Author name:
حسنين غسان حسين
Supervisor name:
سالم رشيد حمودي العبيدي
Abstract:
يعد سرطان الثدي واحدا من الاورام السرطانية الاكثر شيوعا في النساء بالعالم يوقدر بحوالي 1,7 مليون حالة جديدة مسجلة في عام 2012 (بنسبة 11,9% من باقي الاورام السرطانية). في العراق سرطان الثدي يعتبر الاكثر شيوعا لدى النساء ويشكل ما نسبته 34,8% من بين باقي الاورام السرطانية (سجلات وزارة الصحة). الخلايا الجذعية السرطانية تعرف بانها : مجموعة صغيرة من الخلايا السرطانية داخل الورم السرطاني تعتبر المخزون لاعادة تكاثر الخلايا السرطانية وتكوين تنوع خلوي ذات تخصص مختلف في مراحل نموها, من المؤشرات المقبولة للخلايا الجذعية السرطانية هي : CD24 , CD44 , CD133 , EPCAM وALDH1).الهدف من الدراسة : تقييم التعبير المناعي النسيجي الكيميائي لمؤشرات الخلايا الجذعية السرطانية (CD24 , CD44 وALDH1) في كل من النسيج الطبيعي للثدي , الورم الغدي الليفي الحميد في الثدي وسرطان الثدي (بنوعيه سرطان الثدي القناتي الاختراقي وسرطان الثدي الفصي الاختراقي) وعلاقة هذا التعبير المناعي النسيجي الكيميائي مع المتغيرات السريرية المرضية (العمر , حجم الورم السرطاني , درجة التمايز للورم السرطاني وحالة الغدد اللمفاوية).المرضى , المواد وطرق العمل : من تاريخ نيسان 2012 الى اذار 2013 , تم اخذ 133 عينة نسيجية تشمل 37 عينة نسيجية للمجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني ( 12 عينة لنسيج طبيعي للثدي و25 عينة للورم الحميد ) و96 عينة نسيجية للمجموعة المصابة بالورم السرطاني ( تتالف من 51 حالة رفع ثدي كامل و45 عملية استئصال للورم) حيث تكونت من 87 حالة من سرطان الثدي القناتي الاختراقي وتسع حالات من سرطان الثدي الفصي الاختراقي. اخذت الانسجة الارشيفية المطمورة في شمع البارافين للمدة بين 2011 و2013 من ملفات المختبرات التعليمية لدائرة مدينة الطب ومختبر الغدق التخصصي الخاص ومن معهد الطب العدلي في بغداد. وكل المعلومات السريرية تم استحصالها من البيانات الخاصة بالمرضى. كل العينات اعيد تقيمها بصبغة الهيماتوكسلين والايوسين وتم التحري عنها بواسطة الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية للمؤشرات (CD24 , CD44 وALDH1).النتائج : وجد انه هناك علاقة ذات دلالة احصائية بين الحالة الصحية للثدي (ان كان الثدي طبيعي , به ورم حميد او ذات ورم سرطاني) والتعبير المناعي النسيجي الكيميائي للمؤشرات الثلاثة للخلية الجذعية السرطانية (CD24, CD44 وALDH1).التعبير المناعي النسيجي الكيميائي لمؤشر CD24 في نسيج الثدي : عشرة حالات من اصل 37(27%) للمجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني يكون التعبير المناعي موجب. بالنسبة للمجموعة المصابة بالورم السرطاني , 41 حالة من اصل 87(47,1%) من حالات سرطان الثدي القناتي الاختراقي واربع حالات من اصل 9(44,4%) من حالات سرطان الثدي الفصي الاختراقي يكون التعبير المناعي موجب. ولم تكون العلاقة ذات دلالة احصائية بين مؤشر (CD24) والمتغيرات السريرية المرضية (العمر, حجم الورم, درجة التمايز وحالة الغدد اللمفاوية).التعبير المناعي النسيجي الكيميائي لمؤشر CD44 في نسيج الثدي : ثمانية حالات من اصل 37(21,6%) للمجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني يكون التعبير المناعي موجب. اما ما يخص المجموعة المصابة بالورم السرطاني, 27 حالة من اصل 87(31,03%) من حالات سرطان الثدي القناتي الاختراقي وثلاث حالات من اصل 9(33,3%) من حالات سرطان الثدي الفصي الاختراقي يكون التعبير المناعي النسيجي موجب. توجد علاقة ذات دلالة احصائية بين مؤشر CD44 للخلايا الجذعية السرطانية مع حالة الغدد اللمفاوية حيث كانت قيمة (P) تساوي (0,0140). ولم يكن هنالك علاقة ذات دلالة احصائية بين مؤشر (CD44) وباقي المتغيرات السريرية المرضية (العمر, حجم الورم ودرجة التمايز).