعيه . اظهرت نتائج قياس IgG بطريقة ELISA ان الحمايه المصليه تمثل 89% ضد الاصابه بفايروس الحصبه وتمثل نسبة 7.7% حمايه مصليه غير ثابته ونسبة 3.3% دون حمايه مصليه .وكانت اعلى نسبه من الحمايه المصليو 94,7% في الاعمار الصغيره (6 - 10) سنه من المشاركين في البحث واقل نسبه من الحمايه المصلية 75% للاعمار الكبيره (25 - 30) سنه . وبصوره عامه فان معدل عيارية الاجسام المضاده المتخصصه ضد فايروس الحصبه صنف IgG هي 2080 ±1837 لجميع الملقحين قيد الدراسة وبدون اختلاف احصائي معنوي بالمقارنه مع المصابين والتي كانت 1949 ±1838 , وان التلقيح بالجرعات التعزيزيه الاضافيه للفئات العمريه المناسبة تلعب دور كبير في تمنيع المجتمع للحد من حدوث الاوبئه وانتشارها . اما باستخدام طريقة تثبيط التلازن الدموي وجد 60 مشاركا من اعمار مختلفه يمتلك اجسام مضاده متخصصه مثبطه للتلازن الدموي , وعند الاخذ بنظر الاعتبارعيارية 1/8 كمؤشر للتعرض للاصابه وجد الانتشار المصلي المثبط للتلازن الدموي 53,6 % , 73,6% للملقحين والمصابين بالتتابع , كما وجد انخفاض واضح لمستوى هذه الاجسام المضاده بتقدم العمر , وكما كانت النتائج التي حصل عليها هذا البحث باستخدام تقنية التعادل والاليزا يمكن الاستنتاج ايضا ان مقدارتركيز الانتشار المصلي المثبط للتلازن الدموي ذو علاقه مباشره وطرديه مع نسبة الحمايه المصليه ضد النوع البري للاعمار ما بين (6 - 15) سنه , وكانت نتائج معظم افراد الفئه العمريه (16 - 30) سنه ذو نسبه واطئه من الحمايه المصليه وهذه النتائج ربما تعود ان المشاركين في الدراسه للفئه العمريه الكبيره كانت ولادتهم قبل الشروع ببرنامج التلقيح الموسع اوكونهم عاشو خلال فترة كانت فيها نسبه واطئه من التغطيه في التلقيح مما يؤدي الى انخفاض ونقص في الانتشار المصلي . اما نتائج دراسة المقارنه باستخدام الطرق المناعيه الثلاث في قياس الاستجابه المناعيه ضد الحصبه وجد هناك علاقه جبده ومباشره بين طريقتي التعادل وتثبيط التلازن الدموي ( r =0.87 , P<0.01 كما بينت النتائج ان طريقة تثبيط التلازن الدموي اقل حساسيه من طريقة التعادل , اما المقارنه مع طريقة قياس الكلوبيولين المناعي صنف الكلوبيولين المناعي IgGتعتبرمقياس دقيق وذات علاقه جيده ومباشره مع طريقة التعادل (r = 93 , P< 0.05) واخيرا يمكن الاستنتاج ان طرق التعادل هي الطريقه المثلى في قياس الاجسام المضاده ضد فايروس الحصبه وتعتبر الطريقه المناسبه لقياس مستوى الحمايه ضد المرض . اما بخصوص نماذخ المصول العائده للاطفال من زامبيا , شملت الدراسه (50) نموذجا , يعضها كان قبل التلقيح والبعض الاخر بعد (1 - 3 اشهر ) من تلقيح الاطفال بلقاح الحصبه المنفرد بعمر 9 اشهر , تم قياس الاجسام المضادة المتخصصه ضد فايروس الحصبه بتقنية التعادل المصلي في الاكار وباستخدام النوع البري لفايروس الحصبه المعزول من حالات مصابه بالحصبه واجري الاختبار باصابة خلايا كلية القرد الاخضر الحامله للمستلم CD150 واجري الاختبار بالتزامن مع المصل القياسي العالمي لغرض المقارنه ولغرض تحويل العياريه للنتائج الى الوحدات العالميه , تم اجراء الاختبارات في مختبر الاستاذه كرفن في جامعة جون هوبكنز الامريكيه.اما نتائج هذه الاخيبارات فقد كان قياس الاجسام المضاده للاطفال الزامبيين بعمر 9 اشهر قبل اخذ اللقاح 0.079 وحده عالميه وبنفس الوقت هي تمثل ما تبقى من الاجسام المضاده المكتسبه وهي اقل من مسوى الحمايه ضد المرض التي هي 0.120 وحده عالميه عند استخدام تقنية التعادل المصلي في الاكار , اما بعد الفتراة الزمنيه شهر واحد وثلاثة اشهر من التطعيم كان قياس الاجسام المضاده 0.606 , 0.493 وحده عالميه وبمؤشر احصائي P< 0.05 ,P<0.01 , على التوالي بالمقارنه بنتائج قبل التطعيم وهو اعلى من مستوى الحمايه ضد المرض , بينما كان قياس الاجسام المضاده بعد الاصابه الطبيعيه للاطفال بعمر 76 شهر 3.303 وبمؤشر احصائي P<0.005 وحده عالميه وهذه النتيجه تؤكد النتائج السابقه بان الاستجابه المناعيه بعد الاصابه الطبيعيه اعلى من نسبتها بعد التطعيم .وهذه النتائج تتفق مع نتائج الاستجابه المناعيه للاطفال العراقيين دون سن 6 سنواة فيما يخص مستوى الحمايه ضد المرض . | In this study, the potency of the live measles vaccine ( Rouvax / Sanofi pasture production) has been determined by an in vitro microtitration assay ,the results were considered comply and meet with the WHO requirement .The estimation of the prevalence measles antibody among serum samples from Iraqi and Zambian population after measles vaccination and natural infection. Regarding the Iraqi blood samples were collected from Iraqi children and adults with documentation of vaccinated or exposure to natural infection with an average age of (8 months - 30 years) .Samples were divided into six groups based on the age of participants .The individuals were infected during 2007 outbreak identified in the health center of their area and confirmed serologically in Center Public Health Laboratory (CPHL) in Baghdad; Serological assays were performed at the National Center for Drug control and Research ( NCDCR) to detect measles antibody . All 156 participants had detectable neutralizing antibodies, while the prevalence of protective level of neutralizing antibody titer (≥ 1 : 128), was found in 79% of vaccinated group and 94.2 % for participants with a history of measles cases suggesting that the rate of antibody persist longer when expressed exposure to circulating wild virus. When groups distribution of the Geometric Mean Titer (GMT) values was determined according to the age groups, revealed that the measles neutralizing antibody titers after vaccination were 923± 44.2 , 714 ± 68.7 , 705 ± 99.2 , 268 ± 91.4 and 278 ± 87.7 for groups 6 - 10 ,11 - 15 ,16 - 20, 21 - 25 and 26 - 30 years respectively . There was no significant statistical difference (p>0.05) for age group 6 - 10 when comparing with infected children (<6 years), 11 - 15 years group showed statistical significancet when compared with infected children (>6 years) ( P < 0.01) , 16 - 20 and 26 - 30 of vaccinated groups also showed to be statistically significant when comparing with similar age of infected individuals (P< 0.01 ) ; But there is no statistical significance for age groups 21 - 25 years when comparing with similar age of infected individuals ,(p> 0.05) The percentage of neutralizing protective level was 97 - 100% for (>6 - 10) years of vaccinated group and then decreased with increasing ages, while persistent (95 - 100%) for the different age groups infected with measles. Neutralizing antibody titers after five and six vaccine doses was a (1 : 838 (SEM) 100) and (1 : 938 (SEM) 93) respectively this is showing statistically significance when compared with individuals previously had received one and two doses (p < 0.001 and p < 0.01) respectively . In the study of persistence of neutralizing antibody after vaccination and natural infection the prevalence of measles antibody was very high before 3 years of the last dose and show significant differences when compared with group of individuals who had received the last dose after more than 3 years ( P<0.05) and there was no significant statistical differences between groups with the period 3 - 10 and >10 years after the last dose. therfore, no evidence was found of neutralizing antibody against measles which decreased to nonprotective levels from neutralizing result after both vaccination and natural infection. In the second assay, sera were tested for measles specific IgG by ELISA result showed that 89% of all individuals who participated in the research were seropositive against measles, 7.7% equivocal and 3.3% had shown seronegative. The highest seroposivity was ( 94.7% ) among individuals with the lowest age group (6 - 10 years), and the lowest seroposivity (75 %) was among the oldest age group (26 - 30 years). In general all individuals participated in this study have shown IgG level 2080± 197.5 mIU/ml of the vaccinated groups. when compared with participants previously exposed to measles natural infection that was found (1949 ± 262.5mIU/ml) with no statistically significant . When individuals grouped according to the increased age , a marked decline in IgG levels were observed, resulting in different levels of protection against measles and suggested that supplementary vaccination might play a role in vaccinating population before measles outbreaks . In the third assay the prevalence of measles antibody by hemagglutination inhibition has been found that 60 participants of different age groups have detectable hemagglutination inhibition antibody titer using the titer(<1 : 8) as indicator of susceptibility .It was found that 53.6% and 73.6% of hemagglutination inhibition seroprevalence among vaccinated and those with previous to natural infection respectively . Hence again a marked decline in hemagglutination inhibition antibody titers was observed with the increasing age of participants in this study. Regarding neutralizing and IgG - ELISA antibody, the results of hemagglutination inhibition suggest that the seroconvesion after vaccination correlated with the protective levels against wild type among age group (6 - 15) years and most of the participants with (16 - 30) years age group have a low percentage of hemagglutination inhibition antibody titers, and these results may be due to the fact that individuals were born before the implementation of routine immunization against measles in 1985 and lived in the time of low vaccination coverage resulting in waning of antibody or lack of initial seroconversion. In comparison of different methods that have been used in this study to evaluate specific measles immune response, it was found that a good correlation between hemagglutination inhibition and neutralization test ( r=0.87 , P<0.01).With measles virus , hemagglutination inhibition was considered less sensitive than neutralization test . Also was found a good correlation between IgG - ELISA and neutralization assays ( r=0.93 , P<0.05). It has been concluded that the neutralization assay is considered the gold standard in measuring antibodies properly and most important in clinical protection. About the Zambian children were used in order to know the level of immunity required for measles elimination after administration with different measles virus vaccine strain .Fivity serum samples were available from Zambia children in prevaccination , 1 - 3 months after vaccination at 9 months of age ,and infected children with ages (76 ± 65 months ) . A modified plaque reduction neutralization assay was conducted to measure measles antibodies ,using wild type of Measles virus strain to infect veroSLAM cells , Plasma samples were tested in parallel with the International World Health Organization (WHO) Serum Standard and results were transformed into mIU/ml .The tests were conducted in Prof. Griffin lab. of the molecular microbiology and immunology department in John Hopkins School of public health. In the present study,Zambia infants vaccinated at 9 months of age have had passive antibody (79 mIU/ml) lower than the protective level (≥ 120 mIU/ml) and the presence of passive antibody at the time of vaccination continued to have high titers of antibody after one month ( 493 mIU/ml ) (P> 0.01) and three months (606 mIU/ml ) ( P<0.05) of measles vaccination above the protective level against measles infection ,while the antibody levels have reached to (3303 mIU/ml) ( P > 0.005) in children with natural infection, these results showed in agreement with the results of Iraqi children under 6 years of ages regarding the level of protection against the disease .

