عرض: 25 50 75 100 النتائج

نتائج البحث: 25 من أصل 1,202

المعالجة النباتية لعنصري الرصاص والنحاس باستعمال نبات عصا الراعي Polygonum sp.مختبريا == Phytoremediation of lead and copper elements a by polygonum sp. Plant in Laboratory

اسم المؤلف: رواء حسان محمد عبد الله
اسم المشرف: عبد الرحمن عبد الجبار الكبيسي
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2016
الموضوع الدقيق: النبات
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: اجريت هذه الدراسة للتعرف على دور نبات عصا الراعيPolygonum sp. في ازالة بعض العناصر الثقيلة من المياه ، وقد استعملت تراكيز مختلفة من عنصري النحاس والرصاص بصورة منفردة وهي ( 10 ، 20 ، 30 ) ppm ، ولمدة تسعة ايام لكل تركيز, وقدرت كفاءة النبات في ازالة العناصر الثقيلة من المياه كنسب مئوية للازالة في الساق والاوراق. بينت النتائج ان النبات له القابلية على تراكم عنصري الرصاص والنحاس في الساق والاوراق بكميات كبيرة. وكان للاوراق القابلية على تراكم العناصر الثقيلة اكثر مما هي عليه في الساق حيث ان الورقة هي المكان الاخير الذي تنتقل اليه العناصر . وجدت فروق معنوية لكل من الاوراق والساق لكلا العنصرين عند مستوى احتمالية P≤0.05، فقد وجدت فروق معنوية بين العنصرين في اغلب التراكيز المدروسة خلال مدة التجربة. اظهر النبات نسب ازالة مئوية مرتفعة لعنصر النحاس وكانت بين (32.02 - 87.01) % وهي كالاتي : - 49.35) ،80.97،87.01)% للتراكيز المدروسة بعد مرور تسعة ايام على التجربة على التوالي ، بينما تراوحت نسب ازالة عنصر الرصاص بين 71.41)%97.85 - ) % وهي كالاتي : (97.85 ، 96.71 ، 92.93 ) % للتراكيز المدروسة على التوالي بعد مرور تسعة ايام من التجربة ، وتم قياس نسبة تركيز العناصر بعد (6 - 3 و9) ايام من التجربة . بينت النتائج ان النسبة المئوية لازالة عنصر الرصاص اعلى من النسبة المئوية لازالة عنصر النحاس ،لكن عنصر النحاس تاثيراته المظهرية على النبات اسرع من عنصر الرصاص، اذ بدات الاوراق بالذبول عند المعاملة بعنصر النحاس اسرع مما هو عليه عند المعاملة بالرصاص . | The present study was carried out to determine the ability of Polygonum SP. for removing of heavy element from water. Different concentrations of Copper and Lead (10, 20 and30) ppm were used for nine days to each concentration. The plant efficiency in removing heavy element from water was estimated as percentage removal ratios in stem and leaves. Results were showed that the plant can accumulate copper and lead in stem and leaves in large amounts. leaves ability to accumulate heavy element was more than stem. Significant differences were found between stem and leaves for both elements in probability level P≤0.05, as well as between both elements for almost concentrations during experiments. Polygonum sp. showed high removal percent ratio of Copper which were ranged between 32.02 - 87.01% as follows : 49.35 , 80.97 and 87.01 for the studied concentrations, respectively, after nine days. While the removal ratios of Lead were ranged between 97.85 - 71.41 as follows : 97.85, 96.71, and 92.93 for studied concentrations after (3,6,9) day. Results were showed the percentage removal to Lead more than Copper,but Copper was more affect on morphology for plant than Lead, the leaves start shriveling when they were treated with Copper and faster than those treated with Lead.

تاثير سلالات محلية مختارة لبكتريا Bacillus thuringiensis في الاداء الحياتي لبعوض Culex pipiens pipiens (Diptera : Culicidae) == Effects of Selected local strains of Bacillus thuringiensis on biological aspects of Culex pipiens pipiens (Diptera : Culicidae)

اسم المؤلف: دعاء حقي اسماعيل الحوراني
اسم المشرف: عماد احمد محمود | حسام الدين عبد الله محمد
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2015
الموضوع الدقيق: الحيوان
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: اجريت هذه الدراسة في كلية العلوم للبنات - جامعة بغداد وللفترة من 1/11/2013 لغاية 1/4/ 2015 لبيان تاثير بكتريا Bacillus thuringiensis المعزولة محليا من ترب العراق على الادوار المختلفة لبعوض Culex pipiens pipiens وبواقع ثلاث تراكيز لكل عزلة . اختبرت عزلة محافظة الانبار BtAN بالتراكيز ( 101x7.35 , 102x7.35 , 105x7.35 ) ml/CFU وعزلة محافظة السليمانية بالتراكيز BtSU (101x5.6 , 102x5.6 , 105x5.6) ml/CFU وعزلة محافظة بغداد BtBAبالتراكيز (101x3.56, 102x3.56 , (105x3.56 ml/CFU ومقارنتها بالعزلة القياسية العالمية Bacillus thuringiensis israelensis وبثلاث تراكيز ايضا ( 101x4.85 , 102x4.85, 105x4.85) ml/CFU .1 - اظهرت نتائج تجربة هذ العزل وبالتراكيز المختارة عدم وجود فروق معنوية في نسبة فقس البيض بكتريا.2 - اظهرت نتائج تاثير هذه العزل البكتيرية وبالتراكيز المشار اليها في اعلاه على الدور اليرقي لبعوض C.pipiens pipiens تفوقت العزلة القياسية العالمية Bti التي اعطت نسب هلاك 100% مقارنة بالعزلات المحلية والتي اظهرت النتائج تفوق عزلة الانبارBtAN بنسبة هلاك 65% بتركيز 105x7.35 ml/CFU تليها عزلة السليمانية BtSUبنسبة هلاك 50% بتركيز 105x5.6 ml/CFU بينما لم تعطي عزلة بغداد BtBAاي نسبة هلاك .3 - اظهرت نتائج تجربة تاثير بكتريا Bt على الدور العذري فاوضحت ان العزلة القياسية العالمية Bti اعطت نسبة هلاك 80% بتركيز 105x4.85 ml/CFU مقارنة بالعزلة المحلية السليمانية BtSU التي اعطت نسبة هلاك 45 % بتركيز 105x5.6 ml/CFU بينما بلغت نسبة الهلاك في عزلة الانبار BtAN 30% بتركيز 105x7.35 ml/CFU .4 - اخيرا اوضحت نتائج تجربة تاثير هذه العزلات البكتيرية على بالغات بعوض C.pipiens pipiens ان نسب الهلاك كانت ضئيلة جدا حيث بلغت في العزلة القياسية Bti 13.3 % بتركيز 105x4.85 ml/CFU للاناث وبلغت في الذكور 6.66% لنفس التركيز , بينما بلغت نسبة الهلاك في الاناث لعزلة الانبار BtAN 10% بتركيز105x7.35 ml/CFU وبلغت نسبة الهلاك في الذكور 6.66% لنفس التركيز ,بينما بلغت نسبة الهلاك 10% للاناث و3.33% للذكور بتركيز 105x5.6 ml/CFU لعزلة السليمانية . | This study was acheived at the University of Baghdad, College of science for women, from 1/11/2013 to 1/3/2015, the effect of selected locally isolated Bacillus thuringiensis bacteria from Iraqi soil on some biological aspects of Culex pipiens pipiens. The study included different phases of Culex pipines pipines mosquito and in three concentrations for each isolate. The isolate of Al - Anbar province BtAN was tested using the concentrations (101x7.35 , 102x7.35 , 105x7.35)ml/CFU,while for Al - Sulaymaniyah isolate BtSU in the concentrations (101x5.6 , 102x5.6 , 105x5.6)ml/CFU and Baghdad isolate BtBA was in the concentrations (101x3.56, 102x3.56,105x3.56,)ml/CFU, and all were compared with three concentrations of the universal standard isolate Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) ) 101x4.85 , 102x4.85, 105x4.85) ML/CFU .The experimental results have shown that there were no differences in the rate of egg hatching for all the isolates of Bt bacteria.The results also showed that the effect of Bt bacteria on the defferent larval phases on C.pipiens.pipiens mosquito, resulted in the the superiority of mortality rate of the universal standard isolate Bti to give 100% . As compared with the local ones, this showed that rate of mortality of BtAN isolate was 65% in concentration 7.35x105 ml/CFU , then BtSU isolate 50% in concentration 5.6x105 ml/CFU, whereas Baghdad isolate did not show any mortality rate.The results of the effect of the Bt bacteria on the pupal phases of the C.pipiens.pipiens mosquito, have shown that the rate of mortality of using the universal standard isolate Bti was 80% in concentration 4.85x105 ml/CFU. As compared with the local ones,where the results was 45% rate of mortality for Al - Sulaymaniyah isolate in concentration 5.6x105 ml/CFU and 30% for Al - Anbar isolate in concentration 7.35x105 ml/CFU.The experimental results of the effect of the Bt bacteria on the adults of C.pipiens.pipiens mosquito, have shown the mortality rates were so low the rate of the universal standard isolate Bti was 13.3% for the females and 6.66% for the males in concentration 4.85x105 ml/CFU, whereas the mortality rate of Al - Anbar isolate was 10% for the females and 6.66% for the males in concentration 7.35x105, and as for the mortality rate of Al - Sulaymaniyah isolate, it was 10% for the females and 3.33% for the males in concentration 5.6x105 ml/CFU

تاثير المستخلصات التربينية والقلوانية والفلافونويدية الخام لاوراق نبات البمبر Cordia myxaفي بعض جوانب الاداء الحياتي لثاقبة الحبوب الصغرى Rhyzopertha dominica (F.) (Coleoptera : Bostrichidae) == Effect of crude Terpenoid, Alkaloid and Flavonoid Extracts of Cordia myxa leaves on some biological aspects of lesser grain borer Rhyzopertha dominica(F.) (Coleoptera : Bostrichidae)

اسم المؤلف: تبارك علي حسن الجبوري
اسم المشرف: تبارك علي حسن الجبوري
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2016
الموضوع الدقيق: الحيوان
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: An experimental study was conducted to evaluate the effect of AL - coholic extracts which includes terpenoids ,alkalines and flavonoides of Cordia myxa leaves on some biological aspect of lesser grain borer Rhyzopertha dominica ;including Eggs , fourth larval stage, pupal stage of 24 h age . and effect high concentration 8% of Alcoholic extract(Terpenoid,alkaloid and flavonoid) extracts on capability mating for treatment adults at 24 and 120 h ages. Also study the effect of Alcoholic extracts on the percentage of repellent ,and attraction by using Chemotropometer . Finally the effect of Alcholic extraction of percentage rice seed germination ( AL - Yasemean variety) has been evaluated. The resulted indicated; using 8% terpenoids extracts causing an increasing mortality in eggs to 93.33%, 86.66% in fourth larval stage and 63.33% in pupal stage of 24 h age, On the other hand 8% of extract has influencig on the rate of eggs production and hatch percentage of adult, So in 24 hrs ages, not production of eggs, has been observed ,by mating of treated male and female ,and also mating un treated male with treated female a lowest percentage of egg hatch 33.33% has been obtained in mating of treated male with un treated female in 24 and 120 hrs ages respectively, while, no eggs laying in case of mating un treated male with treated female.Using alkaline extracts of 8% , the study has been shown clear effect of failed in eggs hatching, and increased in mortality rate for fourth larval stage 93.3% ,while the effect of pupal stage to 66.66% for 24h age.White the effect of extract at 8% concentration for treatment adults ,no eggs laying when mating occur between treated male with treated female , and mating between un treated male with female of 24ages. A lower percentage of 25% hatching was recorded in mating treated male with un treated female .In 120hrs age, the rate of eggs production was zero when mating, treated male with treated female . as well as , a lowest percentage of eggs hatching was zero% showing , when mating between un treated male and treated female.In the same maner the study has been indicated clear effect for flavonoids extracts in life aspect of insect, therefore the higher percentage 86.6% of mortality in eggs in concentration 8%, in the same concentration gave 56.66% mortality of treated fourth larval stage ,also percentage mortality for pupal stage 43.3% at age 24h. Adult treatment with higher concentration 8% has influence effect one rate of eggs and their hatching in case of mating un treated male with treated female in two ages (24 - 120 hrs), this rate leads to decrease the average of age for male and female and the average number of egg that laying by treatment female was 0%. The results were showed that effect of AL - coholic extracts of the Cordia myxa in repellent and attraction , so the attract was 0% for all extracts and concentration. The higher percentage of repellent was 40% recorded by using terpenoids extracts in concentration of 8%, followed by alkaline extracts at the same concentration reach to 20% , in other hand there was no any percentage of repellent for flavonoids extract. Finally terpenoids ,flavonoids and alkalines extraction in concentration 4% ,6% has no effect on rice seed germination.

تاثير المستخلص المائي الحار لبذور واوراق نبات الحلبة (Trigonella foenum - graecum) في مبايض وارحام الفئران البيض السويسرية واجنتها == Effect of The Hot Aqueous Extract of Fenugreek Seeds and Leaves (Trigonella foenum - graecum )on Ovaries , Uterus of Swiss Albino Mice and their Embryos

اسم المؤلف: تارا اسو طاهر عزيز
اسم المشرف: محمد عبد الهادي غالي
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2016
الموضوع الدقيق: الحيوان
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: اجريت هذه الدراسة للتعرف على مدى تاثير المستخلص المائي الحار لبذور واوراق نبات الحلبة Trigonella foenum - graecum)) على الفئران الحوامل المجرعة فمويا وبالتراكيز (100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم وذلك بعد مدد ( 4 , 8 , 12 ) يوم من بدء الحمل . اظهرت هذه الدراسة ان المستخلص المائي الحار لاوراق نبات الحلبة وبالتراكيز (100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم لم تظهر تاثيرا على الفئران الحوامل اذ ان الفئران المجرعة ولدت ولادات طبيعية ولم يحدث لها اجهاض في اثناء مدة الحمل , فضلا عن عدم وجود فروق معنوية في معدل اوزان واطوال الاجنة عند مستوى ( P < 0.05 ) بعد مقارنتها مع مجموعة السيطرة . في حين اظهر المستخلص المائي الحار لبذور الحلبة وبالتراكيز ( 100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم تاثيرا على الفئران الحوامل من خلال تسببه في اجهاض الفئران الحوامل بعد مدد ( 4 , 8 , 12 ) يوم من بدء الحمل, كما سجل حدوث انخفاض معنوي في معدل اوزان واطوال الاجنة عند مستوى ( P < 0.05 ) مقارنة بافراد مجموعة السيطرة وسجلت النتائج وجود انخفاض معنوي عند مستوى ( P < 0.05 ) في اعداد واقطار الجسم الاصفر بعد المعاملة بالمستخلص المائي الحار لبذور نبات الحلبة للتراكيز ( 100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم وبعد مدد ( 4 , 8 , 12 ) يوم من بدء الحمل, في حين لم يلحظ وجود اي فرق معنوي عند مستوى ( P < 0.05 ) في اعداد الجريبات المبيضية ( الجريبات الاولية - الجريبات الثانوية - جريبة كراف ) وكانت الجريبات المبيضية سليمة من الناحية النسجية بعد معاملة الفئران الحوامل بالمستخلص المائي الحار لبذور الحلبة عند جميع التراكيزالسابقة وبعد مدد ( 4 , 8 , 12 ) يوم من بدء الحمل. اظهرت الدراسة عدم ظهور تشوهات مظهرية في الاجنة المجرعة امهاتها بالمستخلص المائي الحار لبذور او اوراق نبات الحلبة وبالتراكيز ( 100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم اذ بدت جميع الاجنة طبيعية من الناحية المظهرية . شارت النتائج الى وجود تغيرات نسجية غير طبيعية في المبايض وارحام الفئران الحوامل المجرعة بالمستخلص المائي الحار لبذور الحلبة وبالتراكيز ( 100 , 200 , 300 ) ملغم / كغم وبعد مدد ( 4 , 8 , 12 ) يوم من بدء الحمل تضمنت توسع واحتقان وتمزق ونزف في الاوعية الدموية بالاضافة الى حدوث تنخر وو ذمة . وهذه النتائج توضح عدم وجود خطورة على الاجنة المتناولة امهاتها اوراق الحلبة ضمن التراكيز والمدد المشار اليها في حين تشكل البذور وبنفس التراكيز خطورة على بقاء الاجنة . | This study was designed to investigate the effect of hot aqueous extract of the seeds and fenugreek leaves of (Trigonella foenum - graecum) on pregnant mice by orally administered at doses (100 , 200 , 300) mg / kg and after periods (4 , 8 ,12 ) days from the beginning of pregnancy. This study shows that the hot aqueous extract leaves of fenugreek show no effect in the pregnant mice and born natural embryo and abortion did not happen to them during the periods of pregnancy. also the results of the study show that there was no significant differences in the weights and embryos lengths at the rate of ( P <0.05) compared with the control group. The study also show that the hot aqueous extract fenugreek seeds of doeses (100 , 200, 300) mg /kg influence at the pregnant mice by causing abortion to the pregnant mice after the periods (4 , 8 , 12) days from the beginning of pregnancy . The average of weight and length of embryo showed a significant decrease at the rate of ( P <0.05) compared with the control group. The results also show a significant decrease at (P <0.05) in the average of numbers and diameters of corpus luteum after treatment with hot aqueous extract fenugreek seeds by the doses (100 , 200 , 300 ) mg / kg after the periods ( 4 , 8, 12 ) days from the beginning of pregnancy . The study show that there was no significant difference in the average numbers of ovarian follicles ( Primary follicles - Secondary follicles - Graffian follicles ) at (P <0.05) after treatment with hot aqueous extract fenugreek seeds . After treating the pregnant mice with the doses (100 , 200 , 300) mg / kg after the periods ( 4 , 8, 12 ) days from the beginning of pregnancy there was no histopathology change in the ovarian follicles. The study show no malformation appearance of embryos when treating pregnant mice with the hot aqueous extract of the seeds and fenugreek leaves in different doses (100 , 200 , 300) mg / kg , during the period ( 4 , 8 , 12) days from the beginning of pregnancy. There are also histopathological changes in the ovary , uterus by the doses (100 , 200 , 300 ) mg / kg after period of pregnancy ( 4, 8 , 12 ) days from the beginning of pregnancy , included vasodilatation , congestion and rupture in blood vessels that caused hemorrhage , necrosis , odema at using doses of hot aqueous extract fenugreek seeds . The results of this study indicate that the use of fenugreek leaves is safe and does not cause abortion of pregnant mothers. The fenugreek seeds are harmful to pregnant mothers because they caused abortion to the fetuses.

دراسة العلاقة بين بعض المؤشرات المناعية وشدة المرض عند المصابين بالربو الارجي == Study of the relationship between some immunological markers and disease severity in allergic asthma patients

اسم المؤلف: یاسر باسم عبد الوهاب
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2007
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: This study was conducted to support the investigations of probable immunological changes in asthmatic patients and to study the relationship between some immunological markers and the clinically estimated asthma severity in order to find the more correlated immunological marker with asthma severity. This study involved 61 patients of both genders ( ٤٦ female and 15 male) of age varied between 13 to 53 years from recently diagnosed cases that arrived to the allergy institute of Baghdad or from steroids and other antiinflammatory therapy ceased patients and for a period that allow to carry out study tests without effecting the results, In addition to control group which consisted of 23 apparently healthy individuals.Skin test analysis of ten allergens showed a significant differences between asthma patients and healthy controls in rate of positive reactivity for at least one tested molds or grass allergens where they attained 43.1 % and 35.3% in patients’ group respectively, results also revealed that there was a significant differences in rate of reactivity for M4 allergen only with difference in asthma severity.Total and specific serum IgE were assessed by the Enzyme Linked Immunosorbent assay (ELISA). The geometric mean of serum total IgE was significantly higher in asthmatics than healthy controls, Another Significant elevation was revealed in asthmatics as compared to control in the rate of 100 IU/ml overlapped serum total IgE individuals, this rate also showed significant difference among the different categories of asthma severity. 83 IU/ml was suggested as a typical cut off value that differentiates asthmatic patients from healthy individuals.From other side, estimation of serum specific IgE for 10 allergens demonstrated significant differences in I203 allergen specific IgE levels in addition to specific IgE for food allergens (F25, F27, F33, F35 and F81) between asthmatics and healthy controls. Its ought to mention that specific IgE for food allergens (F25, F27 and F33) also recorded significant differences by difference in asthma severity which may refer actual effect for some food allergens in asthma pathogenesis .The results didn’t document any significant difference in levels of other immunoglobulins IgM, IgG, and IgA and complement component C4 in serum between asthmatic patients and control group, Whereas a significant elevation was documented in serum C3 level of asthmatics as compared to healthy controls which supports the studies that refered some complement component role in asthma pathogenesis. From other side, this study didn’t observe any significant differences in the levels of those immunoglobulins with difference in asthma severity. Total and differential white blood cells were estimated during the study, the results showed a significant elevation in mean of total white blood cells, eosinophils and neutrophils numbers in asthmatics’ blood as compared to control, while there were no significant differences in association with remaining white blood cells. The relationship between asthma severity and white blood cells was also assessed, the results showed a significant difference in geometric mean of total white blood cells and also lymphocytes numbers in asthmatics’ blood and asthma severity.The data demonstrated that there was a significant elevation in level of eosinophil cationic protein (ECP) in asthmatics’ serum (median = 40 ng/ml) as compared with control group (median = 15.5 ng/ml) , it was also observed that elevation in serum ECP level proportionate significantly increasing of asthma severity. This study suggested that 29 ng/ml of serum ECP as a typical cut off value of statistically significant denotation for differentiation between asthmatic patients and healthy individuals. The ratio of serum eosinophil cationic protein to blood eosinophils was calculated in this study, Despite not attaining the significance level between patients’ group and controls as regards this ratio, results showed a significant elevation in ECP/Eo associated with increasing ofasthma severity among different categories. During the study of correlation among some immunological markers that adapted in many allergy centers as preliminary diagnostic tests for asthmatic patients especially the determination of total serum IgE level and blood eosinophils number, there was no significant correlation between total serum IgE level and asthma severity, correlation between blood eosinophils and asthma severity was also not significant too (r = 0.16 and 0.01 respectively). Contrary to the previous results, Statistical analysis showed a significant positive linear correlation between ECP level and also ECP/Eo ratio and clinically estimated asthma severity (r = 0.41 and 0.43 respectively, P<0.01).According to results the ratio 0.38 Pg/Cell suggested as a typical cut off value for diagnosing severe persistent asthma and 137.5 ng/ml of serum ECP concentration also suggested as a typical cut off value for differentiating severe persistent asthma cases from other less severe categories. According to the results, Determination of serum ECP can be considered as a diagnostic tool for differentiating asthma cases from not, besides it reflects asthma severity significantly, whereas calculation of ECP/Eo ratio may be an effective marker in reflecting asthma severity which may be useful in monitoring asthma cases and in determining the recovery of disease severity during therapy stages but it has no benefit for diagnosing asthma cases where no significant differences were recorded between asthmatics and healthy controls

مقارنة التاثيرات المرضية للببتيدوكلايكان المستخلص من Staphylococcus xylosus وعديد السكريد الشحمي للـ E. Coli == Comparative Pathogenicity of Peptidoglycan Extracted from Staphylococcus xylosus and Lipopolysaccharide Extracted E. coli

اسم المؤلف: هبة خليل توفيق
اسم المشرف: مي طالب فليح | حارث جبار فهد
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2007
الموضوع الدقيق: الاحياء المجهرية
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: من مجموع 150 عينة ادرار تم الحصول على 61 عزلة عائدة للجنس Staphylococcus , جمعت من مرضى مصابين بخمج المجاري البولية من مستشفيات الزعفرانية واليرموك للمدة من الاول من ايلول 2005 - الاول من كانون الثاني 2005 . تم التاكد من عائدية 10 عزلات للنوع S. xylosus وبنسبة عزل 16.3% من مجموع العنقوديات ، وقد تم تشخيصها بوساطة الاختبارات الكيموحيوية كما تم اختبار حساسيتها للمضادات الحيوية وتبين ان 8 عزلات كانت مقاومة للمضاد Erythromycin ، والعزلات جميعها حساسة للمضاد Ciprofloxacin . تم استخلاص الجدار الخلوي باستخدام طريقة التكسير بالحبيبات الزجاجية (Glass beads) وتم اجراء تنقية جزئية للببتيدوكلايكان من الجدار باستعمال مواد كيميائية مثل : SDS , EDTA , LiCL2 , CaCL2 والهضم بالانزيمات DNase , RNase , Trypsin , Pronase . ولغرض التاكد من جودة طريقة التنقية تم اجراء الرحلان الكهربائي بهلام متعدد الاكريل امايد تحت ظروف غير ماسخة فقد انخفض عدد الحزم البروتينية من 6 حزم في الجدار الخلوي الخام الى 4 حزم بعد التنقية . لقد اظهرت الدراسة الحالية التاثيرات الكيموحيوية السريرية للببتيدوكلايكان في مصل الارانب المحقونة عن طريق الزيادة الحاصلة في انزيمات الكبد والكلية ؛ اذ لوحظ زيادة معتدلة في كل من انزيمات : GoT وGpT وAlkaline phosphatase وكذلك Bilirubin ، والـ Urea ، والـ Creatinine ؛ مما يدل على حدوث خلل وظيفي في الكبد والكلية . تم دراسة امراضية مستخلص الببتيدوكلايكان للعزلة S.xylosus S24 (المقاومة لاكثر عدد من مضادات الحياة قيد الدراسة ) في الجهاز البولي للفئران البيض السويسرية الاناث اذ حقنت خمس مجاميع من الفئران بواقع ثلاثة مكررات لكل مجموعة عبر الاحليل باستخدام القثطرة بالتراكيز 1000000 ، 2000000 ، 3000000 ، 4000000 ، 5000000 نانوغرام / 1 مليلتر ، وحقنت خمس مجاميع اخرى بمستخلص قياسي للـ LPS من بكتريا E.coli بالتراكيز 10, 25, 50, 75, 100 نانوغرام/مليليتر ، وبعد مرور يومين من الحقن تم تشريح الفئران حيث اظهرت الاعضاء (الكلية) تغييرات نسيجية تمثلت : بانكماش الكبيبة الكلوية ، واحتقان الاوعية الدموية ، وارتشاح الخلايا الالتهابية وفي المثانة فقدان طبقة الكيراتين وحدوث التنكس الاستسقائي لخلايا الطبقة الظهارية في كلا المستخلصين ومن خلال موازنة هذه التغييرات المرضية النسيجية لكل من مستخلص الببتيدوكلايكان وعديد السكريد الشحمي اتضح ان مستخلص عديد السكريد الشحمي اكثر شدة وامراضية اذ بدات التاثيرات بتراكيز (50, 75, 100) نانوغرام/مليليتر اقل من تراكيز مستخلص الببتيدوكلايكان 3000000 ، 4000000 ، 5000000 نانوغرام / 1 مليلتر ، فضلا عن وجود تغييرات نسيجية اخرى حدثت في مستخلص عديد السكريد الشحمي وغير موجودة في مستخلص الببتيدوكلايكان. | Our of 150 urine specimens collected from patients presented with urinary tract infections attending Alza’farania and Alyarmoouk hospitals in Baghdad for the period of September , 1st 2005 to December, 1st 2005 , 61 staphylococci were obtained. Ten isolates (16 , 3%) were confirmed to be Staphylococcus xylosus identified by using of biochemical tests. Antibiotic susceptibility tests . however , 8 of them were resistant to erythromycin while all of them were sensitive to ciprofloxacin.The Crude cell wall was extracted by mechanical disintegration using glass beads and a partial purification was done to the peptidoglycan by means of chemicals such as SDS , EDTA , LiCl2 and CaCl2 in addition to enzymes like DNase , RNase , trypsin and pronase.In order to prove the efficiency of the purification method , polyacrylamide gel electrophoresis was achieved under undenaturing conditions as the proteins bands number was reduced from 8 in the crude extract to 4 bands at the final stage.The present study showed clinical biochemical effects of the peptidoglycan in sera of injected rabbits through the increase resulted in liver enzymes ad renal function tests represented by GOT , GPT , alkaline phosphatase , total serum bilirubin , urea and creatinin , an indication to a malfunction of liver and kidney.The pathogenicity of peptidoglycan extracted from S. xulosus S24 (the isolate that resist highest number of studied antibiotics) was studied in urinary tract of female Swiss mice by injecting five animal groups , as triplicates catheter at concentrations reached 1000000 , 2000000 , 3000000 , 4000000 and 5000000 ng / 1 ml , plus another five groups with 10 , 25 , 50 , 75 and 100 ng / ml of E. coli LPS. Two days later , animals were killed ; kidneys and urinary bladder were taken for histopathological study as they showed different pathological changes included shrinkage of glomerulus , congestion of blood vessels and infiltration of inflammatory cells in kidney , whereas dekeratinization and edematous dehydration of the epithelium were seen in urinary bladder.Passing through a comparison between these pathological changes in both extracts , LPS developed the highest severity and pathogenecity since the effects started with concentration (50 , 75 and 100 ng / ml) less than those was withpeptidoglycan (3000000 , 4000000 and 5000000 ng / 1 ml) in addition to the presence of some changes developed by LPS rather than peptidoglycan

التاثيرات السمية الوراثية الخلوية للازورين المنقى جزئيا من بكتريا Pseudomonas aeruginosa في الخلايا السرطانية والطبيعية == Cytogenotoxic Effects of Partial purified Azurin from Pseudomonas aerugi

اسم المؤلف: نهاد طه محمد جدوع
اسم المشرف: هيفاء هادي حساني
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: هدفت الدراسة الى الكشف عن قابلية الازورين المستخلص من بكتريا Pseudomanas aeruginosa في تثبيط الخلايا السرطانية ومدى تاثيره في الخلايا الطبيعية ولذا تم جمع 66 عزلة من بكتريا P.aeruginosa من مجموع 145 عينة سريرية( ادرار، ومسحات من الجروح والحروق ، ومسحات من الاذن ، والقشع ، والبراز). وقد شخصت البكتريا بالاعتماد على الفحوصات المجهرية والزرعية والكيموحيوية ، وتم التاكد من التشخيص باستخدام عدة Api 20 E. استخلص الازورين من العزلة Ps21 المعزولة من الادرار ثم قيس تركيزه باستخدام الطريقة المطلقة Absolute method وكان 916.33 مايكروغرام / مل ، بعد ذلك نقي الازورين جزئيا بوساطة كروموتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام هلام Sephadex G - 100 اذ امتدت قمة الازورين من الجزء رقم ( 24 - 33 ) ، وبلغ تركيزه بعد التنقية 550 مايكروغرام / مل. درس التاثير الوراثي الخلوي لمستخلص الازورين المنقى جزئيا في الخلايا اللمفاوية للانسان بدلالة معامل التحول الارومي BI والانقسام الخيطي MI وفحصت كروموسومات الخلايا المعامله به ، ولوحظ ان المستخلص بتراكيزه العالية سبب انخفاضا معنويا بقيمة BI وMI بينما التراكيز الواطئة لم تحدث فروق معنوية احصائيا عند المقارنة مع معاملة السيطرة ، كما انه لم يحدث اي تغير في تركيب وعدد الكروموسومات للخلايا اللمفاوية المعامله به. كما درس التاثير التثبيطي للمستخلص المنقى جزئيا في بعض الخطوط الخلوية السرطانية مثل خط خلايا سرطان الحنجرة البشريHep - 2 وخط خلايا سرطان الغدة اللبنية الفاري AMN - 3 فقد اظهر المستخلص فعالية تثبيطية عالية عند التراكيز العالية (125 ، 250 ) مايكروغرام / مل حسب هذه الدراسة ولاوقات التعريض جميعا ، في حين قل التاثير التثبيطي تدريجيا مع انخفاض التركيز المستعمل ، فقد اسهمت التراكيز الواطئة في تحفيز الخلايا على التضاعف والانقسام في هذين الخطين الخلوين وبنسب مختلفة قياسا بالسيطرة (100 % ) ، فخلايا ال Hep - 2 زادت حيويتها خلال مدة ال 24 ساعة الاولى من التعريض فقط في حين ان خلايا الAMN - 3 تمكنت من النمو والتكاثر في اوقات التعريض جميعها ( 24 ، 48 ، 72 ) ساعة. كما ونجح المستخلص في تجزئة دنا الخلايا السرطانية المستخدمة في هذه الدراسة اذ لوحظ ارتفاع معنوي في نسبة التجزئة وتناسب هذا الارتفاع طرديا مع زيادة التركيز ولكلا الخطين. | This study was amied to detection the ability of azurin, produced from Pseudomonas aeruginosa , as inihibtor of cancer cells and show the effect of azurin to the human lymphocyte. Therfore, out of 145 specimens collected from urin, burn andwound swabs, ear swab, sputum and stool. 66 isolates of P. aeruginosa were obtained. These isolates were identified according to microscopical, cultural, biochemical assays. In addition Api 20 E assay was used to confirm the diagnosis. Azurin was extacted from Ps21, isolate from urin, and concentration was measured by absolute method , it was 916.33µg/ml. Therfore, it was purified by using gel filtration,Sephadex G - 100. The peak was ranged from 24 to 33.The concentration. Azurin was performed 550µg/ml. The genetic effects of partial purified of azurin in human lymphocyte was studied by using several parameters such as Blastindex (BI), Mitotic index (MI) and Chromosomal aberration (CA). The high concentration of azurin, caused a significantreduction effect when compared with control. In addition, no chromosomal aberratios was seen. The inhibion effect of partial purified of azurin in some cancer cell lines (Hep - 2, AMN - 3) was studied. The extract at high Concentration ( 125 , 250 ) µg/ml. was exhibited apotent inhibiory for all exposure time against cancer cell lines. WhileThe inhibitory activity was gradually reduced with decreasing of Concentration;the low concentration was activated of cell to proliferation in both cell lines at different ratio in coparasion with the control ( 100 % ). The viability of Hep - 2 cells was increased only during the first 24 h from exposure while the AMN - 3 cell was able to grow and proliferate in all exposture time (24 , 48 , 72) hr. In addition the extract was succeeded to fragmentation DNA of cancer cell which used in these Studied, the azurin caused significant increas of fragmentation ratio, which increased with increase the concentration of azurin for both cell lines

انتاج انزيم chitinase من بكترياSerratia marcescens باستخدام حالة التخمرات السائلة والصلبة ودوره في المعالجة الحيوية

اسم المؤلف: ميس عماد احمد محمود
اسم المشرف: شذى سلمان حسن
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2007
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: درست قابلية (15)عزلة من بكتيريا Serratia marcescenase على انتاج الكايتنيز, واظهرت نتائج الغربلة الكميه وشبه الكمية ان العزلةSerratia marcescenaseA1S هي الاغزر انتاجا للانزيم . زرعت البكتيريا في اوساط تخمر صلبة وسائلة مختلفة استعملت مواد نباتية مختلفة ( مضافا اليها الكايتين وبدونه ) لتحضير الاوساط الصلبة ، اما الاوساط السائلة فقد احتوت على الكايتين مع مواد نيتروجينية مختلفة . بينت النتائج الماخوذه من قياس فعالية الانزيم على اساس تقدير السكريات المختزلة والسكر ان استيل كلوكوز امين ان البكتيريا تنتج انزيمات الكايتينيز الداخلي chitobiosidase) ) الذي يحرر سلاسل من السكريات المختزلة والكايتنيز الخارجي chitobioase ) ) التي تحرر وحدات السكر الامينيN - acetyl D - glucosamine )) ، وكانت فعالية الكايتنيز الخارجي اعلى من الداخلي عموما ، وتبين ان الاوساط السائله تعطي انتاجية اعلى من اوساط التخمر الصلبة. نميت البكتيريا في الوسط السائل بظروف مختلفة ، ووجد ان الظروف الافضل لانتاج الانزيم هي اضافة البكتريا بعدد خلايا 104 × 2.2 خلية / مل الى الوسط الحاوي على الببتون بوصفه مصدرا للنتروجين 2 % من الكايتين الغروي وحضنها بدرجة 30 م عند الرقم الهيدروجيني ( 7 ) لمدة 4 ايام في الحاضنة الهزازة بسرعة 150 دورة / دقيقة ،وبلغت الانتاجية 9.5 وحدة/ملغم بروتين. رسب الكايتنيز في وسط الانتاج بعد تنمية العزلةmarcescenas A1S Serratia باضافة كبريتات الامونيوم بنسبة اشباع 75% ، وكانت الفعالية النوعية 9وحدة/ ملغم بروتين , وقد حققت هذه الخطوه تنقية جزئيه للانزيم وكان عدد مرات التنقيه5.6 بحصيله انزيميه مقدارها%80 . درست بعض العوامل المؤثره في فعالية وثبات الانزيم ، ولوحظ ان الرقم الهيدروجيني 7 هو الافضل للفعالية ، وتراوحت الارقام المفضلة لثباته بين 6 - 9 , وكانت اقصى فعالية للانزيم عند درجة 30 م . احتفظ الانزيم بنسبة 65 - 100 % عند حضنه بدرجات حرارة تراوح من 30 - 60 م لمدة 30 دقيقة ، وبقى محتفظا بـ 57 % من فعالية عند درجة 80 م. درس تاثيربعض المواد والمثبطات في فعالية الكايتنيز ولوحظ عدم تاثر الانزيم بـ EDTA وازايد الصوديوم والـPMSF بتركيز5 و10 ملي مولار . درس تاثير بعض الايونات الفلزية في فعالية الكايتنيز ولوحظت زيادة فعالية الانزيم عند حضنه مع ايونات الصوديوم Na+2 اذ وصلت الى 150 % . لم يتاثر الانزيم بايونات Mn +2 ، وFe+2 ،و Ca +2 ،و 2+ K وثبطت فعالية الانزيم عند معاملته بايونات Cu +² Zn +2, , Hg+2 بتركيز 5 ملي مولار اذ انخفضت الفعالية الى 31 , 50 , 55 % على التوالي وانخفضت الفعالية الى 25 ، 43 ، 50 % بتركيز 10 ملي مولار على التوالي عند المعاملة بهذه الايونات . قيست الفعالية المضادة للانزيم اتجاه انواع مختلفة من الكائنات الحية ، وبينت النتائج ان للانزيم فعالية مثبطة واضحة ضد خميرة الـ Candida albicans , حيث ظهرت مناطق عدم نمو واضحه للخميرة المعاملة بالانزيم ، وعند معاملةالقواقع البحرية Achatina fulica بالكايتنيز ظهرت تغيرات مظهرية عليها اذ لوحظ تنخر في اصدافها وفقدان فعاليتها. بينت النتائج ان تعريض يرقات حشرة خنفساء الطحين المتشابه Tribolium confusum للكايتنيز له تاثير قاتل للحشرة حيث فقدت حيويتها ، وظهر تحلل كامل في طبقة الكايتين التي تغلف سطح جسم اليرقة. يتضح من هذه النتائج ان الكايتنيز المنتج منmarcescenis A1S Serratia له فعالية مضادة لانواع مختلفة من الكائنات ، ويمكن استعماله بديلا للمواد الكميائية في القضاء على مثل هذه الاحياء | Fifteen Serratia isolatesd were obtained from different sources the ability of chitinase production from thes isolates was studied .Semi quantative and quantative screening appeared that Serratia marcescensA1S was the highest chitinase producer . The bacteria was cultured in different liquid and solid state fermentation media(SSF) , different plant sbstanaes were used for (SSF) with or without chitin , while liquid media containet chitin with different nitrogen source By measurements of reducing sugars and N - acetylD - glucosamine it was show this Serratia marcescensA1S produces endochitinase & exochitinase . the activity of exochitinase was higer than that of endochitinase the liquid media gaive higer chitinase production than the (SSF) Serratia marcescensA1S was grow in liquid media under tdifferent condiations and chitinase production was different favorable condtion for chitinase production were inoculation with 2.2 ×104 cell/ ml of bacteria in media containing 2 % chitin with peptone as nitrogen source , at pH 7, and incubated at 30 Cº in shakeing incubater with 150 rpm for 4 days Chitinase production reachet 9.7 unit/mg protein in these condation , Chitinase was precipitated from production media by 75 % saturation of ammonium sulphat with 9 unit/mg protein specific activity , the enzyme obtained from this step was partially purifed with 5.6 fold of purifaction and 80 % recovery . The effect of some facter on enzyme activity and stability were studied ,the optimum PH enzyme activity was 7and the favorites pH for enzyme stability ranged between 6 - 9 , the maximum activity was at 30 Cº, 100 - 65 % of enzyme activity mentained at 30 - 60 C º for 30 min and 57% at 80 Cº. EDTA ,Sodium azide and phenylmethane sulfonyl fluoride (PMSF) have no effect on chitinase activity with 5,10mM . The enzyme was treated with different metal ions , Na+2 increase enzyme activity , since it reached to150 % Mn2+ ,Fe +² ,Ca+2 , K+2, have no effect , while Cu2+, Zn+2, and Hg+2 at 5 Mm decreaced enzyme activity to 31 , 50 , 55 % respectivily and to 25 ، 43 ، 50% when it was treated with 10mM of these ions respectivily . The antibiotic activity of the chitinase against different organisms was determined , the enzyme inhibited Candida albicans growth, aclear zon appeared in the medium cultured with the yeast (treated with enzyme). Many chang appeared on sea snail Achatina fulica treated with enzyme, there was many pores on the shells , and the animal lost its viability . Flour beetle Tribolium confusum died when it was sprayed with chitinase, the chitin layer covered the Insecte body degredated after the treatment . From the above results it can be concluded that chitinase produced from Serratia marcescensA1S has antibiotic activity for different organismes , and it can be used as biocidal compound instead of chemical compounds for destroying or killing the harmful organisms

تكون الغشاء الحيوي بوساطة Klebsiella pneumoniae الملوثة للمثبتات الخارجية ومقاومته لمضادات الحياة == Biofilm Formation by The External Fixators Contaminating Klebsiella pneumoniae and Its Antibiotic Resistance