عزل وتشخيص البكتريا العصوية (Bacillus) المنتجة لانزيمات التحلل المائي (الحلمهه) (Hydrolases) المتحملة للحرارة == Isolation and identification of Bacillus producing thermotolerant hydrolases

Author name: عدنان حنون عباس
Supervisor name: رشيد محجوب مصلح
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Bacteria
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تم الحصول على 97 عزلة من البكتريا العصوية ( Bacillus ) من جمع 200 عينة تربة ومياه في الفترة مابين تموز/تشرين اول 2008 من مواقع مختلفة من العراق بعد التشخيص الاولي ( صبغة كرام, تكوين السبورات, انتاج الكاتاليز ) وتلقيح العينات على وسط ال Thermus agar وتنميتها على درجة 50°C لفترة 24 ساعة. اظهــــرت نتائج الاخــــــتبارات الكيمــوحيــــويـــــة ان 56 عزلة تربـــــــة صنفت على انها B. laterosporus 35.71% , B. circulans 16.07% , B. stearoyhermophilus 14.28%, B. polymyxa 12.5% , B. macroides 7.14%, B. mycoides 7.14% , B. lentus 3.57% , B. popilliae 1.78% , B. chitinosporus 1.78 , بينـــما صنفت 41 عـــــــــزلة مياه عــــلى انها B. laterosporus 26.82% , B. circulans 26.82% , B. stearothermophilus 4.87% , B. polymyxa 4.87% , B. macroides 9.75% , B. mycoides 2.43% , B. lentus 7.31% , B. popilliae 4.87% , B. filicolonicus 4.87% , B. brevis 2.43% , B. larvae 2.43% , B. pumilus 2.43% . اظهرت عزلات ال ( Bacillus ) المعزولة من التربة والمياه ايجابيتها في انتاج الانزيمات المتحملة للحرارة بعد اختبارها على وسـط الاكار الصـلب, كالبروتييــز ( 73.17% ) ( 89.28% ) , الاميـــــــــليز ( 51.21% ) ( 55.35% ) , اللايبيــــــــــــز ( 95.12% ) ( 91.07% ) , السيليليز( 60.97% ) ( 85.71% ) , والكايتينيز( 92.68% ) ( 85.71% ) , على التوالي, في فترات حضانـــة مختلفة ودرجة حرارة 50°C . من جهة اخرى, قيست قابلية عزلات ال ( Bacillus ) والبالغة نسبتها ( 41.23% ) على انتاج انزيمات التحلل المائي كالبروتييـــز والاميليــز واللايبيـــز والسيليليـــز والكايتينيــز, باجمعها, حيث اظهرت النتائج بان سلالات ال B. polymyxa كانت الافضل في انتاج البروتييز والاميليــز والسيليليــز, بينما سلالات ال B. lentus كانت الافضل في انتاج الكايتينيـــز, اما اللايبيـــزفقد تم انتاجــــــــه من قبل سلالات ال B. circulans , B. stearothermophilus , B. polymyxa , B. mycoides وB. lentus , على اوساط زرعية وفترات حضانة مختلفة ودرجة حرارة 50°C. هذا وقد حددت الظروف المثلى لانتاج الاميليز من العزلة B. polymyxa AS 4/5 واظهرت النتائج ان الوسط الامثل للانتاج والمحضر مختبريا متكون من 2% نشا, 1% تربتون, 0.05% كبريتات المغنيسيوم, 0.05% كلوريد الصوديوم و0.02% كلوريد الكالسيوم , برقم هيدروجيني 7, وبدرجة حرارة 50°C لفترة 48 ساعة. تم استخلاص الاميليــز من الوسط الزرعي وتركيزه بواسطة السكروز, وقد اظهرت النتائج الحصول على الاميليز بفاعلية نوعية 2.36U/mg protein, في المــرحلة الاولى تمت تنقية الاميليز بطريقة كروماتوغرافيا الوجبة Batch Chromatography واعقبت هذه المرحلة استخدام عمود التبادل الايوني Ion exchange chromatography باستخدام المبادل DEAE - Cellulose column . وقد اظهرت النتائج الحصـــول على الاميلــــيز بفاعلية نوعية 6.76U/mg protein وبعدد مرات تنقية بلغ 2.86 وبحصيلة نهائية 18.65% . تمت ايضا دراسة توصيف الانزيم, واظهرت النتائج بان الفعالية الانزيمية تزداد بزيادة درجة الحرارة الى 90°C بينما اظهر الاميليزثباتييتـــه في درجات الحرارة 40°C, 50°C, 60°C , في حضانة لمدة 30 دقيقـــة, اما الفاعلية المثلى للانزيم بالرقم الهيدروجيني pH 5, اما ثباتية الانزيم فتكون في الارقام الهيدروجينية مابينpH 4 - 10 في درجة 50°C لفترة 30 دقيقة, وبفاعلية متبقيــة قصوى 78.57% في .pH 5 اما النتائج المتعلقة بتاثير الايونات الفلزية على الانزيم, تبين ان لكلوريد الزئبق تاثير عالي على الانزيم بفاعلية متبقية 46.47% و40.84% بتركيز 5mM و10mM , على التوالي, اما كلوريد المنغنيز له تاثير قليل على الانزيم بفاعلية متبقية 79.81% و81.69% بتركيز 5mM و10mM, على التوالي, في درجة 50°C لفترة 30 دقيقة. تعمل المواد الكلابية مثل EDTA والمواد المختزلة mercaptoethanol على تثبيط الفاعلية الانزيمية, حيث تؤثر المواد الكلابية ( EDTA ) على الانزيم بفاعلية متبقية 57.74% و52.58% بتركيز 2mM و5mM, على التوالي, اما المــــواد المختزلـــــــــة ( mercaptoethanol ) يكون تاثيرها بفاعلية متبقية 51.17% و40.37% بتركيز 2mM و5mM, على التوالي, في درجة 50°C لفترة 30 دقيقـــــــــة. | Ninety - seven isolates of Bacillus were obtained from 200 soil and water samples, collected between July to October / 2008, from different local sites of Iraq, by primary identification ( gram stain, endospore - forming and catalase production ) after incubation at 50°C for 24h on thermus agar. Biochemical test showed that fifty - six soil isolates were classified as B. laterosporus 35.71%, B.circulans 16.07%, B.stearothermophilus 14.28%, B.polymyxa 12.5%, B.macroides 7.14%, B.mycoides 7.14%, B.lentus 3.57%, B. popilliae 1.78% and B.chitinosporus 1.78%, whereas forty - one water isolates were classified as B.laterosporus 26.82%, B.circulans 26.82%, B.stearothermophilus 4.87%, B.polymyxa 4.87%, B.macroides 9.75%, B.mycoides 2.43%, B.lentus 7.31%, B. popilliae 4.87%, B.filicolonicus 4.87%, B.larvae 2.43%, B.brevis 2.43% and B. pumilus 2.43%. Thermotolerant enzymes were produced from soil and water Bacillus species as, protease ( 89.28% ) ( 73.17% ), amylase ( 55.35% ) ( 51.21% ), lipase ( 91.07% ) ( 95.12% ), cellulase ( 85.71% ) ( 60.97% ) and chitinase ( 85.71% ) ( 92.68% ) , respectively, after culturing on solid agar media with different incubation period, at 50°C. So, 41.23% of soil and water Bacillus isolates were detected for hydrolases production as ( protease, amylase, lipase, cellulase and chitinase ) together, and showed that B. polymyxa strains were the best bacteria in protease, amylase and cellulase production, whereas B. lentus strains was a good chitinase producer. Lipase was produced by several Bacillus strains as B. circulans, B. stearothermophilus, B. polymyxa, B. mycoides and B. lentus, after culturing on different media and incubation period, at 50°C. Thermotolerant amylase production conditions by B. polymyxa AS 4/5 were studied, the highest amylase production was observed when the bacteriaSummary IIwas cultured in medium containing 2% starch, 1% tryptone, 0.05% MgSO4, 0.05% NaCl and 0.02% CaCl2 with pH 7 and incubated at 50°C for 48h. Amylase was extracted from production medium and concentrated with sucrose, the specific activity of amylase was 2.36U/mg protein. Purification of amylase was performed by ion exchange chromatography Cellux - Carboxymethyl ( batch chromatography ), followed by second step of purification by ion exchange chromatography on DEAE - Cellulose column, the results showed that the specific activity was 6.76U/mg protein with 2.86 purification folds and 18.65% yield. Thermotolerant amylase displayed a wide temperature range of activity at 40 - 90°C with highest activity at 90°C and enzyme was stable at 40 - 60°C for 30min. The optimum pH for amylase activity was pH 5, the enzyme was stable at pH 4 - 10 for 30min at 50°C with maximum remaining activity 78.57% at pH 5. Treatment of thermotolerant amylase with metal ions showed that HgCl2 reduced amylase activity, the remaining activity was 46.47% and 40.84% at concentration 5mM and 10mM of HgCl2, respectively. Whereas MnCl2 had lower effect on amylase activity, the remaining activity was 79.81% and 81.69% at concentration 5mM and 10mM of MnCl2, respectively, after 30min at 50°C. Bacillus polymyxa amylase was treated with 2mM and 5mM of EDTA and mercaptoethanol, the two compounds had inhibitory effect on the enzyme, the remaining activity of EDTA treated enzyme was 57.74% and 52.58% at 2mM and 5mM, respectively, while the remaining activity of enzyme treated with 2mM and 5mM mercaptoethanol was 51.17% and 40.37%, respectively, after 30min at 50°C.

دراسات وراثية خلوية ومناعية لمرضى التهاب القولون التقرحي == Cytogenetical and Immunological Studies of Ulcerative Colitis