اسم المؤلف: مروى حميد مطشر الخفاجي
اسم المشرف: مي طالب فليح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2008
الموضوع الدقيق: الاحياء المجهرية
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: شخصت 98 عزلة بكتيرية منماة بظروف هوائية من مجموع 100 عينة سريرية ماخوذه من الاخماج المصاحبة للمثبتات الخارجية المستعملة في جراحة العظام والكسور. شكلت البكتريا السالبة لملون غرام اعلى نسبة 51% (50 عزلة) من المجموع الكلي للعزلات، في حين شكلت البكتريا الموجبة لملون غرام 49% (48 عزلة) منها ، وكانت بكتريا Klebsiella pneumoniae هي المسبب الاكثر شيوعا لهذه الاخماج اذ عزلت بنسبة 74% (37 عزلة) من المجموع الكلي للعزلات السالبة لملون غرام . اجري اختبار حساسية عزلات K. pneumoniae لمضادات الحياة ، وتبين ان العزلات جميعها كانت حساسة لمضاد Amikacin (100%) ، ومقاومة للمضادات : Ampicillin ، وCefalexine ، وCefalothin ، وCefotaxime ، وCiprofloxacin ، وRifampin بنسبة 100% ، وقد كانت نسبة مقاومتها لمضادات Ceftazidime ، وStreptomycin ، وTobramycin ، وGentamycin ، وNeomycin ، وNitrofurantoin ، وNorfloxacin ، وTetracycline ، وNalidixic acid 94.5% و86.5% و86.5% و67.5% و59.5% و37.8% و35.1% و32.5% و24.3% وعلى التوالي . تم تحديد التراكيز المثبطة الدنيا لعزلات بكتريا K. pneumoniae لمضادات الحياة Cefotaxime ، وCeftazidime ، وNalidixic acid ، وAmikacin فبلغت 1024 مايكروغرام/مليليتر، و128 مايكروغرام/مليليتر، و64 مايكروغرام/مليليتر، و16 مايكروغرام/مليليتر على التوالي للعزلة K13 ، و1024 مايكروغرام/مليليتر، و64 مايكروغرام/مليليتر، و16 مايكروغرام/مليليتر، و4 مايكروغرام/مليليتر على التوالي للعزلة K51 . كما تم تحديد التراكيز القاتلة الدنيا لهذه المضادات وتراوحت مابين اكثر من 1024 مايكروغرام/مليليتر، و1024 مايكروغرام/مليليتر، و128 مايكروغرام/مليليتر، و32 مايكروغرام/مليليتر، على التوالي للعزلة K13 ، واكثر من 1024 مايكروغرام/مليليتر، و256 مايكروغرام/مليليتر، و32 مايكروغرام/مليليتر، و8 مايكروغرام/مليليتر على التوالي للعزلة K51. تم التحري عن قابلية عزلات K. pneumoniae على انتاج الطبقة اللزجة ، واظهرت نتائج طريقة الفحص بالانابيب ان 83.8% (31عزلة) كانت منتجة للطبقة اللزجة ، في حين اظهرت طريقة احمر الكونغو ان 97.3% (36عزلة) كانت منتجة للطبقة اللزجة . تم التحري عن فوعة عزلات K. pneumoniae المعزولة من الاخماج المصاحبة للمثبتات الخارجية وذلك باختبار قابليتها لربط البنفسج البلوري وكانت العزلات جميعها فائعة (Virulent) . اختبرت قدرة عزلات K. pneumoniae على انتاج الغشاء الحيوي باستخدام اطباق المعايرة الدقيقة فاظهرت النتائج ان العزلات جميعها كانت منتجة للغشاء الحيوي لكن بدرجات سمك متفاوتة ، وتراوحت قيم الامتصاصية مابين (0.111 - 2.899)، وكانت العزلة K13 هي العزلة الاكثر فعالية في انتاج الغشاء الحيوي حيث سجلت اعلى قيمة امتصاصية 2.899 . اختبر تاثير التراكيز تحت المثبطة الدنيا من مضادات الحياة Cefotaxime ، وCeftazidime ، وNalidixic acid ، وAmikacin في الاغشية الحيوية المتكونة بفعل العزلتين K13وK51 في اطباق المعايرة الدقيقة باعمار مختلفة 24 ساعة و48 ساعة ، واظهرت النتائج ان هذه التراكيز ثبطت التصاق البكتريا على سطح البولي ستيرين مما ادى الى انفصال الغشاء الحيوي ، كما تبين ان الاغشية الحيوية الاقدم اكثر مقاومة للعوامل ضد الميكروبية . تم تحديد التراكيز المثبطة الدنيا للغشاء الحيوي واظهرت النتائج انها اكبر بثلاث او اربع مرات من التراكيز المثبطة الدنيا لعزلات K. pneumoniae العالقة في الوسط الزرعي | Out of 100 clinical samples taken from infected external fixation devices used in orthopedic surgery 98 bacterial isolates grown in aerobic conditions had been diagnosed. The higher ratio 51% (50 isolates) of the total number of the isolates occupied by gram negative bacteria while gram positive bacteria represented the rest 49% (48 isolate) , Klebsiella pneumoniae was the most common aetiological agent of these infections which accounted 74% (37 isolates) of the total number of gram negative bacterial isolates. The sensitivity test against different antibiotics was done. It was found that all K. pneumoniae isolates (100%) were sensitive to Amikacin and resistant to Ampicillin, Cefalexine, Cefalothin, Cefotaxime, Ciprofloxacin, and Rifampin . While their resistance percetage to the antibiotics Ceftazidime, Streptomycin, Tobramycin, Gentamycin, Neomycin, Nitrofurantoin, Norfloxacin, Tetracycline, and Nalidixic acid were 94.5% , 86.5% , 86.5% , 67.5% , 59.5% , 37.8% , 35.1% , 32.5% , 24.3% respectively. Minimum inhibitory concentrations to K. pneumoniae isolates had been determined for the antibiotics Cefotaxime, Ceftazidime, Nalidixic acid, and Amikacin , they were 1024 Mcg/ml , 128 Mcg/ml , 64 Mcg/ml , and 16 Mcg/ml respectively for the isolate K13 , and they were 1024 Mcg/ml , 64 Mcg/ml, 16 Mcg/ml, and 4 Mcg/ml respectively for the isolate K51. Minimum bactericidal concentrations for the same antibiotics had been estimated and they were higher than 1024 Mcg/ml, 1024 Mcg/ml, 128 Mcg/ml, and 32 Mcg/ml respectively for K13 isolate, and higher than 1024 Mcg/ml, 256 Mcg/ml, 32 Mcg/ml, and 8 Mcg/ml respectively for the isolate K51. The ability of K.pneumoniae isolates to produce slime layer was detected , the results revealed that 83.3% (31 isolates) were slime layer producers by tube method, while 97.3% (36 isolates) were slime producers by congo red method. The virulence of K.pneumoniae isolates isolated from external fixators infections had been detected via detection the crystal violet binding ability of these isolates, all the isolates were virulent. The ability of K.pneumoniae isolates to produce the biofilm had been tested by using microtiter plates , results revealed that all the isolates were biofilm producers with different thickness degrees, absorbance values rendered between (0.111 - 2.899) , K13 was the best biofilm producer isolate, it,s absorbance value was 2.899 . The effect of subinhibitory concentrations of the antibiotics Cefotaxime, Ceftazidime, Nalidixic acid, and Amikacin , on biofilms formed by K13 and K51 isolates in microtiterplates in different ages , 24 hr and 48 hr had been tested , results revealed that these concentrations inhibited bacterial adhesion on polysteren surface and consequently causes biofilm detachment , also it was demonstrated that aged biofilms are more resistant to antimicrobial agents . Minimum inhibitory concentrations for the biofilm had been estimated, and the results revealed that these concentrations were three to four times higher than minimum inhibitory concentrations for the planktonic K.pneumoniae isolates.

دراسـة الاستجابة المناعيـة للاشخاص بعد تلقيحهم بلقاح الحصبـة الالمانية == Immune - status of Individuals after Immunization with Rubella vaccine

اسم المؤلف: ليلى فؤاد علي
اسم المشرف: غنيمة صادق محمد
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2005
الموضوع الدقيق: الاحياء المجهرية
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: بدا برنامج التلقيح الموسعExpanded programme on immunization(EPI) في العراق عام 1985وبتوجيه من منظمة الصحة العالمية وبضمنه لقاح الحصبة الالمانية في برنامج التلقيح الاعتيادي للاطفال وبعمر 15شهر بهدف القضاء على مرض متلازمة الحصبة الالمانية الولادية نظرا لما يسببه هذا المرض من اضرار كبيرة في الجنين حيث قد يولد الطفل المصاب مشوه وقد تؤدي الاصابة بحياته الى الموت (Laura & Susan,2002). شملت الدراسة (116) عينة دم ماخوذة من اشخاص اصحاء ،كان منها 30 عينة دم لاطفال اصحاء بعد اسبوعين من تلقيحهم بلقاح الحصبة الالمانية حسب الجدول التلقيحي المتبع في القطر وقد تراوحت اعمارهم مابين (18 - 20) شـهر ، و20 عينة دم لاناث تراوحت اعمارهن مابين(12 - 15) سنة بعد اسبوعين من تلقيحهن بلقاح الحصبة الالمانية . اما مجموعة السيطرة فتضمنت 12 عينات دم لاطفال و10 عينات لاناث بعمر (12 - 15) سنة لم يتلقوا لقاح الحصبة الالمانية . هذه العينات اجريت لها الاختبارات المناعية لتقييم الاستجابة المناعية الخلطية والخلوية للقاح الحصبة الالمانية.كما تضمنت الدراسة 44 عينة دم لاشخاص ملقحين منها 22 عينة كانت نتائج فحص تثبيط التلازن الدموي لها موجبة و22 عينة كانت نتائج فحص تثبيط التلازن الدموي لها سالبة ، تم اختبار هاتين المجموعتين باختبار الادمصاص المناعي المرتبط بالانظيم (ELISA) لمعرفة العلاقة بين الفحصين والحساسية والنوعية لفحص (ELISA)نسبة الى فحص تثبيط التلازن الدموي . في هذه الدراسة تم قياس الاستجابة المناعية الخلطية وذلك بقياس تركيز الاضداد النوعية للحصبة الالمانية ، بالاضافة الى تقدير التركيز الكلي للكلوبيولينات المناعية صنفA وM وG.كما تضمنت الدراسة قياس الاستجابـة لمناعية الخلوية وذلك بقياس قابلية الخلايا البلعمية على البلعمة ،وقياس قابلية الخلايا اللمفاوية التي تم تحفيزها بالملزن النباتي (PHA) على التحول والانقسام . من خلال هذه الدراسة تم الحصول على النتائج التالية : - 1 - اظهرت مصول الاطفال نسبة 96.7 % ،واظهرت مصول الاناث نسبة 95 % تراكيز فعالة من الاجسام المضادة النوعية للحصبة الالمانية اعلى من 11وحدة عالمية \مليلتر باختبار الادمصاص المناعي المرتبط بالانظيم ELISA بعد عملية التلقيح .2 - اظهرت مجموعتي الاطفال والاناث الملقحين انخفاض في اجمالي الكلوبيولين المناعي صنف GوAوبفروق معنوية (p<0.05) ( p>0.05 ) مع ارتفاع في الكلوبيولين المناعي صنف Mوبفروق معنوية عالية(p<0.01) مقارنة بمجموعتي السيطرة .3 - وجد من خلال فحص النسبة المئوية لعملية البلعمة ان كل من الاطفال والاناث الملقحين اظهروا ارتفاعا في النشاط الالتهامي للخلايا البلعمية وبفروق معنوية (p<0.05) مقارنة بمجموعتي السيطرة .4 - اظهرت نتائج فحص التحول والانقسام اللمفاوي ان هناك انخفاض غير معنوي ( p>0.05 )في مجموعتي الاطفال والاناث الملقحين مقابلة بمجموعتي السيطرة . 5 - لا توجد فروق معنوية في الاستجابة المناعية الخلطية والخلوية بين مجموعة الاطفال الملقحين ومجموعة الاناث الملقحات ( p>0.05 ) .6 - وجد ان فحص الادمصاص المناعي المرتبط بالانظيم هو اكثر حساسية من فحص تثبيط التلازن الدموي في قياس تركيز الاجسام المضادة النوعية للحصبة الالمانية ،وعليه فهو الافضل في تقييم الاستجابة المناعية للقاح الحصبة الالمانية .7 - وجد ان هناك علاقة ايجابية قوية بين فحصي الادمصاص المناعي المرتبط بالانظيم وتثبيط التلازن الدموي في قياس تركيز الاجسام المضادة النوعية للحصبة الالمانية حيث كانت قيمة ( r = 0.585 ) . | The Expanded Programme on Immunization (EPI) began in Iraq in 1985, including Rubella vaccine. MMR vaccine is represent one of combined vaccines of rubella ,measles and mumps that given for children at age of 12 - 15 months. Vaccination with rubella vaccine is the best way to eradicate Congenital Rubella Syndrome which have severe complications for women in their first trimester of pregnancy These complications include severe birth defects or death of the fetus. In this study, (116) blood samples were taken from healthy individuals after 2 - 4 weeks after vaccination with rubella vaccine .(30) from children of age (12 - 18) and (20) from females at age of (12 - 15) years old . Control group included (12) healthy children and (10) healthy females ,both did not have rubella vaccine through their life .These samples were tested to evaluate the immune - states of individuals after immunization . the study include (44) blood samples tested by HItest and ELISA test . In this study specific haemagglutination antibodies & IgM antibodies were measured ,total Immunoglobulines IgM ,IgG ,IgA also determined .Lymphocyte transformation and ability of phagocyte cell to phagocytosis were measured. The following results were obtained in this study : 1. The percentage of children whom observed levels of specific antibodies ≥ 11AU/ml was 96.7% and 95% by ELISA test for children and females groups respectively after vaccination .2. The decreasing total of IgG and IgA with the increasing of IgM in both groups of children and females with significant differences (p>0.05) (p>0.05) (p<0.01) receptively comparison with control group.3. The increasing percentage of phagocytic cell to phagocytosis in both groups of children and females in significant differences (p<0.05) comparison with control group .4. The decreasing percentage of lymphocyte transformation in both children and females groups in non significant differences (p>0.05) comparison with control group .5. The non significant differences in humoral and cellular immune Response between child and female groups .6. The higher sensitivity of ELISA test to HI test in determination of rubella specific antibodies , so it is better than HI test in measuring the immune - status of individuals vaccinated with rubella vaccine .7. A positive relationship between ELISA test and HI test (r= 0.585) .

الاستخلاص والتنقية الجزئية للخملة من بكتريا Proteus mirabilis ودراسة دورها في الالتصاق على الخلايا الطلائية البولية == Extraction and Partial Purification for Fimbriae from Proteus mirabilis and Study Their Role in Adhesion to Uroepithlial Cells

اسم المؤلف: عامر سعيد علي الكعبي
اسم المشرف: مي طالب فليح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2007
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: تضمنت هذه الدراسة عزل وتشخيص البكتريا السالبة لملون كرام من ادرار المرضى المراجعين لمستشفى الكاظمية التعليمي ومستشفى اليرموك في بغداد واللذين شخصت اصابتهم بخمج المسالك البولية سريريا . عزلت البكتريا السالبة لملون كرام من 61 عينة ادرار وبنسبة عزل 28.9% من اصل 211 عينة ادرار , كانت نسبة عزل بكتريا Escherichia coli 70.49% , اما بكتريا Klebsiella pneumoniae , وPseudomonas aeruginosa فكانت نسبـة عزلهما 8.19% و6.55% وعلى التوالي . اظهرت بكتريا Proteus spp. نسبة عزل 14.75% وبلغت نسبة عزل P.mirabilis 11.47% اما نسبة عزل P.vulgaris فكانت 3.27% . تم التحري عن قدرة سللات بكتريا P.mirabilis للتعبير عن خمل لاصق الخلايا الطلائية البولية (Uroepithelial Cell Adhesin)(UCA) , بالاعتماد على اعلى معدل التصاق للبكتريا بالخلايا الطلائية البولية للانسان , اذ تم اختبار العزلة P.mirabilis U7 التي كان معدل التصاقها 30.2% عند تنميتها على وسط مرق اللوريا وفترة حضن 24 ساعة بدرجة حرارة 37 م , وعند تنميتها على وسط اكار اللوريا كان معدل التصاقها 20.3% مقارنة بالعزلة P.mirabilis U4 التي ابدت معدل التصاق واطيء عند تنميتها على وسط مرق اللوريا واكار اللوريا اذ بلغ معدل الالتصاق 4.7% و1.65% وعلى التوالي . اظهرت العزلة P.mirabilis U7 قدرة للتعبير عن الخمل المقاوم للمانوز شبية البروتيس (MR ∕P) والخمل المقاوم للمانوز شبية الكلبسيلا (MR ∕K) , اذ لازنت هذه العزلة كريات الدم الحمر للانسان نوع O+ وخنازير غينيا والخراف وبوجود سكر المانوز دلالة على وجود خمل MR ∕P , كما لازنت كريات الدم الحمر المدبغة للابقار وبوجود المانوز دلالة على وجود خمل MR ∕K عند تنمية هذه العزلة على وسط مرق اللوريا وفترة حضانة 48 ساعة وبدرجة حرارة 37 م , كما اختزل التعبير عن الخمل MR ∕Pو MR ∕K عند تنمية P.mirabilis U7 على الاوساط الزرعية الصلبة . تم عزل خمل UCA وتنقيته جزئيا باستخدام اليوريا بتركيز 2 مولر والصدمة الحرارية وكبريتات الامونيوم وبنسبة تشبع 50% وDeoxycholate , كان تركيز بروتين UCA هو 1.65 مايكروغرام/مليلتر وبحجم نهائي 1.5 مليلتر ناتج من استخدام 3 لتر من مرق اللوريا . اظهر الترحيل الكهربائي وبوجود المادة الماسخة SDS حزمتين بروتينية لبروتين UCA المنقى جزئيا والذي بلغ وزنه الجزيئي 17.782 دالتون . تم حقن الـ UCA المنقى جزيئا في الارانب للحصول على المصل المضاد اذ وجد ان تركيز المصل المضاد هو 128 كما تم الاستدلال على وجود الاضداد النوعية لمستضد خمل UCA . ثبطت اضداد خمل UCA المحضرة في الارانب والمخففة بتراكيز 1 : 50 و1 : 100 , 1 : 200 التصاق العزلة P.mirabilis U7 بالخلايا الطلائية البولية (معدل البكتريا الملتصقة كان 5.6 و11.75 و21.05 خلية بكتيرية /خلية طلائية وعلى التوالي ) , اظهرت هذه الاضداد اختلافا معنويا (P≤0.05) في معدل الالتصاق عند مقارنتها بمصل السيطرة والمستعمل بنفس التراكيز (معدل عدد البكتريا الملتصقة كان 29.8 و30 و31.6 خلية بكتيرية /خلية طلائية وعلى التوالي ) ,كما اظهرت النتائج وجود اختلاف معنوي (P≤0.05) بين تراكيز المصل المضاد المستخدمة في تثبيط الالتصاق . تم اختبار قدرة خمل UCA المنقى جزئيا على التمنيع وحماية اناث الفئران من الاصابة بخمج المسالك البولية , تم اصابة الفئران الممنعة وغير الممنعة ببكتريا P.mirabilis U7 بتركيز (5×105) وحدة مكونة لمستعمرة/ مليلتر عن طريق الاحليل وبعد مرور اسبوع على الاصابة وجد ان اعداد الخلايا البكترية الحية في كلية الفئران الممنعة انخفض الى (2.6 : Log10 ) وحدة مكونة لمستعمرة /مليلتر مقارنة بـ(3.7 : Log10 ) وحدة مكونة لمستعمرة /مليلتر لكلية الفئران غير الممنعة ,اما مثانة الفئران الممنعة فقد اختفت الاصابة وبشكل كامل مقارنة بمثانة الفئران غير الممنعة (3.3 : Log10 ) وحدة مكونة لمستعمرة /مليلتر .

دراسة بعض الخصائص الفيزيائية والكيميائية لانزيم Staphylolysin المنتج من بكتريا Pseudomonas aeruginosa == Study of Some Physical and Chemical properties of Staphylolysin produced by Pseudomonas aeruginosa

اسم المؤلف: شيماء سهيل نجم
اسم المشرف: مي طالب فليح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: عزلت (50) عزلة عائدة لبكتريا Pseudomonas aeruginosa من 120 عينة سريرية جمعت من مصادر مختلفة تضمنت (الادرار،والقشع ،والبراز ،ومسحات الاذن ، والجروح،والحروق).تم التحري عن انتاج بعض من عوامل الضراوة للعزلات قيد الدراسة مثل : الهيمولايسين، والايلاستيز ، والبروتيز ، ووجد ان نسبة انتاج الهيمولايسين والايلاستيز كانت 76% ، فيما كانت نسبة انتاج البروتيز 72% في العزلات المحلية قيد الدراسة.اختبرت قابلية العزلات المحلية على انتاج انزيم الستافيلولايسين ، وبينت نتائج الغربلة شبه الكمية ان 18 عزلة (36%) من العزلات لها القابلية على انتاج الانزيم وبنسب متفاوتة،اذ تراوحت اقطار الهالة الشفافة من(5 - 22)ملم ، وتميزت خمس عزلات منها باعطاءها اوسع مناطق تحلل على وسط ] ترتبك صويا الصلب + 0.2% (وزن/حجم) من بكتريا Staphylococcus aureus المعزولة المقتولة بالحرارة بدرجة 100م [تراوحت من (16 - 22)ملم ، وتم انتخاب العزلة 16P لاستخلاص الستافيلولايسين A (LasA) ، اذ بلغت الفعالية النوعية لها (8.59)وحدة / ملغم بروتين ، والعزلة 5P لاستخلاص الستافيلولايسين D (LasD)، اذ بلغت الفعالية النوعية لها (0.66)وحدة / ملغم بروتين ،لكونهما الاغزر انتاجا للانزيم عند اجراء الغربلة الكمية.استخلص انزيم الستافيلولايسين بالنبذ المركزي المبرد وتمت تنقيته جزئيا بترسيبه بكبريتات الامونيوم بنسبة اشباع 80% ثم بكروموتوغرافيا التبادل الايوني باستخدام المبادل DEAE - Cellulose ، بينت النتائج ان الفعالية الانزيمية الحالة للعنقوديات (Staphylolytic activity) لانزيم الستافيلولايسين A ظهرت في القمة الاولى، وبلغت عدد مرات التنقية 10.74 مرة وبحصيلة انزيمية 14.2%،فيما اظهرت القمة الثانية الفعالية الانزيمية الحالة للعنقوديات لانزيم الستافيلولايسين D بعدد مرات تنقية 9.1 مرة وبحصيلة انزيمية 18.14%.درست بعض خصائص الانزيمين فكان الوزن الجزيئي 20.417 كيلو دالتون و23.988 كيلو دالتون للستافيلولايسين D,A على التوالي عند تقديرهما بطريقة الترحيل الكهربائي في هلام SDS - PAGE. لوحظ ان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية الستافيلولايسين A هو 8 اذ اعطى اعلى فعالية بلغت 150 وحدة / مل ، ولثبات الانزيم 7.5 - 8.5 اذ احتفظ الانزيم بكامل فعاليته تقريبا ، فيما كان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية الستافيلولايسين D هو 9.5 اذ اعطى اعلى فعالية بلغت 16 وحدة / مل ، ولثبات الانزيم 8.5 - 9.5 اذ احتفظ الانزيم بكامل فعاليته تقريبا ، وظهرت اقصى فعالية للانزيمين عند درجة حرارة 40م اذ بلغت الفعالية النوعية للستافيلولايسين A 140 وحدة /مل وللستافيلولايسين D 16.4 وحدة/ مل ، واحتفظ كلا الانزيمين بكامل فعاليتهما تقريبا عند حضنهما بدرجة حرارة 25 - 40م لمدة ساعة.عند دراسة تاثير بعض المواد في الفعالية الانزيمية للستافيلولايسين D,A كان لكلوريد الصوديوم وكلوريد البوتاسيوم بتركيز 1 و5 ملي مولار تاثير منشط للفعالية الانزيمية قياسا بالسيطرة اذ احتفظ انزيم الستافيلولايسين A بـ105% و108% من فعاليته على التوالي عند معاملته بكلوريد الصوديوم ، واحتفظ بـ 102% و104% من فعاليته على التوالي عند معاملته بكلوريد البوتاسيوم، في حين ثبطت الفعالية الانزيمية عند معاملتهما بكلوريدات الحديد والزئبق والخارصين وبنسب متفاوتة ،اذ احتفظ انزيم الستافيلولايسين A بـ 73% و7% من فعاليته على التوالي عند معاملته بـ5ملي مولار من كلوريد الحديد والزئبق على التوالي،و9% فقط من فعاليته عند معاملته بـ 0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين ، فيما احتفظ انزيم الستافيلولايسين D بـ45% و13% من فعاليته فقط عند معاملته بـ5 ملي مولار من كلوريد الحديد والزئبق على التوالي،و23% فقط من فعاليته عند معاملته بـ0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين، بينما احتفظ كلا الانزيمين بكامل فعاليتهما عند المعاملة بمادة EDTA بتركيز 10 ملي مولار ،وفنيل مثيل سلفونيل فلورايد (PMSF) بتركيز 0.4 ملي مولار. | Fifty isolates of Pseudomonas aeruginosa were obtained from 120 various clinical samples included (urine, sputum, stool, ear, wound & burn swabs). Detection of the production of some virulence factors (hemolysin, elastase and protease) by the local isolates was studied. Results showed that the hemolysin and elastase production ratio were 76%, while the protease production ratio was about 72% by the local isolates.Detection of the ability of local isolates to produce staphylolysin enzyme was studied, the semi quantity screening results showed that 18 (36%) of the isolates have the ability to produce this enzyme in variable ratios , the diameters of lysis Zone ranged from(5 - 22)mm, and five isolates were characterized by giving the highest lysis zone on (Tryptic soya agar + 0.2% (wt./vol.) of heat killed Staphylococcus. aureus at temperature 100oC ) medium which were ranged from(16 - 22)mm, then the isolate P16 was chosen to extract staphylolysin A (LasA) and it's specific activity reaches 8.59 unit /mg protein, whi1e chosen the isolate P5 to extract staphylolysin D (LasD) where it's specific activity reaches 0.66 unit /mg protein since the two isolates were the most production of enzyme by quantity screening . Staphylolysin enzyme was extracted by cooling centrifugation and partially purified by ammonium sulphate precipitation in saturation percentage of 80%, this step was followed by Ion exchange chromatography technique by using DEAE - cellulose column, results showed that the enzymatic activity (Staphylolytic activity) of the staphylolysin A appeared in first peak with purification folds and recovery of 10.74 fold and 14.2% respectively, while the second peak appeared the activity for staphylolysin D with purification folds and recovery of 9.1 fold and 18.14% respectively.Some of the characters of the two enzymes were studied, so the molecular weights were 20.417 kilo dalton & 23.988 kilo dalton for staphylolysin A&D respectively were estimated by SDS - polyacryl amide gel e1ectrophoresis. The optimum pH for staphylolysin A activity was found to be 8 which gives higher activity reaches 150 unit/ml, and for enzyme stability was 7.5 - 8.5 in which the enzyme nearly retained it's full activity, while there were for staphylolysin D 9.5 that gives higher activity of 16 unit/ml.& 8.5 - 9.5 in which the enzyme nearly retained it's full activity respectively, Maximum activity of two enzymes was obtained at 40 C in which the specific activity were for staphylolysin A and D 140 and 16.4 unit/ml , and the activity for two enzymes at 25 - 40 C remained approximately without change for one hour. When the effects of some materials on staphylolysin A & D activity were studied, the results showed that both sodium chloride & potassium chloride at 1 & 5 mM had the activator effect on enzymatic activity compared with its control where the staphylolysin A and D retained 105% ,108% and 102%, 104% of their activity, respectively when treated with sodium chloride, while they retained 110%, 114% and 133%, 118% of their activity, respectivity when treated with potassium chloride, while ferric, mercury & zinc chlorides inhibited the activity in variable ratios in which the staphylolysin A and D kept only 73%, 7% and 45%, 13% respectively of their initial activity when treated with 5mM of ferric and meracury chloride and 9%, 23% respectively of their initial activity when treated with 0.1mM zinc chlorid & enzymatic activity for both enzymes were not affected when treated with EDTA at 10mM & phenyl methyl sulphonyl fluoride (PMSF) at 0.4mM.

عزل وتشخيص فيروس شلل الاطفال من الاطفال الملقحين بلقاح شلل الاطفال ومقارنته مع الفيروس الضاري == Isolation &Identification of Poliovirus from Vaccinated Children with Oral poliovirus vaccine and Comparison With Wild Type Virus

اسم المؤلف: زهراء جعفر جميل عبد الكريم
اسم المشرف: غنيمة صادق محمد | عبد اللطيف محمد احمد
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2007
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: يعد فيروس السنجابيةPoliovirus(PV) العامل المرضي الرئيس المسبب لشلل الاطفال Poliomyelitis . ويعتبر هذا المرض من الامراض الخطرة في العالم والتشخيص المختبري له ضروريا لغرض مراقبة وترصد حالات شلل الاطفال ومدى فعالية عملية التلقيح، وكذلك للتميز بين الشلل المتسبب من فيروس السنجابية (PV) والعوامل الاخرى ، والعناية المثالية للمريض هي تجنب الحركة والركض والركون الى الراحة والعلاج الطبيعي . تطوير علاج المرض باستعمال مضادات الفيروس لاصابات شلل الاطفال ممكن ان يضيف في المستقبل القريب حافزا اضافيا للتشخيص المختبري له . تضمنت الدراسة جمع مئة وثمانين عينة خروج من الاطفال (اعمارهم اقل من خمس سنوات) الذين اعطوا لقاح شلل الاطفال الفموي Poliovirus vaccine Oral في مركز الرعاية الاولية الصحية في بغداد لعزل وتشخيص فيروس السنجابية (PV) ، وكذلك تم اختيار خمسة عشر طفلا من المجموع الكلي للاطفال واستمرار متابعة مدى طرح فيروس السنجابية (PV) في الخروج لمدة عشرة ايام بعد التلقيح بلقاح شلل الاطفال الفموي (OPV) .لعزل فيروس السنجابية (PV) : حقنت نماذج الخروج في خطوط خلوية مختلفة (L20B, RD,Hep - 2C, CEF) ، ويتبع ذلك تشخيص نوع فيروس السنجابية (PV) من النماذج الموجبة التي اظهرت تاثيرات مرضية Cytopathic Effect بوساطة اختبار التعادل الدقيق Microneutralization Test ثم اجراء الترحيل الكهربائي SDS - PAGE Electrophoresis لبعض العينات التي شخصت وعينة اللقاح وعينات برية تم الحصول عليها من مختبر الصحة المركزي، وقد تم التوصل الى النتائج الاتية : - • اظهرت الدراسة ان 114 عينة اعطت نتيجة موجبة لعزل فيروس السنجابية(PV)من اصل 180 عينة اي بنسبة (63%) .• لا توجد فروق معنوية ( P<0.05 ) في معدل عزل فيروس السنجابية (PV) من الذكور والاناث اذ ان نسبة الذكور الى الاناث في عزل (PV) هي 1 : 1 .• وجد ان هناك فروقا معنوية ( P<0.05 ) في معدل عزل فيروس السنجابية (PV ) خلال فصول السنة حيث وجد ان اعلى النسب كانت 74.6% في فصل الصيف .• عند مقارنة عزل فيروس السنجابية (PV) من عينات خروج اطفال باعمار مختلفة وجد ان اعلى نسبة لعزل (PV) 83.3% من عينات الاطفال بعمر 8 - 10 اشهر .• عند مقارنة معدل النتائج الموجبة على خطوط خلوية مختلفة : اظهرت النتائج ان (L20B) تعطى افضل المعدلات (93%) يليها خلايا (RD) لمعدل (88%) ثم خلايا (Hep - 2C) بمعدل (84%) ،وعلى النقيض خلايا (CEF) لم تعط اية نتيجة موجبة .• وجد ان هناك فروقا معنوية ( P<0.05 ) في سرعة ظهور فيروس السنجابية (PV) على خطوط خلوية مختلفة : اظهرت النتائج ان خلايا(L20B) اسرع الخطوط الخلوية في اعطاء النتائج، وكذلك توجد فروق معنوية ( P<0.05 ) بين الخلايا (L20B) و(RD) في اليوم الثالث وكذلك توجد فروق معنوية بين (RD) و(Hep - 2C) ( P<0.05 ) في اليوم الخامس، بينما توجد فروق معنوية عالية ( P<0.05 ) في التحري عن فيروس السنجابية (PV) بين خلايا (L20B) و(Hep - 2C) وجد في اليوم الخامس .• في اختبار التعادل N.T : اظهرت النتائج ان النمط الاول (PV1) هو الشائع وقد كان بنسبة 60% ، ثم النمط الثالث (PV3) بنسبة 27% . لكن في هذه الدراسة لم يتم عزل النمط الثاني (PV2) ، وقد ظهرت فيروسات معوية (EVs) اخرى بنسبة 13% .• عند مقارنة عزل فيروس السنجابية (PV) مع باقي الفيروسات المعوية (EVs) خطوط خلوية مختلفة : اظهرت النتائج ان (L20B) تعطي افضل المعدلات (100%) لعزل فيروس السنجابية (PV)، ولم تعزل فيروسات معوية (EVs) ، اما خلايا (RD) بمعدل (90%) اما خلايا(Hep - 2C) بمعدل (71%) لعزل فيروس السنجابية (PV) ، وقد عزلت (EVs) بمعدل (29%) .• في اختبار الترحيل الكهربائي (Electrophoresis (SDS - PAGE في هذه الدراسة تم تمييز اربعة حزم للسلاسل الببتيدية لفيروس السنجابية (PV) لكن هذه النتائج : لم تظهر اي فروقات تميز بين انماط فيروس السنجابية (PV) الثلاثة ، وكذلك لا توجد فروقات تميز بين فيروس السنجابية (PV) المعزولة من عينات الخروج (المشتقة من اللقاح) والعينات البرية (تم الحصول عليها من مختبر الصحة العام المركزي)او عينات اللقاح .نستنتج من الدراسة ان تقنية الزرع النسيجي في الكشف عن فيروس السنجابية (PV) في نماذج الخروج ان الخلايا (L20B) تعد خط الخلايا الامثل والافضل لعزل فيروس السنجابية (PV) بدون عزل فيروسات معوية (EVs) اخرى من نماذج الخروج ، وهذا يوفر لناالوقت والجهد والمواد المبذولة لعزل وتشخيص فيروس السنجابية (PV) من عينات الخروج خلال وجود ومراقبة حالات الشلل الرخو الحاد (AFP )والمراقبة البيئية ضمن مبادرة استئصال شلل الاطفال وكذلك نستنتج ان النمط الاول(PV1)هو الاكثر شيوعا في هذه الدراسة . | Poliovirus (PV) is the etiologic agents of poliomyelitis , This Disease was one of the dangerous diseases in the world. Laboratory diagnosis is still required for detection of poliomyelitis cases and surveillance, to qualification of Immunization and other potentially treatable conditions; development of antiviral agent for the treatment of (PV) infection may provide added impetus for laboratory diagnosis in the near future. In this study collection one hundred and eighty stool specimens from children (less than 5 years old) who administered Oral Poliovirusvaccine (OPV) in preliminary health protection centers in Baghdad and Select fifteen children from the total children and following shedding (PV) in stool for 10 days after immunization with (OPV). Isolation of (PV) was conducted using stool specimens of the vaccination children and inoculated in (L20B) cells, human rhabdomyosarcoma (RD) , human epidermoid carcinoma (Hep - 2C) and check embryo fibroblast (CEF). Followed by identification of (PV) type from positive case which appear cytopathic effect (CFE). By microneutralization test, SDS - PAGE Electrophoresis was done to some specimens which identified as (PV1) ,(PV3),vaccine and wild type. The following results were obtained in this study : - • This study found (114) specimens were positive out of (180) specimens (63%).• No significant difference in isolation of (PV) taken from males and females ,The male to female ratio in (PV) isolation was 1 : 1 .• In comparison, the recovery rate of (PV) due to age of children was found to be the greater proportion and was 83.3%for children within age 8 - 10 month.• Significant difference in isolated (PV) due to during seasons ,the greater percentage was 74.6% during summer .• In Comparison, the recovery rate of (PV) in different cell lines revealed that L20B cell provided the best recovery rate (93%) from fecal samples , differing significantly from the other cell lines (P< 0.05) .• Significant difference in speed recovery of PV in different cell lines , recovery of L20B cell provided the faster recovery rate , significant difference (p > 0.05) of detecting PV between L20B and RD cell at day 3 and between RD and Hep - 2C cell (p > 0.05) at day 5;whereas more significant difference (p > 0.05) in the detection of PV between L20B and Hep - 2C found at day 5.• In neutralization test,it was found the poliovirus type (PV1)was more frequent (60%) than (PV3) (27%)but in this study can’t isolated (PV2), in this study found other (ENs) (13%). • In comparison, the recovered (PV) and other (EVs) in different cell lines ,showed that L20B cell was the best in the recovery rate (100%) for the isolation of (PV) while did not isolation of (EVs),RD in rate (90%) for (PV) while Hep - 2C isolation (PV) in rate (71%),and (ENs) in rate (29%).• In SDS - PAGE Electrophoresis, in this study distinguish 4 bands for polypeptide of (PV), but this result didn't show any difference between strains of (PV) which isolation from stool specimens and wild type. In conclusion the T.C. technique used for detection of ( PV) from stool specimens , the L20B cell was superior to isolation of (PV) without isolation of (EVs) and therefore established a first line of clinical diagnostic test for the detection of (PV) from stool specimens during AFP surveillance and Environmental surveillance in the initiation of eradication of Poliomyelitis. and in conclusion that the (PV1) was widespread in Environment .

تاثير المستخلصات المائية والكحولية لنباتي سم الفراخ والقريص على بعض عوامل الضراوة والدنا البلازميدي لبكتريا Pseudomonas aeruginosa المعزولة محليا == The Effect of aqueous and alcoholic extracts of Withania somnifera (L.) Dun. and Urtica urens (L.) in some virulence factors and plasmid DNA in local isolates of Pseudomonas aeruginosa

اسم المؤلف: ديمة نزار فرج باصات
اسم المشرف: لينة عبد الكريم الامير
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2006
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: جمعت (50) عزلة لبكتريا Pseudomonas aeruginosa من (110) عزلة من مصادر عزل مختلفة (الجروح ، والحروق ، والاذن ، والادرار ، والدم) لمرضى في مستشفيات اليرموك ، والكندي والعلوية للاطفال ، وقد تبين ان (44 %) من العزلات كان مصدرها الجروح و(20 %) لكل من الادرار ، والاذن و(12%) للحروق ، و(4 %) لعينات الدم.وعند التحري عن المقاومة لمضادات الحياة وجد ان (68 %) من العزلات اظهرت مقاومة متعددة لـ (6 - 9) مضادات و(26 %) من العزلات كانت مقاومة لـ (1 - 5) مضادات و(6 %) من العزلات مقاومة لـ (10 - 12) مضادا وتوزعت العزلات المقاومة ضمن (33) نمط مقاومة لمضادات الحياة.وعند التحري عن انتاج بعض عوامل الضراوة لبكتريا P. aeruginosa تبين ان (82 %) من العزلات منتجة لانزيم الهيمولايسين و(74 %) منتجة لانزيم الايلاستيز و(66 %) منتجة لانزيم اليوريز ، وكانت المجموعة السائدة هي المنتجة للعوامل الثلاثة معا ، مما يدل على اهمية هذه العوامل في ضراوة البكتريا كما تبين ان هناك ارتباطا بين انتاج انزيم الايلاستيز والهيمولايسين.اختيرت عزلتان احداهما مقاومة لاحد عشر مضادا من اصل 12 مضادا منتجة لعوامل الضراوة الهيمولايسين ، والايلاستيز ، واليورييز (PD1) والاخرى حساسة (مقاومة لاربعة مضادات من اصل 12 مضادا) ومنتجة للايلاستيز والهيمولايسين وغير منتجة لليوريز (PD2).وعند التحري عن وجود البلازميدات وجد ان العزلة المقاومة (PD1) تمتلك بلازميدا واحدا والعزلة الحساسة (PD2) لا تمتلك بلازميدا.حدد التركيز المثبط الادنى للمستخلصات المائية والكحولية لنباتي سم الفراخ Withania somnifera L. Dun. ، والقريص Urtica urensi L. تجاه بكتريا P. aeruginosa (للعزلتين (PD1,PD2وكان التركيز المثبط الادنى لمستخلص سم الفراخ المائي (175) ملغم / مللتر ، والكحولي (5) ملغم / مللتر ، والتركيز المثبط الادنى لمستخلص القريص الكحولي (25) ملغم / مللتر ، اما المستخلص المائي للقريص فلم يكن له اي تاثير تثبيطي في نمو البكتريا حتى التركيز (175) ملغم / مللتر.درس تاثير المستخلصات في التراكيز تحت التركيز المثبط الادنى تجاه تثبيط بعض عوامل الضراوة للبكتريا وكان مستخلص سم الفراخ المائي والمستخلص الكحولي مثبطا لانزيم الهيمولايسين ومضعفا للايلاستيز ولم يكن لهما تاثير في انتاج اليوريز عند التراكيز (100 ، 125 ، 150) ملغم / مللترللمستخلص المائي والتراكيز (2 ، 3 ، 4) ملغم / مللتر للمستخلص الكحولي ، اما مستخلص القريص المائي والمستخلص الكحولي فكان لهما تاثير مثبط للايلاستيز ومضعف للهيمولايسين ولم يؤثرا في انتاج اليوريز عند التراكيز (125 ، 150 ، 175) ملغم / مللتر للمستخلص المائي وعند التراكيز (10 ، 15 ، 20) ملغم / مللتر للمستخلص الكحولي.لم يكن لاي مستخلص نباتي من المستخلصات المستعملة تاثير في تحييد البلازميد للعزلة PD1 عند التراكيز تحت المثبطة ، لكن عند تحليل الدنا البلازميدي باستخدام الاشعة تحت الحمراء وجد ان مستخلصي سم الفراخ المائي عند التركيز (150) ملغم / مل والكحولي عند التركيز (4) ملغم / مللتر احدثا تغييرا في مواقع جذر NH+3 ولايون C=O عند الحزمة 2000 - 3100 سم - 1 ، والحزمة 1649 سم - 1 على التوالي. اما مستخلص القريص المائي عند التركيز (175) ملغم / مللتر والكحولي عند (20) ملغم / مللتر فقد احدث تغييرا في موقع جذر NH3+ عند الحزمة 2000 - 3100 سم - 1 وايون C=O عند 1649 سم - 1 واحدثت تغييرا في شدة الحزمة عند 1022 سم - 1 والتي تعود الى مجموعة PO2 - ويمتاز المستخلص المائي بانه احدث تغييرا في دنا البلازميد البكتيري بظهور حزمة جديدة عند 810 - 690 سم - 1 وتعود لمجموعة PO2 - ايضا. وهذا يشير ايضا الى احتمال تاثير تلك المستخلصات النباتية على الوضعية العامة لجزيئة الـ DNA من ناحية التركيب الثانوي وبالتالي على بعض ادواره الوظيفية الحيوية. | Pseudomonas aeruginosa was isolated from various clinical specimens including : wound , burn , ear , urine and blood , collected from patients hospitalized in Yarmouk , Al - Kindy and Al - Elweia for children hospital,A total of (50) (out of 110) isolates were obtained of which (44 %) were isolated from wounds , (20 %) from urine and ear infections , (12 %) from burns and (4 %) from blood specimen.Antibiotic resistant tests have indicated that (68 %) of P. aeruginosa isolates were multiresistant to (6 - 9) antibiotics and (26 %) were resistant to (1 - 5) antibiotics and (6 %) were resistant to (10 - 12) antibiotics , P. aeruginosa isolates exhibited (33) antibiogram patterns.Detection of some virulence factors production by these isolates indicated that (82 %) were producers of hemolysin, (74 %) were elastase producers and (66 %) were urease producers. The group producing all three virulence factors was dominant.Two isolates were selected , the first isolate (PD1) was resistant to (11) antibiotics , and produced hemolysin , elastase and urease , the second isolate (PD2) was resistant to (4) antibiotics only (out of 12) and produced hemolysin , elastase but not urease.Screening for plasmid DNA indicated that the resistant isolate (PD1) had a single plasmid , while the sensitive isolate (PD2) had no plasmid.Minimum inhibitory concentration (MICs) of the aqueous and ethanolic extracts of both (whole) plants Withania somnifera (L.) Dun. and Urtica urens L., were determined towards P. aeruginosa (PD1,PD2), Results obtained showed that MIC of ethanolic extract of W. somnifera was (5) mg / ml and of aqueous extract was (175) mg / ml. The MIC for the ethanolic extract of U. urens was (25) mg / ml , while the aqueous extract had no inhibitory effect towards P. aeruginosa up to (175) mg / ml.The effect of Sub - MICs of the aqueous and ethanolic extracts of both plants on the production of hemolysin , elastase and urease was investigated. Sub - MICs of the ethanolic and aqueous extract of W. somnifera had an inhibitory effect on hemolysin production and a suppressing effect on elastase but no effect on urease production at 100 , 125 , 150 mg / ml for the aqueous extract and 2 , 3 , 4 mg / ml for the ethanolic extract.Sub - MICs of the aqueous and ethanolic extract of U. urens had an inhibitory effect on elastase production and a suppressing effect on hemolysin , but no effect on urease production at 125 , 150 , 175 for the aqueous extract and 10 , 15 , 20 mg / ml for the ethanolic extract.The electrophoresis of plasmid DNA isolated from bacterial cell treated with plant extracts indicated that neither W. somnifera nor U. urens extracts had a curing effect on the plasmid at sub - MIC concentrations for PD1.Vising infrared spectroscopy spectrum showed that the sub MICs of ethanolic and aqueous extracts of . W. somnifera (4 mg / ml , 150 mg / ml) made an alteration in NH+3 groups at wave band (2000 - 3100) cm - 1 and C=O group at 1649 cm - 1 , while the Sub - MICs of the ethanolic and aqueous extracts of U. urens (20 mg / ml , 175 mg / ml) made changes in NH+3 , C=O and PO2 - groups at the wave bands (2000 - 3100) , 1649 , 690 - 810 cm - 1 respectively. These results indicate the possible effect of plant extracts on the conformation of the DNA molecules affecting some of its biological functions.