Author name: زينب محمد طاهر جعفر الملا حسن
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Immunology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تضمنت الدراسة الحصول على عينات الدم المحيطي والخزع النسيجية الماخوذة من المرضى المصابين بالتهاب القولون التقرحي المزمن والمرضى المصابين بسرطان القولون، ومن الجنسين كليهما، ومن مختلف الاعمار. تم سحب حوالي 10 مل من دم المرضى وقسمت العينة على ثلاثة اقسام، القسم الاول استعمل لاجراء الدراسات الوراثية الخلوية. والقسم الثاني لاجراء دراسات البيولوجيا الجزيئية. والقسم الثالث لاجراء الدراسات المناعية. اجريت الدراسات الوراثية الخلوية من اجل التعرف على التغييرات التي قد تطرا على المقاييس الوراثية الخلوية المتمثلة بقياس معامل الارومةBlastogenic index ، ومعامل الانقسام Mitotic index، ومعامل التضاعفReplicative index ، واختبار التبادل الكروماتيدي الشقيقي Sister chromatid exchange، واختبار تردد الطفرة Mutation Frequency. وقد تم ذلك من زرع خلايا الدم المحيطي في الوسط الزرعي الحاوي على المادة المعلمة (Brdu - 5) والمادة المشطرةA) PH). اوضحت النتائج وجود انخفاض في المقاييس الوراثية الخلوية المتمثلة بمعامل الارومة، ومعامل الانقسام، ومعامل التضاعف. بينما لوحظ ارتفاع في المعدلات التلقائية في التبادل الكروماتيدي الشقيقي لمرضى التهاب القولون التقرحي وسرطان القولون قياسا بالاصحاء. كما ولوحظ هذا الارتفاع في معدلات التبادل الكروماتيدي الشقيقي عند المعاملة بالعقار الميثوتركسيت، اذ لوحظ وجود خلايا نامية في تراكيز واطئة من عقار الميثوتركسيت.اما عن ا لجانب البايولوجي الجزيئي فقد تم قياس تراكيز الحوامض النووية المتمثلة بما يلي : الحامض النووي الرايبوزي (RNA) والحامض النووي المزدوج الشريط ) (dsDNAوالحامض النووي الاحادي الشريط (ssDNA) وذلك بتنميتها في الوسط الزرعي في اوقات حضانة مختلفة (الزمن صفر، ثم بعد24 ساعة ، ثم بعد48 ساعة ، ثم بعد 72 ساعة من الحضانة ). اوضحت النتائج وجود اضطراب في نمو الخلايا الماخوذة من مرضى التهاب القولون التقرحي عند القياس بالاصحاء . كذلك تم قياس تراكيز الحوامض النووية المذكورة اعلاه في الخلايا المنماة في تراكيز عالية من عقار الميثوتركسيت والمتمثلة بتركيز 1 مايكروغم / مليلتر و2 مايكروغم / مليلتر لكل من المرضى والاصحاء بعد تنميتها لمدة حضانة 72 ساعة. اذ لوحظ عدم وجود فروقات معنوية لهذين التركيزين بين الاصحاء والمرضى. اما فيما يتعلق بنتائج التهجين في الموقع in situ hybridiza¬tion لغرض الكشف عن التعبير الجيني للجين الكابح للورم P53 والجين المثبط للموت المبرمج Bcl - 2 ، اذ تم اخذ الخزع النسيجية من المرضى المصابين بالتهاب القولون التقرحي المزمن وسرطان القولون وقياسها بالاصحاء. اوضحت النتائج وجود علاقة بين المورثين في مرضى التهاب القولون التقرحي وسرطان القولون عند قياسهما بالاصحاء، اذ اعطى الجين الكابح للورم نسبة 66 % في الانسجة المصابة بالتهاب القولون التقرحي قياسا بسرطان القولون وهذا يوضح حصول طفرات تراكمية في الجين الكابح للورم P53 والذي يعطي مؤشر على التقدم نحو التسرطن ، وكذلك الحال مع الجين Bcl - 2 الذي اوضح زيادة بالتعبير الجيني لهذا الجين في النماذج النسيجية لمرضى التهاب القولون التقرحي قياسا بسرطان القولون والاصحاء. ان التحري عن جين P53 يعطي مؤشرا عن الطفرات التراكمية او الشذوذ في فعالياته ويمكن الاستفادة منه في اعتباره قيمة تشخيصية وانذارية. اما بالنسبة للجانب المناعي فقد استخدمت فحوص مناعية عدة متمثلة بقياس الكلوبيولينات المناعية (IgG , IgA , IgM)، والعامل المتمم (C3 & C4) وفحص الاضداد الذاتية لسايتوبلازم الخلايا العدلة (ANCA) Anti neutrophile cytoplasmic antibodies والذي يشمل c - ANCA والذي اعطى حوالي 50% نتيجة موجبة من مجموع العينات، وفحص p - ANCA والذي اعطى حوالي 50% نتيجة موجبة، وفحص الاجسام المضادة الذاتية للمتقدرات (AMA) الذي اعطى حوالي 48% نتيجة موجبة وفحص الاضداد المناعية الذاتية للشريط المزدوج للحامض النووي منقوص الاوكسجين dsDNA)) الذي اعطى 43% نتيجة موجبة، وفحص اضداد شحم القلب (Anticardiolipin ) الذي اعطى 40% نتيجة موجبة من مجموع العينات.اوضحت نتائج الفحوصات المناعية ارتفاع نسب الكلوبيولينات المناعية والعامل المتمم في مصل مرضى التهاب القولون التقرحي وسرطان القولون قياسا بالاصحاء وعلى مستوى احتمالية (P ≤ 0.01). ان نتائج الفحوصات المناعية المستعملة في هذه الدراسة تفسر وجود اضداد ذاتية في مصل مجاميع المرضى المصابين تحت الدراسة. وهذا يوضح كون المرض يمكن ان يعزى في جانب منها الى اسباب مناعية ذاتية. | The investigation has been done on the peripheral blood and biopsy samples which drawn from patients suffered from ulcerative colitis & colon cancer , the samples were taken from female and male of different ages . The collected blood samples were about 10 ml &each sample was divided into 3 parts , the first part used for cytogenetic studies,the second part used for molecular studies & the last part used for immunological studies . The cytogenetic studies has been done in order to define the damaging effect of the disease and the effect of the drug (methotrexate ) on the peripheral blood lymphocytes . these damages were manifested through the significant reduction in the blastogenic index (BI ) , mitotic index ( MI ) , & replication index ( RI ) . This accompanied by significant increase in the sister chromatid exchange ( SCEs ) . In addition to investigate the mutation fraction in the cells cultured in selective medium containing different concentration of the drug . The results also showed presence of mutant cells that can grow in increasing concentrations of methotrexate . The molecular studies include measuring the concentrations of different types of nucleic acids ( dsDNA , ssDNA , RNA ) done by culturing the peripheral blood cells in different incubation times which include T 0 , T1 ( 24 hrs ) , T2 (48hrs ) , T3 (48 hrs ) & T4 (72 hrs ) . The results indicate disturbance in cell cycle comparing with healthy individuals . There was no significant differences in types of nucleic acids between patients & controls , when culturing the resistant cells of blood lymphocytes in high concentrations of the MTX drug ( 1 μg/ ml , 2 μg / ml ) . On the levels of in situ hybridization , the colonic biopsies which collected from patients of ulcerative colitis and colon cancer were examined for gene expression of P53 gene and Bcl - 2 gene . The results indicated accumulated mutations in P53 gene in the inflammed colonic biopsies , this result give an indication for progression of carcinogenesis .While on the level on Bcl - 2 , the results showed increasing in the activity of the gene , resulting in increase in gene expression of Bcl - 2 gene . The gene expression of Bcl - 2 in inflamed colonic tissues were approximately similar to gene expression in tissues of colon cancer . this indicate that the chronic inflammation of UC may ultimately infected with colon cancer . The detection of P53 gene and Bcl - 2 gene in chronic ulcerative colitis give early detection for diagnostic & therapeutic and monitering purposes . The immunological studies conducted to insight into immunological disturbance associated with clinical expression of ulcerative colitis of Iraqi patients and to provide a locally made easy diagnostic tests that can be used in routine work and to study the recent serological markers , that may help in the diagnosis of IBD . The immunological profiles of the patients of UC were studied using different parameters . To assess the importance of antineutrophile cytoplasmic antibodies ( ANCA ) were found in enzyme linked immunoassay ( ELISA ) , for anti - myeloperoxidase (anti - MPO ) antibodies as (P - ANCA) and anti - propteinase - 3 (anti - PR - 3 ) antibodies for ( C - ANCA ) . The C - ANCA test give 50 % positive results , while the P - ANCA test give 55% positive results . The anti - mitochondrial M - 2 antibody was estimated in sera of UC patients and gives 48% positive results . The other serological marker used was the double strand DNA antibody and give 43 % positive results . Also the anticardiolipin antibody was examined and the test give 40 % positive results and this result indicate presence IgM / IgG concentrations in the sera of patients . The levels of immunoglobulins that include ( IgG , IgM , IgA ) as well as some of complement components ( C3 , C4 ) were used in estimation in the sera of the studied groups . The results showed an increase in the levels of immunoglobulins and the complement concentrations at levels of P ≤ 0.01 . The results of immunological markers in this study explained presence of auto antibodies and emphasized by increasing levels of immunoglobulins in the sera of the patients

دور بعض المتغيرات المناعية والاصابات الفيروسية في احداث الاجهاضات العفوية المفردة والمتكررة == The role of some immunological changes and some viral infection in single and recurrent spontaneous abortion

Author name: رنا سعدي عبود كاظم
Supervisor name: غنيمة صادق محمد | جاسم طعمة الخفاجي
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Immunology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: لغرض تسليط الضوء على بعض المتغيرات المناعية والهرمونية وتشخيص بعض انواع الفيروسات المرافقة لحالات الاجهاض العفوي المفرد والمتكرر ، تمت دراسة (90) امراة تعرضن لحدوث اجهاضات عفوية مفردة ومتكررة غير مشخصة السبب ، (20) منهن تعرضن للاجهاضات العفوية المفردة خلال الاشهر الاولى من الحمل ، (10) منهن تعرضن للاجهاضات العفوية المفردة خلال الاشهر الثانية من الحمل ، (40) منهن تعرضن للاجهاضات العفوية المتكررة خلال الاشهر الاولى من الحمل ، (20) منهن تعرضن للاجهاضات العفوية المتكررة خلال الاشهر الثانية من الحمل ، اجريت المقارنة مع (30) امراة ، (15) امراة ذات حمل طبيعي و(15) امراة غير حوامل وبالفئات العمرية نفسها ، وعدت مجموعة السيطرة.بينت الدراسة الحالية النتائج الاتية : 1 - ارتفاع مستويات الاضداد الذاتية لدى النساء ذوات الاجهاض العفوي المفرد والمتكرر اذ سجل لديهن : ا - ارتفاع مستويات اضداد شحم القلب Anticardiolipin antibodies (ACA) وبصورة معنوية عالية (P<0.01) في مصول النساء المجهضات كافة عند مختلف مراحل الحمل قياسا بمجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء والنساء غير الحوامل ). ب - لوحظ هنالك ارتفاع معنوي عالي (P<0.01) في مستويات اضداد البروتينات السكرية نوع بيتا - 1 الصنف (IgM) β2 - GP1 - IgM عند الموازنة ما بين مجاميع النساء المجهضات كافة عند مختلف مراحل الحمل ومجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء والنساء غير الحوامل ).ج - لوحظ ارتفاع معنوي عالي (P<0.01) في مستويات اضداد البروتينات السكرية نوع بيتا - 1 الصنف (IgG) β2 - GP1 - IgG عند الموازنة ما بين مجاميع النساء المجهضات كافة عند مراحل الحمل المختلفة ومجاميع السيطرة (النساء الحوامل الاصحاء والنساء غير الحوامل). ء - ارتفاع مستويات اضداد الشريط المزدوج للدنا (Anti - dsDNA) وبفوارق معنوية عالية (P<0.01) لدى مجاميع النساء المجهضات كافة عند مختلف مراحل الحمل قياسا بمجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء والنساء غير الحوامل ).هـ - ابدت (14) امراة من المجموع الكلي للنساء المجهضات (15.6)% تفاعلا موجبا للاضداد النووية (ANA) بالقياس مع نساء السيطرة اللاتي كن جميعهن سالبات لهذين الاختبارين.2 - ارتفاع مستويات كل من : (IL - 2 , IFN - γ , TNF - α) وبفوارق معنوية عالية (P<0.01) في مصول النساء المجهضات كافة عند مراحل الحمل المختلفة قياسا بمجاميع السيطرة (النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).3 - لوحظ هنالك انخفاض معنوي عالي (P<0.01) في مستويات كل من : (IL - 10)، و(IL - 4) في مصول النساء ذوات الاجهاضات العفوية كافة عند مراحل الحمل المختلفة قياسا بمجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).4 - لوحظ ارتفاع معنوي عالي (P<0.01) في مستويات كل من الغلوبيولينات المناعية (IgM,IgA,IgG) في مصول النساء ذوات الاجهاضات العفوية كافة عند مراحل الحمل المختلفة قياسا بمجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).5 - لوحظ هنالك ارتفاعا معنويا عاليا (P<0.01) في مستوى جزء المتمم الثالث والرابع (C4 , C3) لدى النساء المجهضات كافة عند مراحل الحمل المختلفة قياسا بمجاميع السيطرة ( النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).6 - بلغت نسبة انتشار اضداد داء المقوسات Anti - Toxoplasma Ab الصنف (IgM) في 18 حالة (20)% من المجموع الكلي للنساء المجهضات عند مختلف مراحل الحمل في حين لوحظ وجود (32) حالة %(35.6) من المجموع الكلي للنساء المجهضات يمتلكن اضداد نوعية لداء المقوسات صنف (IgG) . 7 - بلغت نسبة انتشار اضداد فيروس مضخم الخلايا (CMV) الصنف ((IgG في (12) حالة (13.3)% من المجموع الكلي للنساء المجهضات عند مختلف مراحل الحمل ، في حين لوحظ وجود اضداد فيروس مضخم الخلايا صنف (IgM) في (25) حالة %(27.8) من المجموع الكلي للنساء المجهضات. 8 - وجود الاضداد النوعية صنف (IgM) لفيروس الحميراء (Rubella virus) في (10) حالات (11.1)% من المجموع الكلي للنساء المجهضات عند مختلف مراحل الحمل في حين لوحظ وجود اضداد فيروس الحميراء صنف (IgG) في 21 حالة %(23.3) من المجموع الكلي للنساء المجهضات.9 - بلغت نسبة انتشار الاضداد النوعية صنف (IgM) لفيروس القوباء البسيط (HSV 1 and 2) في 4 حالات (4.4)% من المجموع الكلي للنساء المجهضات عند مختلف مراحل الحمل .10 - لوحظ وجود ارتفاع معنوي (P<0.05) في مستوى الهرمون المحفز للجسم الاصفر(LH hormone) لدى مجاميع النساء المجهضات كافة عند مختلف مراحل الحمل قياسا بمجاميع السيطرة (النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).11 - ارتفاع مستوى هرمون البرولاكتين (Prolactin hormone) بصورة معنوية عالية (P<0.01) في مصول النساء المجهضات كافة عند مختلف مراحل الحمل قياسا بمجاميع السيطرة (النساء الحوامل الاصحاء وغير الحوامل).12 - وجود علاقة ترابطية ليست ذات دلالة معنوية (P>0.05) ما بين اضداد شحم القلب (ACA) وكل من الحركيات الخلوية (IL - 2 , IL - 4 , IL - 10, IFN - γ ,TNF - α) وكذلك ما بين اضداد الشريط المزدوج للدنا (Anti - dsDNA) ،والحركيات الخلوية قيد الدراسة.13 - وجود علاقة ترابطية ليست ذات دلالة معنوية (P>0.05) ما بين هرمون الـ (LH) والحركيات الخلوية قيد الدراسة ,وكذلك ما بين هرمون البرولاكتين وكل من (TNF - α وIFN - γ وIL - 2 و(IL - 10، في حين لوحظ وجود علاقة ترابطية ذات قيمة معنوية (P<0.05) ما بين هرمون البرولاكتين و(IL - 4) .14 - لوحظ وجود اصابات مشتركة ما بين اضداد شحم القلب (ACA) والاصابات الفيروسية، وكذلك وجود اصابات مشتركة ما بين الانواع المختلفة للعوامل الخمجية في هذه الدراسة.س | To shed light on some immunological ,hormonal changes and identification of some viruses that are accompanied to single and recurrent abortion . The study were done on (90) undiagnosed aborted women at different stage of pregnancy. (20) had single abortion during first trimester of pregnancy , (10) had single abortion during second trimester of pregnancy , (40) had recurrent abortion during first trimester of pregnancy , and (20) had recurrent abortion during second trimester of pregnancy . The comparisons were done with (30) women , (15) had normal pregnancy and (15) unpregnant women at the same ages and considered as control groups .The results of this study showed : 1. Increased autoantibodies levels in women that had spontaneous abortion which is : A. Highly significant increased (P<0.01) in anticardiolipin antibodies (ACA) levels in the serum of aborted women at different stages of pregnancy , compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).B. Highly significant increased (P<0.01) in the level of β2 - glycoprotein 1 type (IgM) (β2 - GP 1 - IgM) when compared between all groups of aborted women at different stages of pregnancy and control groups (healthy pregnant and non pregnant women).C. Highly significant increased (P<0.01) in the level of β2 - glycoprotein 1 type (IgG) (β2 - GP 1 - IgG) when compared between all groups of aborted women at different stages of pregnancy and control groups (healthy pregnant and non pregnant women).D. Highly significant increased (P<0.01) in the level of anti - double stranded DNA (anti - dsDNA) in all groups of aborted women at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).E. (14) (15.6)% from total test of aborted women showed positive reaction to antinuclear antibodies (ANA) compared with control groups which were negative to this test. 2. Highly significant increased (P<0.01) in the levels of (TNF - α , INF - δ , IL - 2) in serum of all aborted women at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).3. Highly significant decreased (P<0.01) in the levels of (IL - 10, IL - 4) in serum of women that had spontaneous abortion at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).4. Highly significant increased (P<0.01) in the levels of immunoglobulins (IgG,IgA,IgM) in serum of women that had spontaneous abortion at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).5. Highly significant increased (P<0.01) in the levels of complement component (C3,C4) in all aborted women at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).6. Antitoxoplasma antibodies (IgM) were found in (18) (20)% from total aborted women at different stages of pregnancy ,while found in (32) (35.6)% from total aborted women have antitoxoplasma antibodies (IgG). 7. Anti CMV antibodies type (IgM) were found in (12) (13.3)% from total aborted women at different stages of pregnancy ,while anti CMV antibodies type (IgG) were found in (25) (27.8) % from total aborted women .8. AntiRubella antibodies type (IgM) were found in (10) (11.1)% from total aborted women at different stages of pregnancy ,while antiRubella antibodies type (IgG) were found in (21) (23.3)% from total aborted women .9. Anti (HSV 1,2) antibodies type (IgM) found in (4) (4.4)% from total aborted women at dofferent stages of pregnancy.10. Significant increased (P<0.05) in the levels of LH hormone was found in all aborted women at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).11. Highly significant increased (P<0.01) in the levels of prolactin hormone in serum of all aborted women at different stages of pregnancy ,compared with control groups (healthy pregnant and non pregnant women).12. There was a correlation between (ACA) and each of cytokines (TNF - α , INF - δ , IL - 8 , IL - 10 , IL - 4) but this correlation was non significant (P>0.05) and also between anti - dsDNA and all cytokines tested.13. There was non significant correlation (P> 0.05) between LH hormone and all cytokines tested and also between prolactin hormone and each of (TNF - α , INF - δ , IL - 2 , IL - 10) , while there was significant correlation (P<0.05) between prolactin hormone and (IL - 4). 14. There was Co - infection between (ACA) and infectious agents and also between different types of infectious agents in this study.

دراسة مرضية وجزيئية لبكتريا Helicobacter pylori المعزولة من المرضى المصابين بالقرح المعدية والمعوية == Pathological and Molecular study on Helicobacter pylori isolated from patients with gastric and duodenal ulcers

Author name: رباب قاسم محمد الصكر
Supervisor name: ضحى سعد صالح | اياد محمد علي فاضل
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Bacteria
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: جمعت80 خزعة نسيجية من المرضى المصابين بامراض القرح المعدية والمعوية، اظهرت نتائج الاختبارات النسيجية المرضية هيمنة التهاب المعدة المزمن بنسبة %35 واتت قرحة المعدة ثانية بنسبة %22.5.اظهرت الدراسة كفاءة اختبار اليوريزالسريع في التحري عن هذه الجرثومة اذ استطاع ان يثبت وجود هذه الجرثومة في 62 خزعة نسيجية واتت الاختبارات النسيجية المرضية ثانية حيث ظهرت جرثومة H.pylori في 47 خزعة نسيجية في حين تمكن الاستنبات البكتيري من الحصول على 42 عزلة بكتيرية.اثبت فحص الحساسية الدوائية تجاه عشر مضادات حيوية كفاءة المضادين الحيويين السيفوتاكسيم والريفامبسين في القضاء على هذه الجرثومة فقد كانت نسبة المقاومة لهما %10 واتى المضادان الحيويان التتراسايكلين والدوكسي سايكلين ثانية بنسبة مقاومة %20،%30 كانت نسبة المقاومة للارثرومايسين والكلارثرومايسين، فيما كانت نسبة المقاومة للاموكسيسلين %100 ونسبة المقاومة %80 لكل من المترونيدازول والسبروفلوكساسين اما الجنتامايسن فكانت نسبة المقاومة له %50.تم نمطت العزلات وراثيا باستعمال بوادىء متخصصة بالكشف عن قطعة الدنا التي تمثل المورث ure AB والمساوية الى 492زوج قاعدة لوحظ احتواء ثمان عزلات على هذا المورث فيما خلت العازلتان HP7 وHP9 من هذا المورث باستعمال تقنية الـ PCR.اظهرت نتائج النسق البلازميدي ان %50 من عزلات H.pylori تحوي بلازميدات، فقد احتوت العزلات (HP3, HP4, HP6, HP8) على بلازميدات صغيرة وامتلكت العزلتان (HP4,HP6) بلازميدا كبيرا فضلا عن بلازميدها الصغير فيما خلت العزلات الباقية من البلازميدات.اظهرت نتائج التحييد البلازميدي باستعمال صبغة بروميد الاثيديوم بوصفها مادة محيدة وبتركيز 3000 مايكوغرام/ مليليتر فقدان العزلة HP4 بلازميدها الكبير والصغير نتج عن ذلك فقدان تلك العزلة HP4صفة انتاج انزيم اليوريز وكذلك فقدانها المقاومة للمضادين الحيويين المترونيدازول Metronidazole والسروفلوكساسلين Ciprofloxacillin.اظهر التحول الوراثي Gentic transformation بين الدنا المستخلص من العزلة HP4 وبين العزلة HP1 التي عدت خلية كفوءة اكتساب الاخيرة صفة المقاومة للمترونيدازول اذ استطاعت ان تنمو على اوساط انتخابية تحوي 32 مايكوغرام/ مليلترمن هذا المضاد.اجريالتحول الوراثي ثانية بين دنا العزلة Hp4 وبكتريا تابعة لجنس اخر هي بكتريا Escherichia coli MM294 اظهرت نتائج هذه التجربة اكتساب بكتريا E.coli صفة انتاج انزيم اليوريزو المقاومة للمترونيدازول والسبروفلوكساسين من بكتريا H.pylori. | A 80 biopsies were collected from gastric & duodenal ulcers, showed dominance of chronic gastritis and gastric ulcers in aratio of %35 and %22.5, respectively.Rapid urease test, histopathological examination and cultural for detection of Helicobacter pylori, Showed the presence of this bacterium in 62 biopsies for urease test, in 47 biopsies for his topathological examination and in 42 biopsies in culture examination.Antibiotic susceptibility tests againt 10 isolates of H.pylori, Showed %10 resistance for cefotaxim & Rifampin, %20 resistance for Tetracyclin & Doxycyclin, %100 resistance for Amoxycillin, %80 resistance for Meteronidazole & ciprofloxacin and %50 resistance for Gentamicin.Genotyping by specific primer in PCR reaction for ureAB gene, Showed that 8 isolates were positive for this gene, where 2 isolates were negative.Plasmid profile for H.pylori isolatez Showed small single plasmid in each of HP3, HP4, HP6 and HP8 isolates and single small and larg plasmids for HP4 and HP6 isolates whereas other isolates were free of plasmids.Curing experiment for HP4 isolate by using ethidium bromide as acuring agent in aconcentration 3000 Mg/ ml, Showed the cured derivation lost their Urease production trait and resistance to meteronidazole & ciprofloxacin.Transformants resulted from transformation experiment between HP4 total DNA & HP1 as acompotent cell, Showed acquired ability to grow on selectve medium containing 32 Mg/ ml of metrronidazole.Another transformants, resulted from transformation experimeat between HP4 total DNA and Escherichia coli MM294 as acompetent cell, Showed acquired ability for Urease production & ciprofloxacin & Meteronidazole resistance.