دراسة مقارنة بين الشكلين الحلزوني والمكور في بكتريا Helicobacter pylori المعزولة من مرضى مصابين بقرحة الاثنى عشر

اسم المؤلف: حلا مؤيد رديف
اسم المشرف: ضحى سعد صالح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2006
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: هدفت الدراسة الى عزل بكتريا Helicobacter pylori من المرضى المصابين بقرحة الاثنى عشر ودراسة ظاهرة تحول الخلايا من الاشكال الحلزونية الى الاشكال المكورة والعوامل المؤثرة ، وقد بينت النتائج ان مكونات الوسط الزرعي والضوء والاوكسجين من اهم العوامل التي تساعد على عملية تحول الاشكال الحلزونية الى الاشكال المكورة لجرثومة H. pylori . خلال مدة الحضن والخزن , فقد لوحظ عند استخدام وسط اغار نقيع الدماغ - القلب ، ووسط اغار الدم الاساسي المضاف اليهما دم بشري متحلل بنسبة ( %5) ، واضافات النمو يتم الحصول على الاشكال المكورة بنسبة اقل مما لو استخدمت الاوساط الزرعية ذاتها لكن بدون اضافة الدم واضافات النمو. وللمحافظة على حيوية جراثيم الهيليكوبكتر وعلى شكلها الحلزوني لمدة زمنية اطول قد تصل الى (30 - 20) يوما عند خزنها بدرجة حرارة (4)مo , يجب عدم تعريض الاوساط الزرعية الى الضوء والاوكسجين بنسبة اعلى من ( %6 ) ، كذلك مراعاة ان تكون باءهاءpH)) الوسط .( 8 - 6.9 ) سجل لاول مرة في القطر تمكن بعض الاشكال المكورة من التحول الى الاشكال الحلزونية عند استخدام وسط اغار نقيع الدماغ - القلب، ووسط المولرهنتون، ووسط مرق البروسيلا، ووسط اغار الحليب، ووسط اغار الـﭼوكليت ،ووسط اغار الماكونكي ، ووسط التربتون سوي بروث( Trypton Soy Broth ) . اذ اضيف الى قسم من الاوساط المستخدمة ( %5 ) دم بشري متحلل واضافات النمو ، كذلك سجل لاول مرة في القطر تمكن بعض الاشكال المكورة من التحول الى الاشكال الحلزونية عند استخدام الفئران واستخدام خنازير غينيا ( Guinea - pigs ) بشكل افضل من استخدام الاوساط الزرعية الصلبة والسائلة مع مراعاة اعطاء الحيوان جرعة لقاح بحجم ( 0.1 ) ملليلتر , ولوحظ ضرر نسيجي عند دراسة المقاطع النسيجية للمعدة ، اذ اشارت الدراسات السابقة الى عدم قدرة تحول الاشكال المكورة الى الاشكال الحلزونية عند استخدام الحيوانات المختبرية. اوضحت النتائج ان المحتوى الكيميائي للاشكال المكورة في بكتريا H. pylori يختلف عن المحتوى الكيميائي للاشكال الحلزونية للبكتريا نفسها بعد معاملتها بحامض الكبريتيك المركز وهيدروكسيد البوتاسيوم ، الشيء الذي يعكس حدوث تغيرات في الجدار الخلوي خلال عملية تحول الاشكال الحلزونية الى الاشكال المكورة . كما بينت النتائج ان الاشكال المكورة اقل كثافة من الاشكال الحلزونية ، بسبب قلة نسبة الببتيدوكلايكان ، واضمحلال المكونات الخلوية وفقدانها نتيجة حدوث تغيرات في الجدار الخلوي وتلف الغشاء الهيولي Cytoplasmic membrane) ) . اظهرت الدراسة ان محتوى الاشكال المكورة العائدة الى H. pylori من الحامض النووي الديوكسي رايبوز DNA ) Deoxyribo nucleic acid ) ، والحامض النووي الرايبوزي RNA ) Ribonucleic acid ) اقل مما هو موجود في الاشكال الحلزونية للجرثومة نفسها . عند دراسة انظيم اللايسوزايم Lysozyme ومادة EDTA كلا على حدة ، وكذلك انظيم اللايسوزايم ومادة EDTA معا في الاشكال الحلزونية العائدة الى جرثومة H. pylori , كان التاثير اكثر بكثير قياسا مع الاشكال المكورة للجرثومة نفسها ، وذلك لقلة نسبة الببتيدوكلايكان في جدران الاشكال المكورة ، او لفقدان مواقع في الببتيدوكلايكان حساسة الى انظيم اللايسوزايم . وقد لوحظ ان المنظفات الايونية مثل مادة SDS والمنظفات اللاايونية مثل مادة Triton X - 100 تسببان تحلل عزلة H. pylori بشكليها الحلزوني والمكور , الا ان التراكيز الواطئة من مادة SDS تكون اكثر فعالية من التراكيز العالية من مادة Triton X - 100 في تحلل الجرثومة بشكليها الحلزوني والمكور. شوهدت الاشكال الحلزونية والاشكال المكورة لجرثومة H. pylori والاشكال التي تظهر خلال تحول الاشكال الحلزونية الى الاشكال المكورة عند استخدام المجهر الالكتروني الناقل , وقد لوحظت اشكال مختلفة من الاشكال المكورة تملك سوطا واحدا او سوطين . وسجل لاول مرة امتلاك الاشكال المكورة العديد من الاسواط ، وذلك عند تصوير العزلات بالمجهر الالكتروني الناقل. في حين اشارت الدراسات السابقة الى امتلاك الاشكال المكورة سوطا واحدا او سوطين فقط . وقد بينت نتائج دراسة التركيب الدقيق باستخدام المجهر الالكتروني ظهور الاشكال المتعددة للجرثومة ( العصوي ، والعصوي المنحني ، والملتوي ) فضلا عن ملاحظة النهاية المستديرة للجرثومة والتوزيع المتجانس للمكونات السايتوبلازمية والصباغية ( Chromatic Contents ) في داخل الخلية الجرثومية والسطح الناعم للجرثومة ، كما تم مشاهدة السياط المميزة لهذه الجرثومة التي تميزت بكونها مغمدة ( Sheathed ) وحاوية على انتفاخ ( تثخن ) في نهاية السوط الذي يشبه الهراوة . | The study aimed to isolate the Helicobacter pylori bacteria from patients who have duodenum ulcer and study the phenomenon of cell transformation from spiral shapes to cocci shapes and the influencing factors. The results showed that the component of the agricultural environment, light, and oxygen are the most important factors that help in the process of transformation from the spiral shapes to cocci bacterial shapes of H. pylori during the incubation and the storage period. It had been noticed that when using Brain - Hart infusion agar and Blood - Base agar with the addition of decomposed human blood by a percentage of (5%) with growth supplements, we get cocci shapes with a percentage less than that when we use the same agricultural media without adding the blood and the growth supplements. To maintain the activity of the H. pylori and its spiral shape for a longer period of time which can go up to (20 - 30) days when stored at 4 Co , we must not exposure the agricultural media to light and oxygen with a percentage higher than 6% and also thepH must be (6.9 - 8). For the first time, it had been recorded that some cocci shapes can transform to spiral shapes when using Brain - Hart infusion agar, Muller - Hinton agar, Brucella agar, Milk agar, Choclate agar, Maconcky agar, and Trypton Soy Broth, if we add to some of the used media (5%) of decomposed human blood and growth supplements. While, the previous studies mentioned that it is not possible for the cocci shapes to transform to spiral shapes when using cultural media. Also, it had been recorded for the first time that some of the cocci shapes can transform to spiral shapes when using mice and Guinea - Pigs, in a better way than using the solid and liquid cultural media taking into consideration giving the animal a dosage of vaccine of size (0.1) ml. Tissue damage had been noted when studying the tissue sections for stomach, while previous studies mentioned that it is not possible for the cocci shapes to transform to spiral shapes when using laboratory animals. The results show that the chemical content of the cocci shapes in the H.pylori bacteria is different from the chemical content of the spiral shapes of the same type of bacteria after treating it by concentrated sulfuric acid and potassium hydroxide, which reflect that changes had took place in the cell wall during the process of transformation from spiral shapes to cocci shapes. The results also showed that the cocci shapes are less density from the spiral shapes due to shortage of Peptidoglycan and the vanishing of the cellular components and the loss of these cellular components due to the changes that took place in the cell wall and the damage of the Cytoplasmic membrane. The study showed that the contents of the cocci shapes of the H.pylori from the Deoxyribo Nucleic Acid (DNA) and from the RiboNucleic Acid (RNA) is less than that of the spiral shapes of the same bacteria. When the Lysozyme and EDTA had been studied separately and also the Lysozyme and the DETA together in the spiral shapes of the H. pylori bacteria, the effect was much more when compared with the cocci shapes of the same bacteria, and that is due to the shortage of Peptidoglycan in the walls of the cocci shapes or due to the loss of Peptidoglycan positions sensitive to the Lysozyme. It had been noted that the ionic detergents such as the SDS and the non - ionic detergents such as Triton X - 100 are causing the analysis of the H. pylori isolation in both the cocci and spiral shapes, but the low concentrations of SDS is more efficient than the high concentration of the Triton X - 100 in the analysis of the bacteria in both of its cocci and spiral shapes. The spiral shapes and the cocci shapes of the H. pylori bacteria and the shapes that appears during the process of transformation from spiral shapes to cocci shapes had been observed when using the Transmission Electronic Microscope (TEM) , also different cocci shapes had been observed that have one and two flagellum. It had been recorded for the first time that the cocci shapes have more than one flagellum and that was during the photography of the isolations by the TEM, while previous studies mentioned that the cocci shapes have one or two flagellum only. The fine composition study using electronic microscope showed that many shapes of the bacteria appears ( rods, curved rods, and the spiral ) in addition to noticing the round end of the bacteria and the homogenous distribution of the Cytoplasmic and Chromatic contents inside the bacteria cell and the smooth surface of the bacteria, and also the flagellum that distinguish this bacteria had been observed that are distinguished by being sheathed and have inflation ( thickness ) in the end of the flagellum which looks like cudgel.

دراسة الاستجابة المناعية للنساء الحوامل وعلاقتها بالمسببات الجرثومية للالتهاب المجاري البولية == Study of Immune Response of Pregnant Women and it's Relation with Causative Pathogenes of Urinary Tract Infection

اسم المؤلف: امال عزيز كريم السعدي
اسم المشرف: غنيمة صادق محمد | ضحى سعد صالح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2005
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
المستخلص: تناولت هذه الدراسة التعرف على المسببات الجرثومية الاكثر شيوعا لاصابة النساء الحوامل بالتهاب المجاري البولية وتقييم الاستجابة المناعية بنوعيها الخلطية (Humoral) والخلوية (Cellular).جمع 124 نموذج دم وادرار موزعة على النحو الاتي : (50) نموذجا من نساء حوامل مصابات وعينات السيطرة من (50) نموذجا من نساء حوامل غير مصابات و(10) نماذج من نساء غير حوامل مصابات، و(14) نموذجا من نساء غير حوامل وغير مصابات.وقد اظهرت النتائج ان المسببات الجرثومية الاكثر شيوعا باصابتها للنساء الحوامل كانت بكتيريا Escherichia coli وبنسبة (%18.6)، تليها بالمرتبة الثانية بكتيريا Staphylococcus saprophyticus وبنسبة (%18.3).اختلفت انواع البكتيريا التي تمكن عزلها باختلاف مراحل الحمل الثلاث Trimester. وسجلت اعلى نسبة اصابة في المرحلة الثانية من الحمل تليها المرحلة الاولى ثم المرحلة الثالثة من الحمل وكانت النسبة %47) و%20 و%17) على التوالي.اظهرت نتائج الاستجابة المناعية غير المتخصصة (Non - specific) وجود زيادة بنتائج فحص النشاط البلعمي (Phagocytosis) في الدم المحيطي للنساء الحوامل المصابات وبزيادة معنوية (0.05 > P) في قابلية الخلايا البلعمية على الالتهام وفي مراحل الحمل الثلاث مقارنة مع عينات السيطرة.كما لوحظ وجود زيادة معنوية (0.05 > P) في تركيز العامل المتمم الثالث C3 في مصول النساء الحوامل المصابات.اما الاستجابة المناعية المتخصصة (Specific) فقد اظهرت انخفاضا معنويا (0.05>P) في قابلية الخلايا اللمفاوية على التحول والانقسام في الدم المحيطي وفي مراحل الحمل الثلاث وباستخدام المشطر (PHA) لتحفيز الخلايا اللمفاوية على الانقسام، مقارنة مع عينات السيطرة.اما نتائج قياس تركيز الغلوبيولينات المناعية (Immunoglobulines) في مصول مجاميع الدراسة. فقد اظهرت النتائج عدم وجود فروق معنوية في تركيز كل من الغلوبيولينات المناعية نوع A وG مع انخفاض معنوي في تركيز الغلوبيولين المناعي نوع M في مصول الحوامل المصابات مقارنة مع عينة السيطرة من النساء غير الحوامل غير المصابات | In this study, we attempted to identify the most common bacteria which causes urinary tract infection in pregnant women, and also to evaluate both cell - medicated and humoral immune responses in those women.Samples of 124 blood and urine were collected as follows : 50 blood and urine samples were taken from infected pregnant women.50 blood and urine samples were taken from non - infected pregnant women.10 blood and urine samples were taken from non - pregnant, but infected women.14 blood and urine samples were taken from non - pregnant, infected women.The results showed that E. coli was the most common causative agent of UTI in pregnant infected women (18.6%) followed by Staphylococcus saprophyticus (18.3%).In this work, different types of bacteria were isolated during the three trimesters of pregnancy. The highest percentage of infection was in the second trimester (47%), followed by the first and third trimesters (20% and 17%) respectively.Results of non - specific immune response demonstrated that there was a significant phagocytic activity increase in the peripheral blood of the pregnant, infected women during the three trimester of pregnancy when compared with the control group (P > 0.05). There was also a significant increase in the concentration of the complement component C3 in the blood of the infected pregnant women (P>0.05).While the results of specific immune response showed a significant decrease in the ability of lymphocytes to change and divide in the peripheral blood during the three trimesters of pregnancy. After using (PHA) as a stimulating agent in comparison with the control samples (P < 0.05).Results of estimation of immunoglobulin concentrations in the sera of studied groups, showed no significant differences in the concentrations of IgG and IgA, while there was a significant decrease in the concentration of IgM in the sera of infected pregnant women when compared with its concentration in the sera of the control groups i.e. non - infected and non - pregnant women

دراسة مقارنة بين العزلات المحلية لبكترياStaphylococcus epidermidis المقاومة والحساسة للمثيسلين == Comparative Study between Local Isolates of Methicillin Sensitive and Resistance of Staphylococcus epidermidis

اسم المؤلف: استبرق نبيل عبد اللطيف
اسم المشرف: مي طالب فليح
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2011
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: تم الحصول على 60 عزلة من المكورات العنقودية من 140 عينة سريريه (ادرار، مسحات اذن، مسحات انفية، جروح، عينات الدم). اثنان وثلاثون عزلة (53.3%) من العدد الكلي للمكورات العنقودية شخصت على انها عنقوديات غير مخثرة لذيفان مخثر بلازما الدمCONS)). تسعة عشر عزلة (59.38%) من CONS شملتStaphylococcus .epidermidis تم فحص الحساسية للعزلات المحلية من S. epidermid لمضاد المثيسلين, النتائج اظهرت 3عزلات من S. epidermidis حساسة للمثيسلين و16عزلة من S. epidermidis كانت مقاومة للمثيسلين، طبقا لهذه النتائج صنفت العزلات الى مجموعتين : - S. epidermidis مقاومة للمثيسلين MRSE)) وS. epidermidisحساسة للمثيسلين .(MSSE) اجري اختبار الحساسية لهاتين المجموعتين من S. epidermidis لاحد عشر مضادا حيويا، اظهرت النتائج مقاومة عالية ومتعددة ل MRSE لهذه المضادات بينما MSSE كانت عالية الحساسية، حيث اظهرت الMRSE حساسية 100% لمضاد vancomycinفقط. وتراوحت نسبة مقاومتها للمضادات penicillin G100% وclindamycin75% وamoxicillin 68.7% وamoxicillin clavulinic acid 68.7% وtetracyclin56.2% وrifampin 56.2% وcephalexin56.2% وerythromycin50% وciprofloxacin50% وgentamicin 43.7%. بينما اظهرتMSSE حساسية 100% لمضاد gentimicinو rifampin وclindamycin وciprofloxacin وvancomycinونسب مختلفة من المقاومة للمضادات الاخرى، اذ كانت نسبة مقاومة MSSE لمضاد amoxicillin وamoxicillin clavulinic acid وcephalexinو erythromycinو penicillin G و.%33 tetracyclin تم التحري عن انتاجية MSSEو MRSE لبعض عوامل الفوعة شملت الهيمولايسين والبروتييزواللايبيزواليورييزوالجيلاتينييزوانزيم المحلل للحامض النوويDNA اظهرت النتائج انMRSE تمتلك نسبة انتاجية لهذه عوامل الفوعة اعلى منMSSE . حيث ان نسبة انتاجية هيمولايسين، البروتييز، اللايبيز، اليورييز، الجيلاتينييز وانزيم المحلل للحامض النووي DNA فيMRSE كانت80%، 100%، 80%، 100%، 60%، و30% على التوالي، بينما كانت نسبة الانتاجية لهذه العوامل في MSSE 67%، 100%، 67%، 100%، 33% و33% على التوالي. تم تحديد التراكيز المثبطة الدنيا للمضادات penicillinو .tetracyclin اذ كانت قيم التراكيز المثبطة الدنيا للعزلة 32S هي 60 وحدة للبنسلين و25مايكروغرام/مل للتتراسايكلين، 40 وحدة للبنسيلين للعزلة .40S تم دراسة امراضية MRSE وMSSE باختبار سميتها باستخدام ذكور الفئران البيض السويسرية، وكانت الاعداد البكتيرية المستخدمة هي (108،109، 1010 ،1011 ،1012) cfu/ml والتي تم حقنها داخل بريتون الفئران. لم تسجل اي نسبة قتل بكل التراكيز المستخدمة ل MSSE بينما بلغت نسبة القتل 33% بالتراكيز1010 و11 10 cfu/ml لMRSE. درست التغيرات النسيجية في انسجة الكبد، الطحال، الكلى، الرئة والقلب لذكور الفئران المحقونة ب MSSE و.MRSE لوحظ ان التاثيرات النسيجية التي سببتها MRSE كانت اعلى من تلك التي سببتهاMSSE . اكثر الاعضاء تاثرا نتيجة حقنMSSE وMRSE هما الرئة والكلى واللتان سبتتا نسبة عالية من النخر بهذين العضوين وكان التاثير اقل في الطحال والكبد من الرئة والكلى، ولم يظهر اي تاثير في قلب الفار المحقون بMSSE لكن هناك بعض التاثيرات في قلب الفار المحقون بMRSE. اظهرت نتائج الترحيل الكهربائي لعزلتيMSSE ( 51S و(5Sبانها لا تمتلك اي بلازميد بينما عزلتانMRSE تمتلك بلازميدات، كما لوحظ وجود بلازميدان في عزلة 40S احداهما بلازميد كبير والاخر صغير في حين ان العزلة الاخرى من MRSE 32S تمتلك 3 بلازميدات واحد منها كبير واثنان صغيران. اظهرت نتائج تحييد البلازميد باستخدام SDSو Rifampin ان بلازميدات العزلتين 32S)، (40S قد حييدت عند المعاملة ب100مايكروغرام/مل، 230مايكروغرام/مل من SDSعلى التوالي، 150مايكروغرام/مل، 200مايكروغرام/مل من Rifampinعلى التوالي. اظهرت الخلايا المحييدة للعزلة 40S حساسية للبنسيلين وبقاء المقاومة للمثيسلين كما اظهرت الخلايا المحييدة للعزلة 32S حساسبة للبنسلين وتتراسايكلين واحتفاظ البكتريا بمقاومتها للمثيسلين. | Sixty isolates of Staphylococcus were obtained from one hundred forty clinical specimens (urine, ear swabs, nasal swab, wound, and blood). Thirty two isolates (53.3%) of total number of Staphylococcus were identified as coagulase - negative staphylococci (CONS), nineteen isolates(59.38%) of CONS were included Staphylococcus epidermidis. Sensitivity of local isolates of S. epidermidis was examined against methicillin, the results showed 3 isolates from S. epidermidis were sensitive to methicillin and 16 isolates from S. epidermidis were resistance to methicillin, according to these results the isolates were splits to two groups : - methicillin resistance S. epidermidis (MRSE) and methicillin sensitive S. epiderimidis (MSSE). The sensitivity test of these two groups against 11 different antibiotics was done, the results showed MRSE were highly resistance and multi resistance patterns to these antibiotics, while MSSE showed highly sensitive. In MSSE showed 100% sensitivity to gentimicin, rifampin, clindamycin, ciprofloxacin and vancomycin, and different percentage of resistance to other antibiotics. The resistance percentage of MRSE to pencillin G 100%, clindamycin 75%, amoxicillin 68.7%, amoxicillin clavulinic acid 68.7%, cephalexin 56.2%, rifampin 56.2%, tetracyclin 56.2%, erythromycin 50%, ciprofloxacin 50%, gentamicin 43.7%. the resistance percentage of MSSE to amoxicillin, amoxicillin clavulinic acid, cephalexin, erythromycin, penicillin G and tetracyclin were 33%. While in MRSE showed 100% sensitivity to vancomycin only. Some virulence factors of MRSE and MSSE were detected including the hemolysin, protease, lipase, urease, gelatinase and DNase the results showed MRSE have higher percentage to produce these virulence factors than MSSE. The production percentage of hemolysin, protases, lipase, urease, gelatinase and DNase in MRSE was 80%, 100%, 80%, 100%, 60% and 60% respectively, while in MSSE 67%, 100%, 67%, 100%, 33% and 33% respectively. The minimum inhibitory concentration of antibiotics (penicillin and tetracyclin) to S. epidermidis isolate had been determined. they were 60U and 25µg/ml respectively for the isolate 32S, they were 40U of penicillin for the isolate 40S. The pathogenicity of MRSE and MSSE was studied by testing its lethality by using white Swiss male mice, the bacterial numbers was used that is (108,109,1010,1011,1012) cfu/ml and was injected in mice. Died of injected mice was not recorded with any used concentration in MSSE but in MRSE 33.3% of injected mice was killed in concentration 1010 and 1011 CFU/ml. Histological changes in liver, spleen, kidney, lung and heart tissues of male mice which were injected with MRSE and MSSE were studied. The histological effect were produced by MRSE was higher than those produced by MSSE. The most effective of MRSE and MSSE in lung, kidney because appeared of high necrosis in these organs but in spleen, liver of mouse were less effected from lung and kidney, in heart of mouse injected with MSSE no effect was recorded while in MRSE some effect have been seen. Results from agarose gel electrophoresis showed two isolates of MSSE 5S and 51S don't have any plasmid while other two isolates of MRSE have plasmids, two plasmids found in S. epidermidis isolate (40S), one of them was large plasmid and the other was small plasmid and in S. epidermidis isolate (32S) contained three plasmids, one from these was large plasmid and the other two plasmids were small plasmids. The results of plasmid curing by using sodium dodecyl sulphate (SDS) and rifampin showed that the plasmids of the local isolates 32S and 40S was curred by treatment with 100μg/ml, 230μg/ml respectively from SDS and 150μg/ml, 200μg/ml respectively from rifampin. Cured cells from 40S isolate (MRSE) were sensitive to penicillin and still resistance to methicillin and the cured cells from 32S isolate were sensitive to penicillin, tetracycline and still resistance to methicillin

دور بروتين A المستخلص من جدران خلايا Staphylococcus aureus في امراضية البكتريا == Role of Staphylococcus aureus cell wall protein A in the pathogenesis of the bacteria

اسم المؤلف: سمير عبد الامير عبد علي علـش
اسم المشرف: رشيد محجوب مصلح | علي عبد الرحمن طه
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2008
الموضوع الدقيق: الاحياء المجهرية
الدرجة: دكتوراه
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: ا عتمد في اجراء هذه الدراسة على 20 عزلة مرضية من بكتريا Staphylococcus aureus ا خذت من مختبر الصحة المركزي مشخصة باستعمال نظام ابي للعنقوديات (API - Staph . Ident . System) . ا عيد تشخيص جميع العزلات عن طريق استخدام الاختبارات الكيموحيويه من اجل التثبت بشكل دقيق من هويتها ، وقد جاءت العزلات جميعها متوافقة مع تشخيص مختبر الصحة المركزي . ا ستخدم اختبار التلازن الدموي ( (Haemagglutination test في التحري عن وجود بروتين A في عزلات S . aureus المشخصة جميعا ، وقد اظهر هذا الاختبار تباينا ملحوظا في نسبة امتلاك هذه العزلات لبروتين A . فقد برزت العزلات ذوات الارقام 1 ، و5 ، و6 ، و7 ، و9 بوصفها عزلات ذات محتوى عال من بروتين A . اما العزلات ذوات الارقام 8 ، و10 ، و11، و12، و13، و14 ، و15، و17، و18، و19 ، و20 ظهرت انها ذات محتوى متوسط من بروتين A . فقط العزلة ذات الرقم 16 ظهرت انها فقيرة المحتوى من بروتين A . بينما كشف ووفق الاختبار المستعمل عدم امتلاك العزلات 2، و3 ، و4 اي محتوى من بروتين A . ا نتخبت العزلة رقم ( 1 ) كعزلة مثالية من اجل انجاز هذه الدراسة لكونها تميزت بمحتوى عال من بروتين A فضلا عن انها تقدمت على بقية العزلات في اعطاء النتيجة الموجبة لاختبار انتاج انزيم Coagulase ، وكذلك في اظهار تحللا كاملا وشديدا في اختبار انتاج حالة الدم Hemolysin . ا ستخلص بروتين A الخام (Crude protein A) على مرحلتين . كانت المرحلة الاولى باتباع طريقة (Lind , (1974 ( طريقة التعليق بالصوديوم ازايد ) بوصفها طريقة سهلة وغير مكلفة في الحصول على مستخلص بروتين A المرتبط بجدار الخلية العنقودية للعزلة رقم ( 1 ) (Cell - bound protein A) بشكل كامل مع الحفاظ وبدرجة عالية على وحدة التركيب البنائي لبروتين A من اية تشوهات . اما المرحلة الثانية كانت باتباع طريقة ( Seki et al .,( 1985 طريقة مكملة للطريقة الاولى وذلك بترسيب بروتين A الطافي بكبريتات الامونيوم ( 85 % اشباع ) مع بقاء بروتين A المترسب محتفظا بفعاليته . ا دخل مستخلص بروتين A الخام عملية التنقية ( Purification) وهي كذلك كانت على مرحلتين . المرحله الاولى استخدمت فيها طريقة كروماتوغرافيا التبادل الايوني (Ion - exchange chromatography) بعمود ( DEAE - Cellulose ). اما المرحلة الاخرى فقد تضمنت استخدام طريقة كروماتوغرافيا الترشيح بالهلام (Gel - filtration chromatography) بعمود Sepharose CL - 6B) ) . انتهى استخدام الطريقتين في الحصول على مستخلص بروتين A منقى ( Purified protein A ) .ومن اجل التحري عن احتفاظ مستخلص بروتين A الخام والمنقى بفعاليته استخدم اختبار الانتشار المناعي الثنائي في الهلام الذي اعطى نتيجة موجبة بتكون الخطوط الترسيبية التي نتجت من تفاعل مستخلص بروتين A الخام والمنقى مع IgG لمصل دم خنزير غينيا .قدر تركيز مستخلصات بروتين A ( الخام والمنقى جزئيا والمنقى ) باتباع طريقةBradford, ( 1976 ) . حيث بلغت التراكيز 63 مايكروغرام / مليلتر لمستخلص بروتين A الخام ، و42 مايكروغرام / مليلتر لمستخلص بروتين A المنقى جزئيا ، و36 مايكروغرام / مليلتر لمستخلص بروتين A المنقى .تم استخدام الفئران البيض من نوع ( Balb C ) من اجل الوصول الى التاثيرات المرضية لمستخلص بروتين A المنقى . حيث حقن المستخلص بطريقة الحقن داخل البريتون Intraperitonial injection)) بعدد سبع حقنات ، وبمعدل 0.1 مليلتر لكل حقنة ( ذو التركيز 36 مايكروغرام / مليلتر ) ، يفصل بين حقنة واخرى يوم واحد . اظهرت مجموعة فئران البحث المحقونة ببروتين A المنقى على المستوى السريري خمولا عاما بدا واضحا بعد الحقنة السادسة . لم تظهر اية تغيرات مظهرية جلدية في مناطق الحقن كما لم تحدث وفيات . بعد قتل الفئران وتشريحها جميعا ا ستاصلت اعضاء القلب ، والطحال ، والكبد ، والكليتين ، والامعاء ، والمعدة ، واخيرا الرئة . وبالموازنة مع اعضاء فئران السيطرة لوحظ حدوث تضخم كبير في الطحال . كما اظهر الكبد تضخما ملحوظا وهذا سجل في الفئران المحقونة ببروتين A المنقى . لم يسجل حدوث تغيرات على المستوى المظهري في اعضاء القلب ، والامعاء ، والمعدة ولكن لوحظ وجود بقع سوداء اللون على السطح الخارجي لنسيج الكبد ، والكليتين ، وهو ايضا سجل في فئران الدراسة اجمع .اهم ما برز في هذه الدراسة هو حجم التاثير المرضي الذي اصاب عضو الرئة حيث ظهر بشكل غريب فقد بدا النسيج يميل الى السواد ببهوت وهو ما كان واضحا في سبعة من فئران الحقن ، اما الثلاثة الباقية شوهدت الرئة فيها خلال التشريح وهي مغطاة بعض من اجزائها بالدم .كشف الفحص النسيجي لاعضاء القلب ، والامعاء ، والمعدة عدم وجود اية تاثيرات مرضية ناتجة من حقن بروتين A المنقى . اما الطحال فقد شهد حدوث توسع كبير في منطقة اللب الابيض White Pulp)) مع احتقان دموي بارز وانتشار للخلايا المولدة للصفيحات الدموية (Megacaryocytes) . اما الكبد فقد برز فيه حدوث تلف بسيط (Mild degenerative change) في خلايا الكبد مع ارتشاح خلايا احادية النواة (Monocytes) خصوصا في المنطقة البوابية التي بدت متوسعة نوعا ما . كما لوحظ زيادة في خلايا كبفر ((Kupffer cells في عموم نسيج الكبد . الكليتين شهدت بروز زيادة في الخلايا المكونة للكبيبة الكلوية ( Glomeruli) والتي يطلق عليها ( Mesengial cells ) .عضو الرئة تضمن الفحص النسيجي له تاثيرات عدة وهي كما يلي : 1 - احتقانات دموية كبيرة ( Bloody congestions ) .2 - وذمة ( Oedema ) .3 - ارتشاح خلايا التهابية ( Inflammatory cells infiltration) .4 - توسع في الفسح القصبية ( Alveolar spaces) مكونا ما يسمى بظاهرة Emphysema)) اي انتفاخ حويصلات الرئة . بدت الرئة للفئران المحقونة جميعا ببروتين A المنقى اكثر الاعضاء التي اظهرت تضررا نسيجيا كبيرا موازنة بالضرر في بقية الاعضاء .تم اجراء اختبار التحري عن السمية الخلوية لبروتين A المنقى باستخدام تقنية مزرعة الخطوط الخلوية الطبيعية ( Normal cell lines - culture ) حيث اعطى الاختبار نتيجة سالبة اي عدم امتلاك بروتين A المنقى تاثيرا سميا (Toxic effect) في الخلايا النامية . | This study dealt with ( 20 ) diagnosed isolates of Staphylococcus aureus by "API - Staph . Ident . System". which were taken from the central health laboratory . The diagnosis was repeated so as to confirm the identity of those isolates by using biochemical tests whose results were the same as those of the central health laboratory .The haemagglutination test was used to investigate the presence of protein ( A ) in all S . aureus isolates . The results markedly showed differences in content concerning the ratio of this protein , thus isolates numbered 1 , 5 , 6 , 7 and 9 gave high content of protein ( A ) , but the isolates numbered 8 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 17 , 18 , 19 and 20 gave medium content of protein ( A ) . Isolate numbered 16 was the only isolate that has low content of protein ( A ) . On the other hand , isolates numbered 2 , 3 and 4 gave no content of protein ( A) .The isolate number ( 1 )has been chosen as an optimal isolate to accomplish this study , Because of its high content of protein ( A ) , furthermore it was the best isolate in getting positive result concerning the test of coagulase production , and in giving a complete and intensive result concerning the test of hemolysin production . Crude protein ( A ) was extracted by two steps : Lind method ( Lind , 1974 . ) "Suspending in sodium azide" was followed at the first step as an easy and a cheap method in getting a thorough cell - bound protein ( A ) extracted from the isolate number ( 1 ) with high preservation of the structural unit without any deformation .The Seki et al .,( 1985 ) method was followed in the second step as a completion method to the first one , by the precipitate of the supernatant protein ( A ) using ammonium sulfate ( 85 % saturation ) . The function of precipitated protein ( A ) was perfect . In order to get a purified protein ( A ) extract from crude protein A , purification was accomplished by two steps : Ion - exchange chromatography by DEAE - cellulose column was used in the first step , While Gel - filtration chromatography by Sepharose CL - 6B column was used in the second step . Double immunodiffusion in gel was used to investigate the preservation of the crude and purified protein ( A ) with its full function . This test gave a positive result by forming the precipitate lines as a result of the interaction between protein ( A ) ( Crude and Purified ) and IgG of guinea pig sera .Bradford method was used to estimate protein ( A ) extracts concentration ( Crude , Partial purified , Purified ) . The estimation was 63 microgram / ml for crude extract , 42 microgram / ml for partial purified extract and 36 microgram / ml for purified extract .white mice ( Balb C ) were used to investigate the pathogenic effects of purified protein ( A ) . Intraperitonial injection method was used to inject 0.1 ml of 36 microgram / ml of purified protein ( A ) for 7 times with a one - day separating period . The injected mice with purified protein ( A ) showed general weakness which was very clear after the sixth injection . there were no phenotypic dermal change in the injection area , and no dead mice as well .After killing and dissecting of all the mice , the organs of heart , spleen , liver , kidney , intestine , stomach and lung were eradicated . There were a great enlargement in spleen and a little in liver in all injected mice in comparison with the control mice . No phenotypic changes appeared in heart , intestine and stomach , but black spots were shown on the outer surface of kidney and liver tissue which were presented in all the injected mice . The most important results in this study is the great size of pathogenic effects in lung . The shape of its tissue seemed strange and tended to be faint black with which was obvious in seven mice . The lung of the three others ( some parts ) showed during anatomy covered by blood .The histological check for heart , intestine and stomach showed no pathogenic effects resulted from protein ( A ) injection . In the spleen , there was a huge expanding in the white pulp region , with blood congestion while the spreading of megacaryocytes has increased . The liver showed mild degenerative change in liver cells with monocytes infiltration especially in the entrance region which appeared expanded . Also there was an increase in kupffer cells in all liver tissue .Kidney showed increase in mesengial cells which are concedered the forming units of glomeruli .The histological check of lung included the following : 1 - Bloody congestions .2 - Oedema .3 - Inflammatory cells infiltration .4 - Alveolar spaces expanding forming '' Emphysema '' .The lung was the most effected organ that showed tissue injury among other all organs . The normal cell lines - culture technique was followed to investigate cellular toxicity of the purified protein ( A ) which gave a negative result , that means , there was no toxic effect of purified protein ( A ) on the growth cells .

دراسة وراثية عن الطوافر البكتيرية المفككة للمركبات الفينولية

اسم المؤلف: دانية منعم حامد الجادر
اسم المشرف: صبحي دواد حمزة | ميساء جاسب
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الموضوع الدقيق: التقنيات الاحيائية
الدرجة: ماجستير
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: During this study (30) bacterial isolates from (55) soil samples and (10) water samples previously contaminated with petroleum oils were isolated and then screened for their capability for degrading phenol and analine . only (5) isolates were selected which show higher growth and degradation activity on the two substrates and identified Pseudomonas aeruginosa A13 and A5 , Escherichia coli A2 and A11 ، Enterobacter cloacae A8. Adaptation of isolates (A13, A11, A8, A5, A2) in higher concentrations of phenol (500 - 3000) µg/ml and analine (5003500) µg/ml were done . As much as (70,75and 80)% of (2000 µg/ml) phenol and (70,75 and 85)% of (2500 µg/ml) analine were degraded after 3 days of incubation. Number of mutants were generated by using 500 µg/ml of Nitrosoguanidine at incubations time (0.5,1.0and 2.0) hr .It was found that period of 1hr enough to induce mutation in the bacterial isolates in this study . and increased degradation activity as much as (90,90and 97)% of (2000 µg/ml) phenol and (90,97 and 100)% of (2500 µg/ml) analine were degraded by isolates (A13M2, A11M4and A8M12)respectively . Genetic analysis by electrophoretic agarose gel show that (A13, A8 and A8M12) isolates contain three plasmid bands However isolates (A11, A11M4 and A13M2) contain only two . Curing of plasmid frome the three isolates,« A11M4, A13M2 and A8M12»,were done by using acridine orange , ethidum bromide and SDS . It was found that 2200 µg/ml SDS and200 µg/ml acridine orange were capable of curing plasmids frome A11M4, A13M2 . All attempts for curing plasmid of isolates A8M12 was failed , however transformation of plasmid DNA of isolates A11M4, A13M2 and A8M12 in to E. coli MM294 was achieved . Results of the experiments indicate that these plasmids were responsible for degradation ability in the transformed isolates.

دراسة تاثير مزيج من بعض المستخلصات لبذور الحرمل ومخاريط السرو في حيوية الرؤيسات الاولية للمشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus خارج وداخل الجسم الحي == Study the effect of plant extracts mixture from seeds of Peganum harmala & cones of Cupressus sempervirens on viability of protoscolices of Echinococcus granulosus in vitro and in vivo

اسم المؤلف: نور نهاد باقر وزان
اسم المشرف: فوزية احمد الشنوي
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: تضمنت هذه الدراسة استخدام المستخلصات المائية لبذور الحرمل بالتراكيز 10، 20، 30 مليغرام/مليليتر، ومخاريط السرو بالتراكيز50 ،100، 200مليغرام/مليليتر. اما المستخلصات الكحولية لبذور الحرمل ومخاريط السروكانت التراكيز1،2 ،3 مليغرام/مليليتر و50، 100، 200 مليغرام/مليليتر على التوالي بينما الخليط المائي لبذور الحرمل ومخاريط السروكانت التراكيز(10+50)، (20+100) و(30+200) مليغرام/مليليتر، اما تراكيز الخلط الكحولي للنباتين(1+50)،(2+100) و(3+200) مليغرام/مليليتر؛ وذلك لدراسة تاثيرها في حيوية الرؤيسات الاولية لطفيلي المشوكات الحبيبية Echinococcus granulosus في الزجاجIn vitro من اجل الوصول الى التركيزالفعال في قتل الرؤيسات خلال اقصرمدة زمنية ممكنة لحقنه داخل التجويف البريتوني للفئران البيض سلالة Balb/c في الجسم الحي In vivo انخفضت الحيوية عند استخدام المستخلص المائي لبذور الحرمل ومخاريط السرووالخلط المائي لهما فحصل القتل التام للرؤيسات الاولية عند التراكيز 30، 200 و( 30+200)مليغرام/مليليتر في الزمن 30 دقيقة على التوالي. بينما تميزت المستخلصات الكحولية لبذور الحرمل ومخاريط السرو والخلط الكحولي لهما بالقتل التام للرؤيسات في الزمن صفر دقيقة عند التراكيز 3، 200 و(3+200) مليغرام/مليليتر على التوالي . وبعد اختيار التراكيز الفعالة تم تجريبها في الفئران البيض المحقونة بالرؤيسات الاولية وقياسها بالسيطرة الموجبة المحقونة بالرؤيسات وغير المعاملة بالمستخلصات النباتية والخلط والبندازول، وبالسيطرة السالبة المحقونة بالمحلول الملحي الطبيعي Normal saline من اجل بيان تاثير المستخلصات النباتية والخلط المائي والكحولي والبندازول داخل الجسم الحي عن طريق دراسة التغيرات الحاصلة في معدل اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية والنسب المئوية لاختزالها في الجسم ؛ اذ تبين حدوث اختزال بنسبة 100% في المجاميع اجمع قياسا بالسيطرة الموجبة غير المعاملة اذ لم يلاحظ وجود الاكياس العدرية الثانوية في المجاميع المعاملة جميعها.وتم دراسة التغيرات الحاصلة في معدلات اوزان الكبد والطحال ومعدلات تضخمهما في المجاميع المعاملة بالمستخلصات النباتية المائية والكحولية والخلط المائي والكحولي والبندازول. وقد لوحظ حدوث تباين في المعدلات اذ كانت منخفضة عن السيطرة الموجبة والافضلية كانت لمجموعة الخلط الكحولي لبذور الحرمل ومخاريط السرو اذ اقتربت من السيطرة السالبة . وشملت هذه الدراسة ايضا معرفة تاثير هذه المستخلصات والبندازول في نسيج الكبد والطحال عن طريق دراسة التغيرات النسيجية لهما اذ حصل في الكبد تغيرات عديدة منها تغيرات في شكل الخلايا الكبدية، وزيادة في اعداد خلايا كفر الدفاعية في الفئران المعاملة التي كانت اقل مما ظهر في فئران السيطرة الموجبة، اما الطحال فاظهر توسعا في اللب الابيض وظهور الخلايا المكونة للصفيحات الدموية (Megakaryocytes) في الفئران المعاملة قياسا بالسيطرة السالبة وكانت هذه التغيرات اقل حدة في الفئران المعاملة بالخلط المائي والكحولي لبذورالحرمل ومخاريط السرو؛ لذلك فان نتائج التغيرات تبين امكانية استخدام الخلط المائي والكحولي للنباتين وبالتراكيز (30+50) و(1+50) مليغرام/مليليترعلى التوالي داخل الجسم الحي بطريقة امنة عن طريق قدرتها على تحفيز الجهاز المناعي وتوهين الرؤيسات الذي ادى الى منع تطورها الى اكياس عدرية ثانوية داخل الجسم الحي دون اثار جانبية سلبية قياسا ببقية العقاقير الكيميائية مما يؤهلها للتقليل من المضاعفات الحاصلة في العمليات الجراحية . كما تم دراسة الجرعة المميتة لهذه المستخلصات والخلط للاستفادة منها عند حقن الحيوانات فكانت الجرعة المميتة لكلا الحيوانات المحقونة بالمستخلص المائي والكحولي لبذور الحرمل 2.5 غرام/كيلوغرام؛ بينما كانت الجرعة المميتة للمستخلص المائي والكحولي لمخاريط السرو 5.18، 3.63 غرام/كيلوغرام على التوالي وكانت قيمة الجرعة المميتة للخلط المائي والكحولي للنباتين 6.7، 3.3 غرام/كيلوغرام على التوالي . وباجراء التحليل الاولي للكشف عن المجاميع الفعالة في المستخلصات المائية والكحولية لبذور الحرمل ومخاريط السرو تبين احتواء المستخلص المائي والكحولي لبذور الحرمل على القلويدات والكلايكوسيدات والصابونينات والفلافونيدات، بينما احتوى المستخلص الكحولي للنبات على الراتنجات فضلا عن المواد السابقة في المستخلص المائي. اما المستخلص المائي والكحولي لمخاريط السرو احتوى على الفينولات ،والتانينات ، والصابونينات، والفلافونيدات ،والكلايكوسيدات، والزيوت الطيارة، والتربينات، والستيرويدات ولم يحتو على القلويدات، ووجدت الراتنجات في المستخلص الكحولي لمخاريط نبات السرو. | This study included the using of the aquatic extracts for the seeds of Peganum harmala and cones Cupressus sempervirens with the concentration ( 10, 20, 30 )mg/ml and (50,100,200)mg/ml respectively and the aquatic mixture for seeds P. harmala and cones C.sempervirens with concentration {(10+50),(20+100),(30+200)}mg/ml and alcoholic extracts of the seeds P. harmala and cones C.sempervirens with concentration (1,2,3)mg/ml and (50,100,200) mg/ml respectively and alcoholic mixture of them with concentration {(1+50),(2+100),(3+200)} mg/ml .To study of the influence of plant extracts and mixture in the percentage of vitality of the protoscolices of Echinococcus granulosus In vitro for the purpose of arriving to the active concentration in killing of protoscolices during the shortest period of time possible in order to inject it intraperitoneal of the white mice In vivo as the vitality of protoscolices had caused complete death at the time 30 minute when using the aquatic extracts of seeds P. harmala and cones C. sempervirens and aquatic mixture of them at the concentration {30,200,(30+200)}mg/ml respectively . the alcoholic extracts of seeds P. harmala and cones C. sempervirens and alcoholic mixture of them with concentration {3,200,(3+200)}mg/ml these had differ to be distinguished with higher inhibition on the vitality of protoscolices and shown complete killing of protoscolices at the time zero minute . After the suitable concentration selection and then experimentation the active concentration on the mice injected with protoscolices and its comparison with the mice injected with protoscolices and not processed with plant extracts ,mitxure and albendazole (as positive control group ), the mice injected with albendazole and the mice injected with normal saline(as negative control ) to investigate the effect of plant extracts and albendazole in vivo with study the changes occurred in the average of the numbers weights, diameters of the hydatid cyst and the percentage for its reduction in the body as it appeared of getting the reduction of hydatid cyst with percentage 100% in all processed group with plant extracts , mixture and albendazole compared with positive group as its absence of the hydatid cyst in processed group. Also study the change occurred in the averages of the weights of the liver and spleen and the averages of its distension ,as it appeared the occurrence of the variation in the averages of the weights of the liver and spleen and the factors of its distension ,as the lowering significantly of these average occurred in all processed groups with plant extracts, mixture and albendazole about of the positive group and the best result of alcoholic mixture group which was approach to the negative group. This study included tissular changes occurred in the liver and spleen concerning the liver it appeared the occurrence of many tissular changes it most important are the changes of the liver cell and increase in the number of the kupffer cell as a defensive in the processed rates were less than what it appeared in the rate with the positive control, but the spleen ,it appeared the dilation of the whit pulp and the appearance of the cell composing of the hemic platelets(megakaryocyte cells) in the mice processed in comparison with unprocessed negative control group. these tissular changes were of less acuity in each of the group processed with the aquatic and alcoholic mixture of the seeds P. harmala and cones C. sempervirens compared with remaining groups . Thus from the results of this study at appeared the possibility of using the aquatic and alcoholic mixture of the seeds P. harmala and cones C. sempervirens with concentration {(30+50),(3+50)}mg/ml respectively in vivo in successful and safe way in the medical understanding by it a capability of initiating the immunity system which caused to the prohibition of the development of the protoscolices to the secondary hydatid cyst in vivo without causing the side effect in comparison with remaining chemical drug and white it qualifies it to decrease the complications of occurring drug the surgical operation . Also this study included knowing the lethal dose of plants extracts and the aquatic, alcoholic mixture of seeds P. harmala and cones C. sempervirens to purpose utilization its when injected the animal, as the lethal dose of aquatic and alcoholic extract of seeds P. harmala was 2.5gm/kgm while the lethal dose of aquatic and alcoholic extract of cones C. sempervirens was 5.18gm/kgm,3.63gm/kgm respectively. and the dose of aquatic and alcoholic mixture was 6.7gm/kgm,3.3gm/kgm respectively By performing phytochemical analysis the results showed the aquatic and alcoholic extracts of seeds P. harmala contain alkaloids, flavonoids ,glycosides whereas aquatic and alcoholic extracts of cones C. sempervirens contain phenol, tannin, flavonoids ,glycosides ,terpenoids , steroids and volatile oils but only alcohol extract of seeds P. harmala and cones C. sempervirens contain resins