تقييم بعض المؤشرات المناعية لمرض بهجت في عينة من المرضى العراقيين == Evaluation of some Immunological Parameters of Behcet's disease in a sample of Iraqi patients

Author name: دنيا فريد سلوم
Supervisor name: ضحى سعد صالح | جاسم طعمة الخفاجي
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Immunology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: اجريت الدراسة على 70 مريض عراقي من العرب بواقع 39 مريضا من الاناث و31 مريضا من الذكور خضعوا للصفات التشخيصية العالمية لمرض بهجت وهم من المراجعين لمختبر التطابق النسيجي في المختبرات التعليمية في مدينة بغداد الطبية للفترة من نيسان 2009 - ايار 2010، كان41 مريضا ( 58.6 %) ، منهم مشمولا بالتهاب العين بينما 29 منهم لم يكن لديهم شمول للعين . شملت الدراسة على مجموعة السيطرة والمتكونة من 20 شخص ظاهريا اصحاء ومطابقين لمجموعة المرضى من ناحية العمر والجنس ، وكانت نسبة الذكور الى الاناث 0.8 ومتوسط عمر المرضى (36.3 ± 1.4) سنة ومتوسط عمر حدوث المرض (32 ± 1.3) سنة وفترة المرض (4.7 ± 0.37) سنة وان معدل كتلة الجسم (24.8 ± 0.4 كغم/ملم2) وان اكثر الصفات السريرية تكرارا هي افات فموية وافات جلدية بتكرار 100 % وافات تناسلية 50 %، ، اما اختبار باثرجي فكان سالبا عند كل المرضى (لم يظهر انتفاخ جلدي التهابي ولم يحوي على قيح او يحوي على قيح بعد مرور 24 - 48 ساعة)، وكان متوسط عمر المرضى المشمولين باصابات العين (32 ± 1.6) سنة وفترة حدوثها (2.4 ± 0.32) سنة واحتلت النساء النسبة الاعلى 51.2 % مقارنة بالذكور 48.7 % .تم تقييم مستضدات HLA B51 وHLA B27لمجموعة المرضى والسيطرة ، اضداد الهربس نوع IgG ، اضداد الكلاميديا نوع IgG وIgM ، العامل البروتيني الانتكاسي ، معدل ترسيب كريات الدم الحمر ، انترليوكين 8 ، انترليوكين 10 ، بيتا - 2 - مايكروغلوبيولين ، اضداد المادة النووية ، اضداد سايتوبلازم الخلايا العدلة . اظهرت النتائج وجود زيادة احصائية معنوية للاليل HLA B51 في المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة، وكان HLA B51 (+) في 39 مريض (55.7 %) ، وان 59 % من المرضى الذين يحملون الاليل HLA B51 (+) هم من الذكور، فقد يرتبط وجود هذا الاليل مع زيادة احتمالية حدوث المرض ، وعلى النقيض فان الاليل HLA B27 ينخفض في المرضى مقارنة بالاصحاء اي ليس له دورا في المرض ولم يصل الى حد الفرق المعنوي . كما وجد ان 65.9 % من مرضى مجموعة HLA B51 (+) كان لديهم شمول العين و24.3 % من المرضى حاملين HLA B51 (+) وB27 (+) ، وان الاليل HLA B27 (+) في المرضى ربما يفيد كمرتبة تصنيفية لالتهاب العين في مرضى بهجت .وكانت نسبة الافات الفموية والجلدية في المرضى الذين يحملون HLA B51 55.7 % بينما كانت نسبة الافات التناسلية 45.9 % .اظهرت النتائج وجود اضداد IgG لفيروس HSV - 1 في مصل 24 مريض (34.2 %) كما اظهرت اضداد الكلاميديا الرئوية IgG عند 15 مريض (21.4 %) اما شمول العين لدى المرضى فظهرت متلازمة مع اضداد الجرثومتين بنسبة 41.5 % و29.2 % على التوالي هذا يشير ربما ان للفيروس او البكتيريا دورا في استحثاث المرض . بينت النتائج وجود زيادة احصائية معنوية في تركيز اللبتين وال بيتا 2 مايكروغلوبيولين في المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة الشيء الذي يؤشر الى دوره في الامراضية وعدم وجود فروق معنوية في تركيزهما في مجموعة المرضى المشمولين باصابات العين من الذين لم يكن لديهم شمول بتلك الاصابات من المرضى هذا يشير الى ان اللبتين يلعب دورا في امراضية المرض دورا طفيفا كعامل خطورة عند مجموعة المرضى الذين لديهم شمول العين . كما ان مستضدات التوافق النسيجي B51 لم يكن لها دور مع اللبتين والبيتا 2 مايكروغلوبيولينفي المرضى .ظهرت زيادة معنوية في تركيز IL - 8، IL - 10 في مصل المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة، وان تركيز هذه المؤشرات كان منخفض في مرضى من كان لديهم شمول العين من المرضى الاخرين الذين لم يكن لديهم شمول للعين، ولم يكن لمستضدات التوافق النسيجي B51 على هذه االموشرات. ان هناك علاقة موجبة بين تركيز العامل البروتيني الانتكاسي وتركيز IL - 8 كذلك بين الاخير وتركيز اللبتين. ظهرت زيادة معنوية في تركيز العامل البروتيني الانتكاسي ومعدل ترسيب كريات الدم الحمر في مرضى بهجت وان العامل البروتيني الانتكاسي لم يزداد عند مجموعة مرضى شمول العين بينما لوحظت زيادة معنوية في معدل ترسيب كريات الدم الحمر عند تلك المجموعة .اظهر اختبار التالق المناعي غير المباشر سلبية اضداد الانوية وايجابية اضداد سايتوبلازم الخلايا العدلة النمط P عند 8.5 % من المرضى . | A total of 70 Iraqi Arab patients (39 females, 31 males), who fulfilled the international study group criteria for diagnosis of Behcet's disease (BD) were enrolled in this study. Forty one patients (58.6 %) had ocular involvement, while non - ocular involvement was found in 29 patients (41.4 %). The patients attended the HLA Typing Laboratory in Teaching Laboratories of Baghdad Medical City from April 2009 - May 2010.A control group of twenty subjects were also included, and they were matched patients for gender and age.The ratio of male to female was 0.8. The mean age was 36.3 ± 1.4 years and the mean age at onset was 32 ± 1.3 years. The duration of disease was 4.7 ± 0.37 years with body mass index of 24.8 ± 0.4 Kg / m2, and the high percentage (60 %) of patients was at the age range 31 - 60 years.The overall frequency of clinical manifestation was 100 % for oral lesion, 100 % for skin lesion, 50 % for genital lesion, 58.6 % for ocular lesion and Pathergy test was negative in all patients. The mean age of ocular lesion patients was 32 ± 1.6 years with duration of 2.4 ± 0.32 years. Ocular lesion involvement in females was higher (51.2 %) than males (48.7 %).The patients and control were evaluated for HLA - B51, HLA - B27, Anti herpes simplex virus - 1 (HSV - 1) IgG, Anti Chlamydia pneumoniae IgG and IgM, Leptin, C - reactive protein (CRP), Erythrocyte Sedimentation Rate (ESR), Interleukin - 8 (IL - 8), Interleukin - 10 (IL - 10), β2 Microglobulin (β2M), Antinuclear antibody (ANA) and Antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCa).There was a statistically significant increase in HLA B51 in patients as compared with controls (55.7 % vs 10 %), 59 % in of HLA B51 (+) was found in males. This marker might play crucial role in pathogenesis of BD. In contrast HLA B27 was decreased in the patients as compared two controls, it may have no role in the disease but the differences did not reach a significant level. High percentage (65.9 %) of HLA B51 positive was found in ocular BD. (24.3 %) of patients had HLA B27 positive and B 51 positive, double positive B27 and B51 patients may be the benign subgroup of BD uveitis.The percentage of patients with oral lesion and skin lesion positive for HLA B51 were 55.7 %, while it was 45.7 % in patients with genital involvement.Anti Herpes simplex virus - 1 (HSV - 1) IgG was found in 24 patients (34.2%), while anti Chlamydia pneumoniae IgG antibodies were found in 15 patients (21.4%) . Eye involvement was found in association with antimicrobes antibodies (41.5% and 29.2%, respectively). This suggests that these microbes may be the trigger factor of BD.Results indicated statistically significant increase in the concentration of leptin and β2M as compared with control group, but no significant differences in leptin concentration between ocular and non - ocular BD This suggest that leptin plays a role in pathogenesis of disease but it has a slight risk factor in ocular involvement.There was statistically significant increase in the concentration of IL - 8 and IL - 10 in sera of patients as compared with the controls, and these parameters were lower in ocular BD patients than non - ocular BD. This suggests that these parameters might play a role in immunopathogensis of BD. There was positive correlation between CRP and IL - 8 as well as, between IL - 8 and leptin concentrations.There was statistical increase in C - reactive protein concentration and ESR in BD patients as compared with the controls. The CRP showed a non - significant increase in ocular BD patients, while ESR was significantly increased.Indirect immunofluorescent technique indicated a negative anti nuclear antibody (ANA) in all cases, while the anti neutrophile cytoplasmic antibody (AN

في نماذج عنق (HPV) التنميط الجيني للفيروسي الحليمي البشري الرحم لنساءعراقيات باستخدام تقنيتي الوقت الحقيقي - سلسلة تفاعل البلمرة والصفوف الجينية == Genotyping of Human Papillomavirus in a sample of Iraqi women with cervical abnormalities by using Real - Time PCR and Macroarray