دراسات حياتية وبيئية لحشرة من القطن Aphis gossypii Glover (Homoptera : Aphididae) == Bio - ecology of cotton aphid, Aphis gossypii Glover (Homoptera : Aphididae

اسم المؤلف: سهيلة داوود سلمان الجنابي
اسم المشرف: ابراهيم قدوري قدو
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الموضوع الدقيق: الحيوان
الدرجة: دكتوراه
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: اجريت دراسات حياتية وبيئية لحشرة من القطن Aphis gossypii Glover ( Homoptera : Aphididae ) التي تعد من الافات الاقتصادية عالمية الانتشار، والتي تصيب العديد من النباتات منها اشجارو محاصيل الخضر بانواعها فضلا عن نباتات الزينة والنباتات البرية . شملت الدراسة ما يا تي : اولا : الدراسات المختبرية ا - تناسبت مدة الاطوار الحورية عكسيا مع درجات الحرارة اذ كانت اقصر مدة للطور الحوري الاول ( 1.25 ) يوم في حرارة ( 30 ) م° ، واطول مدة لهذا الطور كانت في حرارة ( 15 ) م° ( 4.4 ) يوم . تراوحت مدة الطور الحوري الثاني بين ( 4.1 - 1.2 ) يوم في درجتي الحرارة ( 15 , 30 ) م° . اما مدة الطور الحوري الثالث فكانت متدرجة بين ( 3.5 - 1.1 ) يوما في الحرارة ( 15 , 30 ) م° ، اما مدة الطور الحوري الرابع فكانت اقل مدة في حرارة ( 30 ) م° اذ بلغت ( 1.05 ) يوم واطول مدة كانت ( 3.4 ) يوم في حرارة ( 15 ) م° . كانت اطول مدة للدور الحوري ( 15.4 ) يوم في حرارة ( 15 ) م° واقصرها ( 4.6 ) يوم في حرارة ( 30 ) م° . بلغ اعلى انتاجية للانثى العذرية ( 54.1 ) حورية في حرارة ( 25 ) م° ، واقل انتاجية كان في ( 15 م°) . كما وجد ان طول مدة قبل التكاثر تتاثر ايضا بدرجات الحرارة اذ اطول مدة كانت ( 3.2 ) يوم في حرارة ( 15 ) م° واقصر مدة كانت ( 0.9 ) يوم في حرارة ( 30 ) م° . كما ان مدة التكاثر تتاثر ايضا بدرجات الحرارة اذ وجد ان اطول مدة كانت ( 11.2 ) يوم في حرارة ( 15 ) م° واقل مدة ( 6.2 ) يوما في حرارة ( 30 ) م° . بلغ معدل انتاج الانثى حورية الواحدة في اليوم الواحد اعلاه ( 6.88 ) حورية / انثى / يوم في حرارة ( 25 ) مº ، واقلها ( 1.61 )حورية / انثى / يوم في ( 15 ) مº . ان طول عمر الانثى يتناقص بارتفاع درجة الحرارة اذ كان اطول عمرا ( 41.3 ) يوم في حرارة ( 15 ) مº ، واقل عمرا ( 19.9 ) يوم في حرارة ( 30 ) مº . وجد ان مدة الجيل كانت تتناسب عكسيا مع درجات الحرارة ، وكانت اطول مدة ( 18.6) يوم في حرارة ( 15 ) م° واقصر مدة كانت ( 5.5 ) يوم في حرارة ( 30 ) م° .ازدادت النسبة المئوية للهلاك براتفاع الحرارة من 20م° الى ان وصلت اقصاها 100 % في حرارة 35م°. ب - ان لدرجة الحرارة ونوع المضيف النباتي تاثيرا واضحا في مختلف الجوانب الحياتية للحشرة فلوحظ التاثير كان كبيرا في مدة الدور الحوري والانتاجية وطول العمر ومدة الجيل والنسبة المئوية للهلاكات على المضائف النباتية المختلفة . ثانيا : الدراسات الميدانيةا ــ المضائف النباتية : وجد من المسح الميداني للمضائف النباتية التي تصيبها حشرة من القطن في حقول الجادرية انها تصيب اكثر من 40 نوعا من 11 عائلة نباتية اغلبها من العائلات : القثائية ، والمركبة ، والباذنجانية ، والخبازية . ب ــ الكثافة العددية : تختلف باختلاف المضائف النباتية اذ وجد ان اكثر النباتات اصابة هي البطيخ ،و خيارماء ثم الباميا في خريف 2005 . اما في سنة 2006 وجد ايضا ان الكثافة مختلفة باختلاف المضائف ، وان اعلى كثافة على البطيخ والخيارو القطن ثم الباميا ، كما انها تختلف من اسبوع لاخر باختلاف درجات الحرارة والرطوبة النسبية ج ــ تفضيل الحشرة لسطحي الورقة : ان اعلى كثافة لحوريات من القطن كانت على السطح السفلي ( 370.4 ، 195.2 ، 464.5 ) لورقة نبات خيار الماء ، والباذنجان ، والباميا على التوالي واقلها على السطح العلوي ( 132.7 ، 54.0 ، 60.1 ) على التوالي وان اعلى نسبة مجنحات على السطح السفلي على النباتات الثلاث . د ـ توزيع الحشرة على مستويات النبات الثلاث : وجد ان اعلى نسبة للافراد غير المجنحة على المستوى الوسطي ثم القاعدي ثم القمي على نباتات خيار ماء ، وباذنجان ، وباميا على التوالي . اما بالنسبة للمجنحات فكانت مختلفة باختلاف النباتات على السطح العلوي للورقة . اما على السطح السفلي فوجد ان اعلى معدل للافرا د غير المجنحة كان على المستوى الوسطي ثم القاعدي ثم القمي للنباتات الثلاث ، على التوالي في حين انتشار الافراد المجنحة يختلف باختلاف النباتات . هـ - ان توزيع الحوريات غير المجنحة على نصل الورقة كان اعلاه على المساحات الخضر مابين العروق ، واقلها على العرق الوسطي للسطح السفلي لورقة المضيف النباتي . | The cotton aphid , Aphis gossypii Glover ( Homoptera : Aphididae ) is an important economic cosmopolitan polyphagous pests Which attacks numerous hosts such as trees , field crops , ornamental and wild plants . The biology of this insect has not been adequately studied in Iraq .Hence ,this investigation was designed to study the local strain of the pest under controlled and field condition .These investigation covers the following aspects : First : Laboratory studies : 1 - The nymphal stadia decrease with increasing temperatures . The first stadium reneged from 1.25 days at 30 C° to 4.4 days at 15 C° . Second stadium ranged between 4.1 - 1.2 days at 15 - 30 C°, The third stadium was from 3.5 to 1.1 days at 15 - 30 C°, whereas the fourth stadium was 1.05 - 3.4 days at 30 C°, 15C°. Temperature 35 C° is considered a lethal degree of most nymphal instars .The total period of nymphal stage was 15.4 days at 15 C° and 4.6 days at 30 C°.fecundity value The highest of apterae was 54.1 nymphs at 25 C° and the lowest at 15 C° .The maximum daily reproductive rate of a viviparous female was 6.88 nymphs / female /day at 25 C° and the minimum was 1.61 nymphs / female /day at 15C° . Prereproductive and , reproductive period was also affected with temperature .Generation period from birth to birth ranged between 20.9 days at 15 C° to 7.3 days at 30 C°. The maximum longevity was 41.3 days at 15C° and the minimum was 19.9 days at 30 C° . 2 - The laboratory studies have generally revealed that the degree of temperature and host plants have significant effects on the bionomics of cotton aphid . Second : Field studies Cotton aphid has a wide range of host plants . The field survey shows that more than 40 species of host plants belong to the families : Compositae , Malvaceae , Cucurbitaceae and Solanaceae in Jadriyah fields Population density varies on different host plants . The aphid prefers melon , cucumber , okra and cotton and its population varies depending on temperature , relative humidity and natural enemies . The field studies have revealed that both alatae and apterae of cotton aphid prefer the lower surface of different host plant leaves . The highest distribution of them was on the middle leaves of plant and high percentage ratio of apterous on the green area while the lesser one was on the midrib of leaves

انتاج واستخلاص الكلوكان من خميرة Saccharomyces cerevisiae ودراسة تاثيره في تحفيز الخلايا البلعمية خارج الجسم الحي == Production and extraction of glucan from yeast Saccharomyces cerevisiae and study it's effect in stimulation of phagocytic cells in vitro

اسم المؤلف: علي عبد الواحد عبد الربيعي
اسم المشرف: شذى سلمان حسن
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الموضوع الدقيق: الاحياء المجهرية
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: تم الحصول على خمس عزلات من خميرة الخبز Saccharomyces cerevisiae اخذت من نماذج مختلفة من الخمائر الجافة المتوافرة في الاسواق المحلية المستوردة من عدة مناشىء ، تم تشخيصها استنادا الى الاختبارات المظهرية والزرعية والكيموحيوية التي اشارت الى انها تعود الى الخميرة المذكورة . استخدمت ست طرائق مختلفة لاستخلاص الكلوكان من الخميرة وكانت ثلاث من هذه الطرائق مستخدمة في دراسات اخرى وثلاث طرائق تم تحويرها وفق الية عمل جديدة تختلف نوعا ما عن الطرائق الثلاث الاخرى ، اظهرت النتائج ان طريقة التحلل الذاتي وطريقة الموجات الصوتية الفائقة (Ultrasonication) المحورتان كانت اكثر ملائمة في الحصول على مستخلص عالي النقاوة حيث اعطت طريقة التحلل الذاتي مستخلصا بنقاوة 94 % واعطت طريقة الموجات الصوتية الفائقة مستخلصا بنقاوة 91 % وكان وزن المستخلصين 4.8 غرام /100 غرام خلايا لطريقة التحلل الذاتي و5.5 غرام / 100 غرام خلايا لطريقة الموجات الصوتية الفائقة ، وان اعلى كمية من مستخلص الكلوكان قد تم الحصول عليها بطريقة Byron 1 والتي بلغت 6.25 غم /100 غرام خميرة بنسبة نقاوة 71 % ، وكانت هذه الطريقة هي الاقل استهلاكا للوقت وللمواد المستخدمة في الاستخلاص بين الطرائق المستخدمة.تم الكشف عن وجود الكلوكان في المستخلصات النهائية باستخدام تقنية الـFT - IR ، بينت نتائج الفحوصات احتواء جميع النماذج على بيتا (3،1) كلوكان ، ولوحظ ايضا خلو جميع النماذج من اي مركب سكري اخر مثل المانان او الكلايكوجين فضلا عن خلوها من البيتا (6،1) كلوكان ، باستثناء ما اشارت اليه الفحوصات من احتواء احد النماذج ( الانموذج G.1) الذي تم الحصول عليه بطريقة (Sakai 1) على نسبة من الكايتين دون بقية النماذج .تم غربلة عزلات الخميرة بالاعتماد على محتواها من الكلوكان ولوحظ ان العزلة S. cerevisiae Sc3 تحتوى على اعلى نسبة من الكلوكان بلغت 3.827 % (وزن /وزن ) من الوزن الجاف للخلايا ، في حين ان اعلى كتلة حيوية للخلايا تم الحصول عليها من العزلة S. cerevisiae Sc5 والتي بلغت 0.8778 غم /100 مللتر . درس تاثير بعض الظروف في انتاج الكلوكان من خلايا الخميرة ولوحظ ان نسبة الكلوكان في الخلايا تختلف باختلاف ظروف النمو ، واشارت النتائج الى ان درجة الحرارة المثلى لانتاج الكلوكان هي 35 م والرقم الهيدروجيني الامثل 6 والمصدر الكربوني الامثل هو السكروز في حين كانت مدة الحضانة المثلى هي 48 ساعة كما لوحظ ان استخدام الحاضنة الهزازة بسرعة 100 دورة / الدقيقة في حضن المزارع يعطي نسبة اعلى من الكلوكان قياسا مع استخدام الحاضنة الساكنة ، استعملت انواعا من الاوساط الخام الطبيعية في تنمية الخميرة مثل وسط مستخلص التمر ومستخلص النخالة التي يمكن ان تكون ملائمة للاستعمال بنطاق واسع وتحقيق مردود اقتصادي فضلا عن الاوساط المختبرية التقليدية المستعملة في الدراسات والبحوث مثل وسط Yeast extract peptone dextrose (YEPD) وبينت النتائج ان وسط مستخلص التمر كان الافضل في الحصول على اعلى نسبة من الكلوكان والتي بلغت 4.664 % (وزن / وزن ) من الوزن الجاف للخلايا كما ان هذا الوسط قد اعطى ايضا اعلى كتلة حيوية من الخلايا بلغت 0.9864 غم / 100 مللتر . درس تاثير ثلاث نماذج من الكلوكان في عملية التهام خميرة Candida albicans من قبل خلايا الدم البيض متعددة اشكال النوى (Polymorphonuclears) خارج الجسم الحي ، تضمنت الانموذج G.3 الذي تم الحصول عليه بطريقة (Byron 1) والانموذج G.5 الذي تم الحصول عليه بطريقة الموجات الصوتية الفائقة والانموذج G.6 الذي تم الحصول عليه بطريقة التحلل الذاتي ، بينت النتائج ان النماذج الثلاثة كان لها تاثيرا واضحا في تحفيز الخلايا البلعمية وزيادة فعاليتها في عملية الالتهام وان هذا التاثير يزداد مع زيادة تركيز نماذج الكلوكان باستثناء التركيز 100 مايكروغرام / مل للانموذج G.3 حيث لم يلاحظ وجود زيادة معنوية في معامل البلعمة قياسا مع معاملة السيطرة ، ولوحظ ان الانموذج G.6 الذي تم الحصول عليه بطريقة التحلل الذاتي وهو الاكثر نقاوة كان هو الافضل في تحفيز الخلايا البلعمية وزيادة قدرتها على الالتهام وان اعلى معامل بلعمة تم الحصول عليه عند التركيز 500 مايكروغرام / مللتر لهذا الانموذج . | Five isolates of the Saccharomyces cerevisiae were obtained from different samples of commercial dry baker yeasts that imported from different origins which purchased from local markets , they were identified depending on morphological , cultural and biochemical tests . Six different extraction methods have been used to extract glucan from the yeast , three of these methods are well documanted in previous studies and ,while the other three methods have been modified (in this study) using new technique differ from the other methods . The results showed that the autolysis and the ultrasonication methods were the best to obtain highly purified extracts , the autolysis method gave glucan extract with 94% purity and the ultrasonication method gave extract with 91% purity , the weight of extracts was 4.8 g /100 g of yeast by the autolysis method and 5.5 g / 100 g of yeast by the ultrasonication method ; The maximum quantity of glucan extract was obtained by (Byron 1) method which is reached 6.25 g/100g of yeast with 71% purity , this method was the least time and materials consumption among the extraction methods used in this study. The presence of glucan in the final extracts that obtained from these methods have been detected by the FT - IR technique , the results shown that all samples contain beta (1,3) glucan , and all samples did not contain any other carbohydrates such as mannan or glycogen as well as beta (1,6) glucan , with exception of sample (G.1) which extracted by (Sakai 1) method contained a proportion of chitin .The S. cerevisiae isolates have been screened depending on glucan content , S. cerevisiae Sc3 gave the highest glucan content reached to 3.827 % (wt / wt ) of dry weight of cells , while the highest cells biomass have been obtained from the S. cerevisiae Sc5 was 0.8778 g/100 ml.The effect of some cultural conditions on glucan content was studied and showed that glucan contents varies with different growth conditions , the result showed that the favorable conditions for glucan production are culturing the yeast in media containing sucrose (5%) with pH 6 and incubated at 35°C in a shaker incubator with 100 rpm for 48 hrs. Some natural crude materials such as date extract and wheat bran were utilized as media for growing of yeast and production of glucan to achieve the economical advantages , date extract was the favorable medium for glucan production since high content of glucan (4.664 % of dry weight of cells ) and highest cells biomass (0.9864 g/100 ml) was achieved from this medium . The effect of three glucan samples on phagocytic process of Candida albicans cells by the polymorphonuclear (PMNs) leucocytes have been studied in vitro , the samples used were G.3 which extracted by (Byron 1) method and G.5 which extracted by (Ultrasonication) method and G.6 which extracted by (autolysis) method, and the results showed that all samples had clear effect in stimulation of the phagocytic cells and increase its phagocytic activity , the stimulating effect increased with increasing of sample concentration , with exception of the concentration 100 µg / ml of sample G.3 which had no significant increasing in the phagocytic index (PI) , the sample G.6 which was obtained by the autolysis method with highest purity was the best in stimulation of the phagocytic cells , and the maximum phagocytic index was obtained at the concentration 500 µg / ml of this sample .

دراسة تشريحية مقارنة لانواع مختارة من العائلــــــــة المركبــــة Compositae الناميـــــة ضمن مجمع الجادريــــــة ـ جامعـــة بغداد == Comparative anatomical study of selected compositae species grown in Jadiriyah Campus , Baghdad University

اسم المؤلف: سكينة عباس عليوي
اسم المشرف: علي حسيـن عيسى الموسوي
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الموضوع الدقيق: النبات
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: تناول البحث الحالي دراسة تشريحية مقارنة لانواع عشرة مختارة من العائلة المركبة Compositae النامية في مجمع الجادرية - جامعة بغداد ، والانواع هي : Aster subulatus Michx.Calendula officinalis L.Calendula Persica C. A. MayCarduus pycnocephalus L.Carthamus oxycantha M. B.Eclipta alba (L.) HaussknErigeron canadensis L.Silybum marianum (L.) GarthUrospermum picroides (L.) Schmidt .Xanthium brasilicum Vellozo .حيث ركز البحث على بعض الصفات التشريحية ودراستها بصورة مقارنة ولاول مرة لهذه الانواع في العراق. وتضمنت الدراسة مميزات البشرة مثل دراسة خلايا البشرة الاعتيادية والمعقدات الثغرية. واسفرت الدراسة عن ظهور طراز جديد ولاول مرة في هذه الانواع وهو الطراز المتوازيParacytic type للنوع Eclipta alba . كما تمت دراسة نظام التعرق للانواع المذكورة انفا ومقارنتها وكذلك الخصائص التشريحية للورقة واظهرت المقاطع العمودية لنصل الورقة لاسيما شكل الحزم وعددها وسمك الطبقتين العمادية والاسفنجية وبقية الصفات حيث اعطت خصائص تصنيفية مهمة ، وامكن تقسيم الانواع على مجاميع ، وبينت الدراسة للمقاطع المستعرضة للسيقان خاصة صفات تصنيفية مهمة. ومميزة من حيث : سمك الكيوتكل وسمك طبقة البشرة ووجود الكولنكيما او عدم وجودها ، وعدد صفوفها ونوعها . وكان لصفات الحزمة الوعائية اهمية مميزة من حيث معدل طولها واعدادها واشكالها مما امكن تقسيم الانواع على مجاميع ، كذلك درس اللحاء والخشب حيث ابديا اهمية تصنيفية من جوانب عدة ، وامكن الاستفادة من الاسطوانة الوعائية في عزل الانواع سواء اكانت مستمرة ام متقطعة على شكل حزم كذلك درس اللب واعطيت له اهمية من حيث المساحة ووجود او عدم وجود البلورات وانواعها ان وجدت . وتضمن البحث دراسة المقاطع المستعرضة للجذور ، واظهر سمك البشرة والقشرة واللحاء وشكله ومساحة منطقة الخشب اهمية كبيرة في العزل والتشخيص وكان للكساء السطحي للاوراق والسيقان فائدة وقيمة تصنيفية مهمة في عزل الانواع من حيث اشكال الشعيرات واطوالها وانواعها ومن حيث وجود او عدم وجود الحليمات . واسفرت الدراسة عن ظهور نتائج وتغايرات وصفات مهمة تعرض لاول مرة ، لقد اعطت الدراسة التشريحية صفات مهمة اعطت دعما واسنادا للصفات المظهرية وساعدت على عزل وتشخيص الانواع ضمن العائلة نفسها ، هذا واورد البحث صورا للعينات الحقلية التي جمعت من مواقع مختلفة ومتعددة ضمن مجمع الجادرية ( رقعة الدراسة ) ، وتضمن صورا عديدة للمقاطع التي تمت دراستها للاعضاء النباتية المختلفة فضلا عن العديد من الجداول . وقد نوقشت النتائج لهذه الدراسة التشريحية خصوصا ما هو متعلق ببيئة هذه الانواع . | The present study dealt with ten selected species of the family compositae grown in Jadiriyah campus , university of Baghdad , were studied anatomically in a comparative way within this work . These species are : Aster subulatus Michx.Calendula officinalis L.Calendula Persica C. A. MayCarduus pycnocephalus L.Carthamus oxycantha M. B.Eclipta alba (L.) HaussknErigeron Canadensis L.Silybum marianum (L.) GarthUrospermum picroides (L.) Schmidt .Xanthium brasilicum Vellozo .Comparative anatomical characters were used for the first time in these species grown in Iraq , such as characteristics of ordinary epidermal cells and stomatal complexes . Paralytic type was recorded as new founding in these species namely in Eclipta alba . Venation system was investigated and compared , Vertical sections of leaf blades , especially the shape and number of vascular bundles , thickness of palisade of spongy layers and other mesophyll characters . These characters were important taxonomically ,according to these species were divided into groups based on these specific characters . Cross sections of stems show important taxonomic values , like thickness of cuticle , epidermis , presence or absence of collenchyma , types and rows of this collenchyma . Characteristics of the vascular bundle were important too , therefore the species were divided according to these attributes into groups. Xyelem and phloem were also used taxonomically . The vascular cylinder was useful whether it was continuous as a complete cylinder or as a separated strands.Pith of the stem and its size , presence of crystals was of a considerable importance . Other characters of the plant organs , cross sections of root were useful taxonomically , especially the thickness of epidermis , cortex , phloem and xylem .Indumentum of leaves and stems was also of a taxonomic value , therefore the shapes , length , kinds , presence of glands were used for identification of the species . This study concluded the presences of variation in characters ; and these were presented for the first time comparatively , so that the anatomical characters were of a good supporting to the exomorphological characters in the family compositae . Graphes , field photographs of the different plants and sections of plant organs were put in addition to a numerous tables in this work . The above results were discussed scientifically regarding the invironmental factors .