Author name: حلى يونس فاضل السعدي
Supervisor name: ضحى سعد صالح | فيصل غازي ناصر
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Viruses
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: هدفت الدراسة الحالية التحري عن العلاقة بين اصابة الفيروس الحليمي البشري (HPV) وحالات الخلايا غير الطبيعية لعنق الرحم في النساء العراقيات. تضمنت الدراسة 122امراة لديهن اعراض سريرية لاصابة عنق الرحم, 110 امراة منهن تميزت بنمو الخلايا غير الطبيعية لعنق الرحم او السرطانية, حيث كان 40.9 % من تلك النساء كان لديهن اصابة بالفيروس الحليمي البشري, اما 12(16.7%) امراة المتبقية تميزت بنمو الخلايا الطبيعية لعنق الرحم بالرغم من وجود التهاب مزمن والتي جمعت خلال عام 2010. تضمنت مجموعة السيطرة 10 نساء والتي تميزت بغياب كل من التغيرات الخلوية, العلامات السريرية والاصابة بالفيروس الحليمي البشري. اظهرت نتائج مسحات عنق الرحم وجود نوعين من خلايا عنق الرحم غير الطبيعية هي : اصابة الخلايا الطلائية الداخلية الحرشفية قليلة الخطورة (LSIL) التي شملت 70% من حالات الاصابة بالفيروس, واصابة الخلايا الطلائية الداخلية الحرشفية عالية الخطورة (HSIL) التي شملت 26% من حالات الاصابة الايجابية. بينما 4% من مجموع الاصابة الكلية تمثلت بالنساء ذو الخلايا الطبيعية لعنق الرحم والالتهاب المزمن . هي الصفة المميزة للاصابة بالفيروس. تلك الصفة ترافقت مع 100% بوجودKoilocytosisالثاليل التناسلية الظاهرة للعيان و16.7% ترافقت مع الثاليل المستوية (غير الظاهرة). تشير دراسة الدنا الفيروسي باستعمال تجربتي سلسلة تفاعل البلمرة - الوقت الحقيقي(PCR Real­Time) والصفوف الجينية(MacroArrays) التي طبقت لاول مرة في العراق الى وجود الفيروس الحليمي البشري بنسبة 35.6% في كل المجاميع المدروسة. تشير النتائج الى وجود 17 نمط جيني مختلف للفيروس الحليمي البشري بين 47 امراة مصابة باستعمال تقنية الصفوف الجينية, اربعة عشر من هذه الانماط الجينية كانت من الانماط عالية الخطر والتي شكلت 82.35% من مجموع الانماط والانماط الجينية المتبقية كانت من الانماط قليلة الخطر والتي شكلت 17.56% من مجموع الانماط. دى النتائج المهمة للدراسة الحالية تشير الى وجود 10 انماط جينية مختلفة ربما سجلت للمرة الاولى في النساء العراقيات ( 31 - , 45 - , 51 - , 52 - , 53 - , 58 - , 59 - , 66 - , 68 - , 44 - HPV ). لنمط الجيني 16 - HPV هو السائد على الانماط الجينية السبعة عشر, شكل هذا النمط مع الانماط الجينية (59 - , 39 - , 66 - , 6 - HPV) الانماط الخمس الاكثر شيوعا في العينات الموجبة. كما اظهرت الدراسة بان النساء ذوات الخلايا الطبيعية لعنق الرحم والمصابة بالفيروس تحمل الانماط الجينية 16 - HPV و59 - HPV. كما شخصت سبعة انماط جينية مختلفة في عينات الثاليل التناسلية الظاهرة وهي (16 - , 6 - , 11 - , 39 - , 59 - , 66 - , 44 - HPV ). اشارت النتائج الى ان 32 (68.09%) من بين 47 امراة مصابة كانت لديهن الانماط عالية الخطر فقط, سواء كانت الاصابة بانماط مفردة او متعددة, بينما ثمان نساء (17.2%) كان لديهن الانماط عالية وقليلة الخطر سوية, وسبع نساء (14.89%) كان لديهن الانماط قليلة الخطر فقط. استعمل المجهر الالكتروني النافذ للتحري عن الجزيئات الفيروسية في عشر عينات موجبة للدنا الفيروسي وذو تغيرات خلوية مختلفة, حيث اظهرت النتائج وجود الجزيئات الفيروسية في ست عينات بمستويات مختلفة من المرضى واربع عينات لم تظهر جزيئات فيروسية. استخدمت تجربة التحول اللمفاوي لتقييم الحالة المناعية للمصابين. حيث وجدت نسبة التحول عالية في النساء ذوات الخلايا الطبيعية في عنق الرحم والمصابة بالفيروس (اصابة كامنة), بينما انخفضت نسبة التحول اللمفاوي في النساء ذوات الخلايا غير الطبيعية في عنق الرحم . امتلكت 40% تقريبا من حالات الثاليل التناسلية معدل عالي للتحفيز التكاثري للخلايا التائية عند مقارنتها بمجموعة السيطرة. اضافة الى ذلك كان التحفيز التكاثري للخلايا التائية مستقلا احصائية عن كل من نوع الاصابة, المحتوى الفيروسي والمجاميع العمرية. استخدمت تجربة تفاعل سلسلة البلمرة - الوقت الحقيقي للكشف عن الفيروس وكميته لثلاثة عشر نمط جيني الاكثر ترددا بين المستويات المختلفة للنمو غير الطبيعي للخلايا الطلائية لعنق الرحم في الحالات : قبل الاورام, الاورام والسيطرة الاصحاء(132 عينة). اظهرت نتائج فحص سلسلة البلمرة بان 35 حالة موجبة من 47 حالة اصابة فيروسية التي شملت 74.5% من مجموع الاصابات الكلية. بينما الحالات المتبقية (12 حالة ) التي مثلت 25.5% من مجمو الاصابات الكلية لم يكشف عنها بهذه التقنية. لذلك قدر عدد نسخ الدنا الفيروسي لاغلب الانواع الفيروسية عالية الخطرفي 33 عينة موجبة بمستويات مختلفة من التغيرات الخلوية وعينتين موجبتين ذوات خلايا طبيعية لعنق الرحم . توزع المحتوي الفيروسي ل 33 عينة اعلاه من 1×10 الى 9.4×106 نسخة /مل بمعدل (4.17×104 نسخة /مل). اما العينتين المتبقيتين كانتا خارج قيم المنحى القياسي لذا قدرت ب 5× 107 و1×109 نسخة /مل تقريبا. صنف المحتوى الفايروسي لل35 عينة اعلاه كالاتي : 46% من العينات كمحتوى فيروسي عالي, 34% كمحتوى فيروسي منخفض و20% كمحتوي فيروسي متوسط. استخدم اختبار الصفوف الجينية لفحص 68 عينة, 36 عينة منها كانت موجبة و32 عينة كانت سالبة باختبار سلسلة تفاعل البلمرة - الوقت الحقيقي. حيث وجدت الانماط الجينية عالية الخطر باستعمال هذه التقنية في (36/35) 97% من العينات الموجبة, بينما العينة المتبقية كانت سالبة لفحص الصفوف الجينية. كما وجدت الانماط الجينية قليلة الخطر وعالية الخطر المحتمل في تلك 35 عينة الموجبة والتي لم يكشف عنها فحص تفاعل سلسلة البلمرة - الوقت الحقيقي فهي الانماط (6 - , 11 - , 53 - , 66 - HPV). اما فيما يخص العينات السالبة في فحص تفاعل سلسلة البلمرة - الوقت الحقيقي حيث فحصت باستعمال اختبار الصفوف الجينية ووجدت الانماط الجينية في 12 عينة منها, الانماط هي : (44 - , 66 - , 53 - , 11 - , 6 - , 58 - , 39 - HPV). تبين مما تقدم بان فحص الصفوف الجينية يتحرى عن 8 انماط جينية لا يكشف عنها فحص تفاعل سلسلة البلمرة - الوقت الحقيقي, تلك الانماط شكلت 32.84% من تردد الانماط و33.33% من الحالات الموجبة التي تمتلك عدة انماط وهذا يعكس العامل المهم الذي يفضل فحص الصفوف الجينية في التحري عن الفيروس. لذا يبدو اختبار الصفوف الجينية طريقة دقيقة واكثر حساسية لكشف وتنميط اصابات الفيروس الحليمي البشري مقارنة مع فحص تفاعل سلسلة البلمرة - الوقت الحقيقي. | The present study was conducted to investigate the relationship between Human papillomavirus (HPV) infection and cervical cytological abnormalities in Iraqi women. One hundred twenty two women were included in this study with a cervical infection. A sample of 110 women with abnormal cytology cervical dysplasia / cancer, 45 of which 40.9% had HPV infection and 12 (16.7%) women had chronic infection with normal cytology during 2010. A control group with 10 women of normal cytology and no HPV infection was included in study for comparison. Pap smear test results showed two types of cervical cytological abnormalities, low squamous intraepithelial lesion (LSIL) which comprised of 70% of HPV positive cases, and high squamous intraepithelial lesion (HSIL) which comprised of 26% of HPV positive cases. Whereas 4 % out of the total risk group was represented in women with normal cytology. Koilocytosis is pathognonomic for HPV infection. Furthermore, Koilocytosis was accompanied with 100% with genital wart presence and 16.7% was accompanied with flat wart presence. HPV - DNA studied using Real - Time PCR and MacroArray assay (GenoArray) which applied for the first time in Iraq indicates the presence of HPV - DNA in 35.6% of all tested groups. Results indicate the presence of 17 different HPV genotypes among 47 infected women by using macroarray technique. Fourteen of these HPV genotypes which comprised of 82.35% were high risk (HR - type) and 17.56% (3/17) were low risk (LR - type).One of the important results in the present study indicates the presence of ten different genotypes which may be recorded for first time in Iraqi women (HPV - 31, - 44, - 45, - 51, - 52, - 53, - 58, - 59, - 66 and - 68 types). Out of 17 genotypes HPV - 16 was the predominant one, this genotype together with genotypes 59, 6, 39 and 66 comprised of the five most common types detected in HPV positive cases. Moreover, percentage of HPV - 16, and - 59 were extended to involve women with normal cytology. Seven different genotypes - 6, - 11, 16, 59, - 39, - 66 and - 44 have been identified in genital wart specimens. Results indicated that 32 (68.09%) out of 47 infected women had HR type alone, whether single or multiple types, while eight women (17.02%) had HR types in association with LR types and seven women (14.89%) had LR type only. Transmission electron microscope (TEM) was used for viral particles detection from ten HPV DNA positive samples with different cytological changes. Results indicated the presence of viral particles in six samples with different grades of disease and four samples showed no viral particles. To evaluate the immune status of patients lymphocyte transformation assay was applied. Results indicated that transformed lymphocyte were found to be high in women with normal cytology which may have HPV as a latent infection, while they were decreased in women with abnormal cytology. Approximately 40% of genital wart cases have higher mean of proliferative T cell response when they were compared with control group. However, proliferative T cell responses were statistically independent on HPV infection type, viral load and aging group. Real - time PCR assay was employed for HPV detection and quantitation (viral load estimation) from the range of HR - HPV DNA 13 genotypes most frequently found in different grades of cervical intraepithelial neoplasia, cervical tumors and health controls from (132 samples). Results showed that out of 47 positive cases 35 cases can be detected by real - time PCR which comprised of 74.5%. Failures in detection by this technique included 12 cases which comprised of 25.5% of the positive samples. Therefore, viral DNA copies number for the most HR - HPV types in cervical samples was determined from 35 sample with low and high - grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN I, II, III and Squamous Cell Carcinoma), and with normal cytology. However, the viral load of the 33 samples spread over a wide range from 1×10 to 9.4×106 copies/ml (mean 4.17×104 copies/ml). In addition, two samples were around the standard curve values as : approximately 5×107 and 1×109 copies/ml considered. Viral load was estimated approximately 46% constituted as high viral load, 34% as low viral load and 20% as slightly high viral load. Macroarray was applied in 68 samples, 36 of which were positive and 32 were negative by the real - time PCR test. High - risk genotypes were found in 35/36 (97%) real - time PCR positive samples, whereas remaining two samples were negative for HPV DNA (false - positive) by macroarray assay. The low - risk and probable high - risk (PHR) HPV genotypes were detected in the 35 HPV - positive samples which are not detected by real - time PCR included genotypes : HPV - 6 (in three samples), - 11, - 53 and - 66 (in two samples for each). HR, PHR and LR HPV genotypes were detected by macroarray in the 11/31 HPV - negative samples in real - time PCR which comprised of genotypes : - 39, - 58, - 66, - 11, - 6 and - 44. The GenoArray (GA) is capable of detecting 21 HPV multiple genotypes, including 8 types not detecting in real - time PCR. These types represented 32.84% of HPV types frequency and 33.33% of HPV positive cases had multiple types, this may reflect the important factor potentially favoring the GA for HPV detection. Therefore, the GA genotyping assay appears to be more accurate and sensitive technique for the detection and genotyping of HPV infections than real - time PCR one.