دراسة كفاءة خليط من مستخلصات قشور ثمار الرمان وثمار الشفلح في تضعيف حيوية الرؤيسات الاولية للمشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus. Batzsh,1786 خارج الجسم الحي وداخله == The study of efficiency of mixture extracts from Pericarp of Punica granatum L. and Fruit of Capparis spinosa L. in attenuation of protoscolices of Echinococcus granulosus. Batzsh,1786In vitro and In vivo

اسم المؤلف: نهى محمد موسى الدوري
اسم المشرف: فوزية احمد الشنوي
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2009
الدرجة: ماجستير
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: ان هدف هذه الدراسة اختبار فعالية كل من المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان Punica granantum L. وثمار الشفلحL. Capparis spinosa بتراكيز )300،200،100،50 (مليغرام /مليليتر.كما تم خلط المستخلصات المائية لقشور الرمان وبتراكيز (100،50) مليغرام /مليليتر مع (200،100) مليغرام /مليليتر من المستخلص المائي لثمار الشفلح وبالتراكيزنفسها تم خلط المستخلصات الكحولية وتقويم فعاليتها في تضعيف حيوية الرؤيسات الاولية لطفيلي المشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus .Batch,1786 الماخوذة من كيس مائي لكبد احد الاغنام خارج الجسم In vitro لمعرفة جودة وفعالية التراكيز في قتل الرؤيسات الاولية ليتم اختبارها فيما بعد داخل الجسم ,اتضح من الدراسة خارج الجسم الحي (في الزجاج ) اذ انخفضت حيوية الرؤيسات الاولية عند استعمال المستخلص المائي لقشور الرمان وبتراكيز 300,200مليغرام /مليليتر والمستخلص المائي لثمار الشفلح ووبنفس التراكيز وللخليط المائي بتركيز (200+100)مليغرام /مليليتر لهما فحصل القتل التام للرؤيسات في الزمن60 ,60, 90,45,90دقيقة لكل من التراكيز .بينما تميزت المستخلصات الكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح والخليط الكحولي لهما فاحدثت القتل التام للرؤيسات في الزمن30,30 60,دقيقة عند التراكيز (200+100),300مليغرام /مليليتر وقبل اجراء اختبار فعالية المستخلصات داخل الجسم تم تحديد الجرعة المميتة المتوسطة التي بلغت 11.38,8.8,10,8.1,10.7,9.41غرام / كيلوغرام بالنسبة للمستخلصات المائية للرمان والشفلح والمستخلصات الكحولية للرمان والشفلح والخليط المائي والخليط الكحولي على التوالي, لكي تعد امينة الاستعمال وقليلة السمية . كما تضمنت الدراسة اختبار التراكيز المناسبة ومعاملتها بمجاميع الفئران المحقونة بالرؤيسات الاولية اما مجموعة السيطرة السالبة فتم حقنها بمحلول الملح الفسيولوجي Normal saline من اجل بيان تاثير المستخلصات النباتية داخل الجسم كما تم دراسة التغيرات الحاصلة في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية والنسب المئوية لاختزالها في الجسم اذ تبين حدوث انخفاض في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية الثانوية المتطورة في الفئران المعاملة بالمستخلصات المائية لنباتي الرمان والشفلح وزيادة نسب الاختزال قياسا بمجموعة السيطرة الموجبة في بقية المجاميع حيث وصلت النسبة المئوية لاختزال اعداد الاكياس العدرية الى 100%في بقية المجاميع المعاملة .اما التغيرات الحاصلة في معدلات اوزان الكبد والطحال ومعدلات التضخم فقد لوحظ حدوث تباين في معدلات الاوزان والتضخم اذ تقاربت قيم معدلات الوزن وتضخم الكبد للمجموعة المعاملة بالمستخلص المائي للشفلح والرمان مع مجموعة السيطرة الموجبة ,بينما حدث انخفاض معنوي واضح لهذه المعدلات في بقية المجاميع وكانت الافضلية للمجموعة المعاملة بالخليط الكحولي والمجموعة المعاملة بالمستخلص الكحولي للرمان اذ اقتربت من معدلات السيطرة السالبة .هذا وشملت الدراسة تقويم تاثير هذه المستخلصات النباتية والالبندازول Albendazole من دراسة التغيرات النسيجية الحاصلة في الكبد والطحال, ففي الكبد ظهرت تغيرات نسيجية عديدة اهمها وجود احتقان في بعض اوردة الكبد مع تغيرات لحجم الخلايا الكبدية وزيادة في اعداد خلايا كوفر Kupffer cells الدفاعية التي كانت اقل مما ظهر في مجموعة فئران السيطرة الموجبة ,اما الطحال فقد اظهر توسع اللب الابيض على حساب اللب الاحمر وزيادة ارتشاح الخلايا المولدة للصفيحات الدموية (خلايا النواء Megakaryocytes). وكانت هذه التغيرات اقل حدة في الفئران المعاملة بالخلط الكحولي. كما كانت التغيرات قليلة في المجاميع المعاملة بالمستخلصات الكحولية للنباتين ,لذا تبين من هذه الدراسة امكانية استخدام الخلط الكحولي والمستخلصات الكحولية بطريقة امنة عن طريق قدرتها على تحفيز الجهاز المناعي وتضعيف الرؤيسات ومنع تطورها الى اكياس عدرية ثانوية داخل الجسم الحي دون احداث اثار جانبية سلبية قياسا ببقية العقاقير الكيميائية مما يؤهلها للتقليل من المضاعفات الحاصلة في العمليات الجراحية . وباجراء التحليل الاولي للكشف عن المجاميع الفعالة في المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح تبين احتواء المستخلص المائي والكحولي لقشور الرمان على : القلويدات Alkaloids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، والفلافونيدات Flavonoids ،و فينولات Phenols ، وتانينات Tannins ، وتربينات Terpenoids ،و سترويدات Steroids بينما احتوى المستخلص الكحولي فضلاعن هذه المواد الراتنجات Resins ايضا. اما المستخلص المائي والكحولي لثمار الشفلح يبين احتوائه على : القلويدات Alkaloids ، والفلافونيدات Flavonoids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، بينما احتوى | This study aims to test the efficiency of each of the aquatic and alcoholic extracts for the Pericarp of Punica granatum L. and Fruit of Capparis spinosa L. in concentrations of ( 50 , 100 , 200 , 300 ) mg/ml. Also a mixture of aquatic extract of Punica granatum Pericarp in concentration of (50,100) mg/ml, and (100, 200) mg/ml concentrate of the aquatic extract of Capparis spinosa Fruit . And a similar mixture was prepared for the alcoholic extracts in similar concentrations. A test was performed for the efficiency of each of the prepared extracts, in attenuation of protoscolices Echinococcus granulosus. Batch,1786 which were isolated from hydatid cysts of liver in sheep In vitro to determine the optimum concentration to kill the protoscolices, where the test is then to be performed by injecting the protoscolices intraperitonealy in white mice In vivo. Actually the vitality of protoscolices had dropped drastically with the application of aquatic extracts of Punica granatum Pericarp at the concentrations of (200 , 300) mg/ml, and aquatic extracts of Capparis spinosa Fruit at the concentration of (200 , 300) mg/ml, and the mixture of both the aquatic extracts at the concentration (100+200) mg/ml, where complete death was achieved at times, 90 , 45 , 90 , 60 , 60 minutes respectively. Alcoholic extracts of Punica granatum Pericarp and Capparis spinosa Fruit , and their mixture showed complete killing of Protoscolices at the time 30 , 30 , 60 minute in concentrations of {300 & (100+200)} mg/ml.Before performing the test In vivo, we determined the average lethal doses which were 9.41 , 10.7 , 8.1 , 10 , 8.8 , 11.3 g/ kg for the aquatic extract of Punica granatum, Capparis spinosa, their Alcoholic extracts, the aquatic mixture, and the alcoholic mixture respectively. Thus, the extracts in such concentrations could be considered as safe and low poisoning . The study included testing and application of the best concentration for treatment of the white mice that were injected with protoscolices, a negative group were injected with normal saline to determine the effect of extracts In vivo. The study measured, also the changes in average numbers, weights, dimensions, and percentage of reduction of hydatid cysts In vivo. Where it showed a decrease in the average number, weight, factors of its distension of the secondary hydatid cysts which developed in mice treated with the aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa, and increase of percentage of reduction compared with the positive control group, where a 100% reduction of hydatid cysts was achieved in the treated groups.Changes in liver and spleen weights, and average of hypertrophy showed some variations. Where average of weights and hypertrophy of liver of mice treated with aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa were similar to those of the positive group. A significant drop in these averages was observed in other groups. Best results were observed in groups treated with the alcoholic mixture, as well as in those treated with the alcoholic extract of Punica granatum, where the changes were close to those of the negative group. The study included observation of the effect of treatment with the above mentioned extracts and with Albendazole, on tissue changes of liver and spleen. Where liver showed significant changes, most important of which were the changes of the liver cell and increase in the number of the kupffer cell as a defensive mechanism, which were much less than their rate in the positive control group. On the other hand, spleen showed dilation of the white pulp and the appearance of cells composing of the Hemic platelet (megakaryocytic cells) in processed mice compared with unprocessed negative control group. These tissue changes were less persistent in groups processed with the alcoholic mixture of Punica granatum and Capparis spinosa and groups processed with the mixture of alcoholic extracts. By performing physiochemical analyses for the extracts to specify their effective compounds, we came to conclude that the aquatic and alcoholic extracts of Pericarp Punica granatum contain Alkaloids ,Flavonoids ,Glycosides, Phenols, Terpenoids, Tannins, and Steroids. whereas the alcoholic extracts in addition to these compounds, contain resins. whereas the aquatic extract of carp Capparis spinosa contain Alkaloids, Flavonoids, Glycosides, Terpenoids. Alcoholic extract of fruit Capparis spinosa contains in addition to these compounds ,tannin

دراسة كيموحيوية وجزيئية لانزيم Hyaluronidase المنتج من عزلات محلية لبكتريا Pseudomonas spp. == Biochemical and Molecular Study of Hyaluronidase Produced by Local Isolates of Pseudomonas spp

اسم المؤلف: ابية صباح صديق الدملوجي
اسم المشرف: لينة عبد الكريم الامير | غازي منعم عزيز
الموضوع العام: علوم الحياة
السنة: 2008
الدرجة: دكتوراه
الجامعة: جامعة بغداد
اللغة: العربية
مكان الجامعة: بغداد
الصفحات الاولى:
المستخلص: جمعت 140 عينة من مصادر مختلفة تضمنت الادرار، والخمج، والجروح، والبراز، والقشع، والتهاب الاذن، والدم، وسائل من الرئة ، وللمدة من حزيران ولغاية ايلول 2005 وتم الحصول على 55 عزلة لبكتريا Pseudomonas spp. بنسبه عزل 39.3%, وكانت اعلى نسبة عزل من الخمج والجروح اذ بلغت 38.2%.2 - اختبرت حساسية العزلات المحلية لبكتريا Pseudomonas spp .اتجاه اثنا عشر مضادا للحيوية وقد ابدت العزلات مقاومة مختلفة ومتعددة للمضادات اذ كانت العزلات جميعها مقاومة لثلاثة مضادات هي : Ampicillin ، وAugmentin ، وRifampin . وكانت 82% من العزلات مقاومة ﻟ 6 - 9 مضادات ، بينما كانت 14.5% من العزلات مقاومة ﻟ 1 - 5 مضادات و3.7% من العزلات المحلية مقاومة ﻟ 10 - 12 مضادا. كما لوحظ ان اغلب العزلات كانت حساسة لمضاد Amikacin ثم Ciprofloxacin ثم Gentamycin وتباينت مقاومة العزلات ا تجاه بقية مضادات الحيوية المستعملة.3 - تم التحري عن انتاج عوامل الضراوة المختلفة للعزلات قيد الدراسة مثل : الهيمولايسين ، والايلاستيز، واليورييز ووجد ان نسبة انتاج الهيمولايسين كانت بحدود 78.1% متوزعة بشكل اساسي في نماذج الخمج والجروح ثم الادرار ، كما اتصفت العزلات المحلية بانتاجها لانزيم الايلاستيز وبنسبة 85.4% تمركزت عند عينات الخمج والجروح ثم الاذن والادرار اما نسبة انتاج اليورييز فكانت 80% للعزلات قيد الدراسة وكانت اغلبها عائدة لعينات الادرار والبراز ثم الخمج والجروح.4 - تم التحري عن انتاج انزيم الهيالورونيديز باستعمال وسط نقيع القلب والدماغ الحاوي على حامض الهيالورونك ، واتضح ان 72.7% من العزلات المحلية تمتلك القابلية على انتاج الانزيم توزعت بشكل اساسي في عينات الادرار ثم عينات الخمج والجروح والاذن.5 - درست العلاقة بين انتاج انزيم الهيالورونيديز مع عوامل الضراوة قيد الدراسة (الهيمولايسين ، والايلاستيز ، واليورييز) . واتضح ان 43.6% من العزلات الكلية كانت منتجة لهذه العوامل مع انزيم الهيالورونيديز بينما كانت 18.18% من العزلات الكلية منتجة لعاملي ضراوة وانزيم الهيالورونيديز وتميزت ست عزلات محلية بكونها منتجة لعامل ضراوة واحد مع انزيم الهيالورونيديز ، كذلك لوحظ ازدياد عدد المجموعات الخاصة بنسق توزيع عوامل الضراوة من 7 عند ربط ثلاثة عوامل فقط الى 11 عند اضافة عامل الهيالورونيديز اليها.6 - غربلت العزلات المحلية على وسط نقيع القلب والدماغ الصلب وانتخبت خمس عزلات لاعطاءها نسب تحلل عالية لحامض الهيالورونك. 7 - لوحظ عند دراسة النسق البلازميدي لخمسة عزلات محلية (P52, P2, P10, P27 ,P30) لبكتريا Pseudomonas spp. المنتجه لانزيم الهيالورونيديز باحتوائها على حزمة بلازميدية واحدة.8 - عند محاولة تحييد البلازميدات باستعمال صبغة بروميد الايثيديوم ، لوحظ اختفاء البلازمد من العزلة P2 باستعمال تركيز 2000 مايكروغرام/مليلتر من الصبغة ، وتم اختبار قدرة العزلة المحيدة في انتاج الهيالورونيديز واظهرت هذه العزلة قدرتها في انتاج الانزيم.9 - اختبرت العزلات المحلية (التي اعطت نسب تحلل عالية على الوسط الصلب) في الوسط السائل، وتم تقدير الفعالية النوعية لها بالاعتماد على طريقة Turbidimetric assay ، واختيرت العزلة المحلية P27 Pseudomonas spp. كونها الاغزر انتاجا اذ بلغت الفعالية النوعية لها 2.7 وحدة /ملغم بروتين واستعملت في التجارب اللاحقة.10 - حددت الظروف المثلى لانتاج الهيالورونيديز باستعمال وسط مرق نقيع القلب والدماغ المدعم ﺒ 0.5% مستخلص الخميرة و0.25 ملغم/مليلتر من مادة التفاعل (حامض الهيالورونك) برقم هيدروجيني 6 والملقح بعدد خلايا 1×106 خلية/مليلتر ، والحضن بالمزارع الهزازة بسرعة 50 دورة /دقيقة لمدة 18 ساعة.11 - نقي الهيالورونيديز المنتج من العزلة المنتخبة بخطوات تضمنت الترسيب باستعمال كبريتات الامونيوم بنسبة تشبع 50% ثم استخدام تقنيتي كروماتوغرافي التبادل الايوني باستخدام المبادل DEAE - Cellulose ثم الترشيح الهلامي بعمود Sephacryl S - 300 ، وتم الحصول على عدد مرات تنقية مقدارها 10.8 وبحصيلة انزيمية 20.4%.12 - درست بعض العوامل المؤثرة في فعالية وثباتية الانزيم المنقى اذ كان الرقم الهيدروجيني الامثل للفعالية 6 وثبات الانزيم 6 - 7 وظهرت اقصى فعالية للانزيم عند درجة حراره 40 م واحتفظ الانزيم بحدود 85 - 100% من فعاليته في درجات الحرارة (30 - 45) م ، واحتفظ الانزيم ﺒ 12% فقط من فعاليته عند حضنه بدرجة حراره 50 م لمدة 30 دقيقة. كما درس تاثير بعض الايونات الفلزية في فعالية الهيالورونيديز ، وجد ان لايونات الصوديوم بتركيزي 5 و10 ملي مولار فعلا تنشيطيا للانزيم اذ احتفظ الانزيم ﺒ 107% و102% من فعاليته على التوالي. بينما ثبطت فعالية الانزيم بصورة واضحة عند معاملته بايونات الحديديك Fe+3 ، اذ احتفظ الانزيم ﺒ 50% و15% من فعاليته عند معاملته ﺒ عند معاملته 5 و10 ملي مولار على التوالي ، فضلا عن ذلك لوحظ ان تاثير كل من : ايونات الحديدوز Fe+2 ، والنحاس Cu+2 ، والخارصين Zn+2 ، والزئبق Hg+2 كان اقل من الايونات السابقة، اذ احتفظ الانزيم ﺒ 60% , و53% , و74% , و66% من فعاليته عند معاملته بتركيز 10 ملي مولار لكل من الايونات على التوالي. كذلك احتفظ الانزيم بكامل فعاليته عند معاملته بمادتي EDTA وازايد الصوديوم بتركيز 5 ملي مولار ، بينما احتفظ الانزيم ﺒ 95% و76% من فعاليته عند معاملته ﺒ 5 ملي مولار من المركب Phenyl methane sulphonyl fluoride والسيستايين. | 1 - A total of 140 Samples including urine infections wounds, burns, sputum, blood, stool and lung fluid samples were collected from different hospitals and medical centers in Baghdad city, during the period June _September 2005. Fifty five isolates belonged to Pseudomonas spp.(40.7%) of which 38.2% belonged to infections and wound samples.2 - Sensitivity of local Isolates was examined against 12 antibiotics, Results showed different and multi resistance patterns to antibiotics. All isolates were resistant to Ampicillin , Augmentin and Rifampin. 82% of which were resistant to 6 - 9 antibiotics, while 14.5% of the isolates were resistant to 1 - 5 antibiotics and only 3.7% were resistant to 10 - 12 antibiotics. Amikacin, Ciprofloxacin and Gentamycin were found to be the most effective agents against most of the isolates.3 - Detection of some virulence factors (hemolysin, elastase and urease) by the local isolates was studied. Results showed that 78.1% of the isolates produced hemolysin (mainly infection and wound isolates, then urine isolates). 85.4% of were mainly elastase producers (wound and infection, ear and urine). Results also showed that 80% of isolates were able to produce urease mostly belonged to urine, stool and infection and wound isolates.4 - Detection of the ability of Pseudomonas spp.local isolates to produce hyaluronidase enzyme by using Brain heart infusion (BHI) agar that contains hyaluronic acid was studied. 72.7% of the isolates were able to produce the enzyme.5 - The relation between hyaluronidase production and other virulence factors (hemolysin, elastase and urease) was studied. The results showed that 43.6% of the isolates produced the three studied virulence factors with hyaluronidase, while 18.18% of the isolates produced two of the virulence factors with hyaluronidase, and onlysix isolates produced one virulence factor and hyaloronidase. The results also showed that the groups concerning virulence factors increased from 7 to 11 when the hyaluronidase was added as a forth virulence factor.6 - Five isolates (P27, P30 , P10 , P2, P52) of Pseudomonas spp.producing hyaloronidase were selected to carry out studies on the plasmid profile. Results showed that all five isolates contained one plasmid.7 - The results of plasmid curing by using ethidium bromide showed that the plasmid of the local isolates P2 was curried by treatment with 2000μg/ml ethidium bromide, the curried isolate kept the ability to produce hyaluronidase. 8 - Five local isolates that gave large inhibition zones on (BHI) agar were chosen for specific activity determination by using submerged cultures. The local isolate P27 was chosen to be the most producing one, it’s specific activity was 2.7 unit/mg protein.9 - The optimum conditions for hyaloronidase production determined by using submerged cultures. Results showed that the optimum media for hyaluronidase production was (BHI) broth containing 0.5% yeast extract and 0.25 mg/ml hyaluronic acid with an inoculum of 1×106 cell/ml at an optimum pH 6, after 18 hours incubation in a shaker incubator 50 cycle/min.10 - Hyaloronidase was purified from selected local isolate by using several steps including concentration by ammonium sulphate in saturation percentage of 50%, this step was followed by DEAE - Cellulose ion exchange chromatography technique and gel filtration technique using sephacryl S - 300 colum. Purification fold and recovery were 10.8 and 20.4% respectively.11 - The optimum pH for enzyme activity and stability was 6 and 6 - 7 respectively. Maximum enzyme activity was obtained at 40C º and the enzyme retained 85 - 100% and 12% of it’s initial activity at (30 - 45) Cº and 50 C º respectively.12 - The effect of some metal ions on hyaluronidase activity was studied, 5 and 10 mμ of Na+2 increased enzyme activity to 107% and 102% respectively, while the enzyme kept only 50% and 15% of it’s initial activity when treated with 5 and 10 mμ of Fe+3 respectively. The enzyme also retained 60%, 53%, 74% and 66% of it’s activity when treated with 10mμ of Fe+2, Cu+2, Zn+2 and Hg+2 respectively. EDTA and sodium azide showed no effect on hyaluronidase activity, while retained only 95% and 76% of it’s initial activity when treated with 5 mμ of PMSF and cysteine respectively.
1 ... 20 21 22 23 24 ... 49