دور الانزيمات المحللة للبروتين المنتجة من بكتريا Pseudomonas aeruginosa المعزولة محليا في تقرح القرنية == Role of Proteases Produced by Pseudomonas aeruginosa in Corneal Ulcer ( Keratitis)

Author name: ايمان جواد كاظم
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: English
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تضمنت الدراسة تاثيرات الاانزيمات المحللة للبروتين ( Proteases) المنتجة من بكتريا Pseudomonas aeruginosa المعزولة من التهاب القرنية القيحي والجروح, حيث جمعت (200) عينة شملت (150) عينة من مسحات العيون المصابة بالتهاب القرنية و(50) عينة من مسحات الجروح المختلفة. وقد تم الحصول على 17 (%8.5) عزلة بكتيرية من هذه المسحات تعود للنوع P. aeruginosa . وقد تم تشخيص العزلات بوساطة الاختبارات الكيموحيوية. ( 13 عزلة بكتيرية (% 8.7) من التهاب القرنية, و4 عزلات بكتيرية (%8) من الجروح). اظهرت نتائج الكشف عن قابلية البكتريا على انتاج انزيمات البروتيزات, ان 13 عزلة بكتيرية (76.5) كانت منتجة لانزيم Elastase ( 10 عزلة بكتيرية (%76.9) من التهاب القرنية و3 عزلة بكتيرية (%75) من الجروح ), ولوحظ ان العزلتين البكتيريتين P7 , وP11 من التهاب القرنية, وP2من الجروح اعطت اكبر منطقة تحلل 8, 10, 10) مليمتر (على التوالي. كما بينت النتائج ان الكشف النوعي عن قابلية العزلات البكتيرية P. aeruginosa على انتاج انزيم البروتيز القاعدي باستعمال وسط اغار الحليب المقشود (Skim milk agar) اظهر ان العزلات البكتيرية المعزولة جميعها من مرضى التهاب القرنية ومسحات الجروح لها القابلية على انتاجه, كانت العزلة البكتيرية P12 المعزولة من التهاب القرنية الافضل حيث اعطت اكبر منطقة تحلل 22) مليمترا( . في حين ان نتائج الكشف عن قابلية هذه العزلات البكتيرية على انتاج هذا الانزيم باستعمال وسط مرق الكازئين (Casein broth) , بينت ان العزلات البكتيرية المعزولة جميعها من مرضى التهاب القرنية كانت ذات فعالية انزيمية وكانت العزلة البكتيرية P12 هي الافضل من حيث الفعالية الانزيمية اذ بلغت الفعالية النوعية للانزيم 97.469) وحدة / مليغرام( . بينما اظهرت %50 من العزلات البكتيرية المعزولة من الجروح فعالية انزيمية. اشارت نتائج قابلية العزلات البكتيرية على انتاج انزيم LasA الى ان العزلات البكتيرية المعزولة جميعها من التهاب القرنية ومن الجروح لها القابلية على انتاج الانزيم, واظهرت العزلة البكتيرية P6 المعزولة من التهاب القرنية اعلى فعالية اذ بلغت 25.94) وحدة / مليغرام (. اما نتائج الكشف عن قابلية العزلات البكتيرية على انتاج انزيم LasD فقد اظهرت ان 8 عزلات بكتيرية (% 61.5) من العزلات البكتيرية المعزولة من التهاب القرنية ذات فعالية انزيمية بلغت ذروتها في العزلة البكتيرية P11 100.465) وحدة / مليغرام ( . و3 عزلات بكتيرية (%75) من العزلات البكتيرية المعزولة من الجروح اعطت فعالية لهذا الانزيم ولكن واطئة جدا تراوحت ما بين 8.797 - 5.557) وحدة / مليغرام(.استخلص انزيمي البروتيز القاعدي ( من العزلة البكتيرية P12 ) وLasA ( من العزلة البكتيرية P6 ) بوساطة النبذ المركزي المبرد للمزروع البكتيري وتمت تنقيتهما جزئيا باستعمال الترسيب بكبريتات الامونيوم (بنسبة اشباع % 80 ) وكروماتوغرافيا التبادل الايوني باستخدام عمود DEAE - Cellulose , حيث ازدادت الفعالية النوعية للانزيمين وبلغت ( 1629.62 وحدة / مليغرام) لانزيم البروتيز القاعدي و( 718.651وحدة / مليغرام ) لانزيم LasA . درس تاثير هذين الانزيمين المنقيين جزئيا في قرنيات عيون الارانب (in vivu) كلا على حدة وبتراكيز مختلفة ( 10, 7, 5) وحدة / مليلتر ( للبروتيز القاعدي و5, 3, 1) وحدة / مليلتر (لانزيم LasA ) حيث اشارت النتائج الى وجود تا ثيرات واضحة لهما في قرنيات عيون الارانب حيث سبب انزيم البروتيز القاعدي عتمة من الدرجة الثالثة ) عتمة في ثلثي الى كل سطح القرنية و/ او انتفاخ متوسط (. اما انزيم LasA فقد سبب عتمة من الدرجة الثانية ) عتمة في ثلثي سطح القرنية و/او انتفاخ طفيف ( . كما درس تاثير هذين الانزيمين في مستخلص البروتينات لقرنيات عيـون الارانب (in vitro) باستعمال الترحيل الكهربائي بهلام متعدد الاكريل امايد, واظهرت النتائج حدوث تحلل وتمسخ تام لحزم بروتينات القرنية وعند الفعالية الانزيمية 10, 7, 5 ) وحدة / مليلتر( لانزيم البروتيز القاعدي وعند الفعالية الانزيمية 5, 3, 1 ) وحدة / مليلتر( لانزيم Las A. | The study is included the effects of proteases enzymes producing by Pseudomonas aeruginosa, which isolated from keratitis and wounds .two hundred samples were collected, 150 samples of them were keratitis and fifity samples were wounds.Seventeen isolates (8.5 %) were obtained and diagnosed as P. aeruginosa.13 isolates (8.7%) from keratitis and 4 isolates (8%) from wound swabs. All bacterial isolates were diagnosed by biochemical tests. The production of elastase were tested by using elastin agar.Thirteen isolates (76.5%) had the ability to producing elastase (10 isolates (76.9 %) from keratitis and 3 isolates (75%) from wounds). The isolates P7 and P11from keratitis and P2 from wounds had the larger hydrolysis Zone ( 10, 10, 8 millimetre ) respectively.The production of alkaline protease were tested by using solid cultures ( skim milk agar ), all of them (keratitis and wound swabs ) had the ability to production of the enzyme, the isolates P12 isolated from keratitis had the larger hydrolysis zone ( 22 millimetre). Also the production of the enzyme were tested in liquid cultures ( casein broth ), all isolates from keratitis had the ability to production of the enzyme, the isolates P12 had the specific activity 97.469 U / mg, while 50 % of the wounds isolates had the ability to producing alkaline protease. The production of LasA enzyme were tested, all isolates (keratitis and wound swabs ) had the ability to production of the enzyme, the isolates P6 isolated from keratitis had higher specific activity 25.94 U / mg.The production of LasD enzyme were tested,8 isolates (61.5 %) from keratitis isolates had the ability to producing LasD enzyme. The isolate P11 had higher specific activity 100.465 U / mg, while 3 isolates (75 %) from wounds isolates had lower ability to producing LasD enzyme including between ( 5.557 - 8.747 U / mg). The alkaline protease was extracted from P12 isolate and LasA enzyme was extracted from P6 isolate. The enzymes were extracted by cooling centrifuge and them purified partially by precipitation with ammonium sulphate ( 80 % ) and ion exchange chromatography by DEAE - Cellulose the specific activity for enzymes were increased,which reached and 1629.62 U / mg for alkaline protease enzyme and 718.651 U / mg for LasA enzyme. The results of the enjection of alkaline protease and LasA enzyme in eyes corneal rabbits (in vivu) showed that both enzymes had the obvious effect on the cornea. The alkaline protease (5, 7, 10 U / ml ) caused damage for the cornea grade III melting ( two - thirds to all of the corneal surface ) and / or moderate bulging. Also the LasA enzyme ( 1, 3, 5 U / ml ) caused damage for the cornea grade II melting ( one - thirds to two - thirds of the corneal surface) and / or mild bulging.The protein profile of extract corneal proteins treated with alkaline protease ( 5, 7, 10 unit / ml) and LasA enzyme ( 1, 3, 5 unit / ml) (in vitro) by polyacrylamide gel electrophoresis showed hydrolysis and complete denaturation of corneal proteins bands.

انتاج وتنقية وتوصيف البلانتريسين من سلالات محلية لبكتريا Lactobacillus plantarum == Production, Purification and Characterization of Plantaricin from Local Strains of Lactobacillus plantarum

Author name: ولاء شوكت علي
Supervisor name: رشيد محجوب مصلح
General topic: Biology
Specific topic: Microbiology - Bacteria
Degree: Doctorate
University: University of Baghdad
Language: Arabic
University location: Baghdad
First pages:
Abstract: تم الحصول على 118 عزلة تعود لجنس عصيات الحليب Lactobacillus من الخضر المتخمرة والعجائن الحامضية، واخضعت جميع هذه العزلات للفحوصات الزرعية والمجهرية فضلا عن الفحوصات الكيموحيوية بغية تشخيصها حتى النوع واظهرت النتائج ان 73 عزلة منها تعود للنوع Lactobacillus plantarum ، منها 48 عزلة من الخضر المتخمرة و25 عزلة من العجائن الحامضية، وكانت هذه البكتريا سائدة في الخضر المتخمرة اذ بلغت نسبة عزلها 73.85% بينما بلغت نسبتها في العجائن الحامضية 47.17% . تم التحري عن قابلية عزلات بكترياLb.plantarum على انتاج البلانتريسين باستخدام 3 طرائق هي : الاشرطة المتقاطعة(flip - streak method) والتنقيط (spot on the lawn method) والانتشار بالحفر(well diffusion method) ضد 12 نوعا من البكتريا الموجبة والسالبة لصبغة غرام والمتضمنة : Staphylococcus aureus وStaphylococcus epidermidis وListeria monocytogenes وEnterococcus feacalis وLactobacillus acidophilusو Bacillus spp. وPseudomonas aeruginosa وPseudomonas fluorescens وSerratia marcescens وSalmonella typhi و. Klebsiella sppو Escherichia coli. واظهرت النتائج ان 8 عزلات كانت منتجة للبلانتريسين بطريقة flip - streak و7 عزلات كانت منتجة له بطريقة spot on the lawn بينما استطاعت 12 عزلة من انتاجه بطريقة الانتشار بالحفر،مما يدل على ان انتاج البلانتريسين في الاوساط السائلة كان افضل من انتاجه في الاوساط الصلبة،وعدت طريقة الانتشار بالحفر هي الافضل في التحري عن انتاج البلانتريسين. اظهرت البلانتريسينات المنتجة من عزلات Lb.plantarum فعالية عالية ضد P. aeruginosa عندما ابدت 83.3% من هذه العزلات فعاليتها التثبيطية ضد هذه البكتريا بينما اظهرت 16.7% فقط من هذه العزلات تاثيرها التثبيطي ضد بكتريا Lb. acidophilus ولم تبد اية عزلة من عزلات Lb.plantarum اية فعالية تثبيطية ضد بكتريا Bacillus spp. ، هذا وكانت العزلة Lb.plantarumVGW8 هي الافضل في انتاج البلانتريسين اذ تمكنت من انتاجه في الاوساط الصلبة والسائلة بالطرائق الثلاثة اعلاه، فضلا عن فعاليتها التثبيطية العالية تجاه 10 انواع من البكتريا الموجبة والسالبة لصبغة غرام. هذا وقد حددت الظروف المثلى لانتاج البلانتريسين من العزلة VGW8 Lb.plantarum واظهرت النتائج ان الوسط الامثل للانتاج كان الوسط المحضر مختبريا في هذه الدراسة والذي اطلق عليه وسط الانتاج السائل ورمز له (PLM) المتكون من 2% كلوكوز و2% ببتون و1.5% مستخلص الخميرة و1.5% مستخلص اللحم و0.25% من ملح K2HPO4 و0.5% من مادة tween 80 ،برقم هيدروجيني(pH) 5 وبدرجة حرارة30 م وبحجم لقاح 2% من المزروع البكتيري الذي يحتوي على 1×109 خلية /مل ولمدة حضانة 12 ساعة في ظروف لاهوائية. تمت في هذه الدراسة ايضا تنقية البلانتريسين اذ سخن المستخلص الخام للبلانتريسين بدرجة 80 م لمدة 10 دقائق قبل البدء بالتنقية والتي تضمنت خطوتين الاولى هي الاستخلاص بالمذيب العضوي (البيوتانول) والثانية الفصل بطريقة كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام عمود (Sepharose 6B). وقد اظهرت النتائج الحصول على البلانتريسين بفعالية نوعية 10666.67 وحدة/ملغم بروتين وبعدد مرات تنقية بلغ 13.067 وبحصيلة نهائية 12%.اطلق على البلانتريسين النقي اسم بلانتريسين VGW8 نسبة الى العزلة المنتجة Lb.plantarumVGW8 .كذلك فقد تم توصيف البلانتريسين المنقى VGW8 واظهرت النتائج ان وزنه الجزيئي كان 14400 دالتون بطريقة الترحيل الكهربائي بوجود المادة الماسخةsodium dodecyl sulfate(SDS) . واظهرت فعالية البلانتريسين النقي ثباتية عالية في قيم من الرقم الهيدروجيني(pH) تراوحت ما بين 3 الى 9 ،اذ احتفظ بكامل فعاليته عند تلك القيم لكنه فقد نصف فعاليته في pH( 2 و10) وكامل فعاليته في pH القاعدي (11 و12).كما اظهرالبلانتريسين ثباتية عالية تجاه المعاملات الحرارية المختلفة (20 - 100) م لمدد زمنية مختلفة شملت (10 و30 و60) دقيقة ويلاحظ من النتائج انه في الوقت الذي تمكن فيه البلانتريسين من الاحتفاظ بكامل فعاليته عند المعاملات الحرارية المختلفة (20 - 80 ) م للمدد الزمنية اعلاه، لم يتمكن من استرداد سوى نصف الفعالية عند تعرضه لدرجة حرارة 100 م لمدة 60 دقيقة او عند تعرضه لدرجة حرارة المؤصدة (121 م) لمدة 15 دقيقة. كما بينت النتائج طبيعة البلانتريسين البروتينية عندما فقد كامل فعاليته بعد معاملته بالانزيمات الحالة للبروتين ( ببسين وتربسين وبابين) في حين لم تتاثر فعاليته عند معاملته بالانزيمات (لايبيز والفا - اميليز ولايسوزايم).كذلك فقد اظهر البلانتريسين ثباتية عالية بعد معاملته بالمذيبات العضوية(كلوروفورم واسيتونايترل وداياثيل ايثر وايثانول وميثانول وايزوبروبانول وتولوين واثيل اسيتيت)، والمنظفات (توين80 وتوين20 وترايتون اكس100و EDTA ويورياو SDS) ، وبعض الايونات الفلزية (الصوديوم والبوتاسيوم والكاليسيوم والباريوم والزنك والحديد) حيث استعاد كامل فعاليته بعد معاملته بها لكن فعاليته انخفضت الى النصف بوجود ايوني المغنيسيوم والمنغنيز.تمت ايضا دراسة فعالية البلانتريسين VGW8 ضد P.aeruginosa وS.aureus واظهرت النتائج ان البلانتريسين يمتلك الفعالية القاتلة للبكتريا عندما انخفضت اعداد البكتريا مع زيادة تركيز البلانتريسين الى 320 وحدة /مل، فقد اظهرت النتائج ان هذا التركيز كان كافيا لقتل بكتريا P.aeruginosa بعد ساعتين من التعرض للبلانتريسين ولقتل بكتريا S.aureus بعد اربع ساعات من التعرض له. ايضا فقد تمت دراسة الفعالية التحللية للبلانتريسين VGW8 واوضحت النتائج انه يمتلك الفعالية الحالة للغشاء الخلوي عندما انخفضت الامتصاصية الضوئية عند الطول الموجي 600 نانوميترمن 0.59 الى 0.17 لبكتريا P.aeruginosa بعد ساعتين فقط من التعرض للبلانتريسين وبتركيز 320 وحدة/مل ، ومن 0.51 الى 0.20 لبكتريا S.aureus بعد 4 ساعات من التعرض للبلانتريسين وبالتركيز نفسه(320 وحدة/مل).وتمت ايضا دراسة تاثير البلانتريسين VGW8 على نفاذية الخلية وبينت النتائج ان الامتصاصية الضوئية عند الطول الموجي 260 نانوميتر قد سجلت زيادة من 0.5213 الى 2.9112 لبكتريا P.aeruginosa ومن0.4614 الى 2.6405 لبكتريا S.aureusدليلا على خروج الحامض النووي (DNA) من الخلايا نتيجة لتحللها.يتضح من هذه النتائج ان هدف البلانتريسين VGW8 هو الغشاء الخلوي. | A total of 118 isolates of Lactobacillus were obtained from fermented vegetables and sourdoughs. All the isolates were subjected to the cultural, microscopical and biochemical examinations for the identification of species. The results showed that 73 isolates belongs to Lactobacillus plantarum, 48 isolates from fermented vegetables and 25 isolates from sourdoughs. Lb. plantarum was dominate in fermented vegetables with 73.85% percentage of isolation while in sourdoughs the percentage of isolation was 47.17%.Three methods (flip - streak, spot on the lawn and agar well diffusion methods) were used to detect of plantaricin production by Lb. plantarum isolates against 12 species of Gram positive and Gram negative bacteria which included, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Listeria monocytogenes, Enterococcus feacalis, Lactobacillus acidophilus, Bacillus spp., Escherichia coli, Salmonella typhi, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Serratia marcescens and Klebsiella spp. The results showed that 8 isolates produced plantaricin by flip - streak method, 7 isolates produced it by spot on the lawn method, while by the agar well diffusion method ,12 isolates were able to produce plantaricin, suggesting that the production of plantaricin was best in the broth medium than in the solid medium. The agar well diffusion method was considered the best one for detection of plantaricin production. Plantaricins of Lb. plantarum isolates exhibited high activity against P. aeruginosa when 83.3% of Lb. plantarum isolates showed antibacterial activity against this bacterium, whereas the lowest activity was against Lb. acidophilus when 16.7% of Lb. plantarum isolates showed antibacterial activity against it. No activity against Bacillus spp. was observed.Lb. plantarum VGW8, was the best isolate for plantaricin production. It produced it in both broth and solid media by all detection methods used in this study, this plantaricin exhibited a broad spectrum of activity against 10 species of both Gram positive and Gram negative bacteria. The optimum conditions for plantaricin production by Lb. plantarum VGW8 were determined and the results showed that the best production medium was production liquid medium (PLM) that prepared in this study, it composed of 2% glucose, 2% peptone, 1.5% yeast extract, 1.5% beef extract, 0.25% K2HPO4 and 0.5% tween 80,with pH 5, temperature 30°C for 12 hours under anaerobic conditions and inoculum size of 2% of cells number 1×109cell/ml.Purification of plantaricinVGW8 was made by heating crude plantaricin at 80ºC/10min and then purified by two steps method including extraction with n - butanol followed by gel filtration chromatography on Sepharose 6B column, the results showed that the specific activity was 10666.67AU/mg protein with 13.067purification folds and 12% recovery yield. The purified plantaricin was called plantaricin VGW8 according to the producer isolate Lb. plantarum VGW8.Physical characteristics were also studied and the results showed that the molecular weight of plantaricin VGW8 was 14400 Dalton by sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis (SDS - PAGE). Plantaricin VGW8 activity was stable at pH values (3 - 9) but 50% of its activity was lost at (2 and 10) pH values, and whole activity was lost at extreme alkali pH values(11 and 12).Also, plantaricin VGW8 showed high thermostability at different temperatures (20 - 100)°C for (10,30 and 60)min, it remained active after being treated with (20 - 80)°C for the periods above, but it retained only 50% of its activity after treatment at 100°C for one hour and autoclaving treatment (121°C/ 15 min).The results showed that the activity of plantaricin VGW8 disappeared when it treated with proteolytic enzymes (pepsin, trypsin and papain), whereas it retained whole activity when treated with lipase, lysozyme and α - amylase, indicating pure proteinaceous nature of purified plantaricin.As well as, treatment of plantaricin VGW8 with organic solvents (chloroform, acetonitrile, diethyl ether, ethanol, methanol, isopropanol, toluene and ethyl acetate), surfactants (tween 80, tween 20, triton X - 100, SDS, EDTA and urea) and the metal ions : Na, K, Ca, Ba, Zn and Fe, showed no effect of these treatments on the activity of plantaricin VGW8.While treatment with Mn and Mg reduced its activity to the half.The antibacterial activity of plantaricin VGW8 was studied against P. aeruginosa and S.aureus. It was observed that plantaricin VGW8 has bactericidal effect when the numbers of cells were decreased with increasing of plantaricin VGW8 concentration to 320 AU/ml. The results showed that the complete killing of P. aeruginosa was observed after 2 hours of incubation with 320 AU/ml of plantaricin VGW8, while the same effect was observed after 4 hours on S.aureus. Also, the lytic activity of plantaricin VGW8 was studied, and the results showed that exposure P. aeruginosa and S.aureus to 320 AU/ml of plantaricin VGW8 led to decrease absorbance at 600nm from 0.59 to 0.17 for P. aeruginosa within 2 hours and from 0.51 to 0.20 for S.aureus within 4 hours. Moreover, the effect of plantaricin VGW8 on the cell permeability was studied and the results showed that absorbance at 260nm increased from 0.5213 to 2.9112 for P. aeruginosa and from 0.4614 to 2.6405 for S.aureus, indicating that DNA leaked from cells due to the cell lysis. This means that the cell membrane is the target of plantaricin VGW8.
1 ... 303 304 305 306 307 ... 465