التعبير المناعي النسيجي الكيميائي لمؤشر ALDH1 في نسيج الثدي ينقسم الى : 1. التعبير المناعي لمؤشر ALDH1 في نسيج الخلايا السرطانية : سبعة حالات من اصل 37(18,9%) للمجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني يكون التعبير المناعي موجب. وفيما يخص المجموعة المصابة بالورم السرطاني, 34 حالة من اصل 87(39,2%) من حالات سرطان الثدي القناتي الاختراقي وثلاث حالات من اصل 9(33,3%) من حالات سرطان الثدي الفصي الاختراقي يكون التعبير المناعي موجب. توجد علاقة ذات دلالة احصائية بين مؤشر ALDH1 للخلايا الجذعية السرطانية مع حالة درجة تمايز الورم حيث كانت قيمة (P) تساوي (0,0323). ولم يكن هنالك علاقة ذات دلالة احصائية بين مؤشر ALDH1 وباقي المتغيرات السريرية المرضية (العمر, حجم الورم وحالة الغدد اللمفاوية).2. التعبير المناعي لمؤشر ALDH1 في النسيج المحيط للخلايا السرطانية : ثمانية حالات من اصل 37(21,6%) للمجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني يكون التعبير المناعي متوسط الى قوي التعبير في الخلايا المحيطة للخلايا السرطانية و29(78,4%) حالة يكون التعبير المناعي منعدم الى ضعيف في هذه الخلايا. اما ما يخص مجموعة المصابة بالورم السرطاني للثدي, 47 حالة من اصل 87(54,2%)من حالات سرطان الثدي القناتي الاختراقي وخمس حالات من اصل 9(55,6%) من حالات سرطان الثدي الفصي الاختراقي يكون التعبير متوسط الى قوي. من هذه الدراسة وجد انه لايوجد علاقة ذات دلالة احصائية بين التعبير المناعي لمؤشر ALDH1 في النسيج المحيط للخلايا السرطانية والمتغيرات السريرية المرضية (العمر, حجم الورم, درجة التمايز وحالة الغدد اللمفاوية).الاستنتاج : - توجد علاقة ذات دلالة احصائية بين مجموعة الغير مصابة بالورم السرطاني والمجموعة المصابة بالورم السرطاني للثدي من حيث التعبير المناعي للمؤشرات (CD24, CD44 وALDH1) في الخلايا الجذعية السرطانية. - هنالك علاقة ذات دلالة احصائية بين فرط التعبير المناعي لمؤشر CD44 وحالة الغدد اللمفاوية في حالات سرطان الثدي. - في هذه الدراسة توجد علاقة ذات دلالة احصائية بين فرط التعبير المناعي لمؤشر ALDH1 في الخلايا السرطانية ودرجة التمايز في الورم السرطاني للثدي. - نتائج المتحصلة من هذه الدراسة تقترح بان فرط التعبير المناعي النسيجي الكيميائي للمؤشرات المناعية (CD24, CD44 وALDH1) قد ترتبط بحالة تحول الورم الى النوع السرطاني وكذلك بالحالة البايولوجية لسرطان الثدي. | Breast Cancer is the most frequent diagnosed cancer among women worldwide with an estimated 1.7 million new cancer cases diagnosed in 2012 (11.9% of all cancers). In Iraq, cancer of the breast is the commonest cancer in females, in 2010 constituted 34.8% of all other malignancies in women. Cancer stem cells have been defined as - a small subset of cancer cells within a cancer that constitute a reservoir of self - sustaining cells with the exclusive ability to self - renew and to cause the heterogeneous lineages of cancer cells that comprise the tumor, the well - accepted cancer stem cell markers are CD44, CD24, CD133, CD166, EpCAM and ALDH1.Aim of the studyTo assess the immunohistochemical expression of CD24, CD44 and ALDH1 as stem cell markers in normal breast tissue, fibroadenoma and breast carcinoma (Invasive ductal and Invasive lobular carcinomas), in correlation with some clinicopathological parameters (Age of patient, tumor size, tumor grade and lymph node status).Patients, materials and methods From April 2012 to March 2013, total of (133) tissue samples of surgical breast biopsies were included in this retrospective study, 37 cases of non - malignant breast cases (12 cases of normal breast tissue and 25 fibroadenoma case) and 96 cases of malignant breast cases (51 mastectomy case and 45 cases of excisional biopsies) were all of them invasive breast carcinoma, eighty seven cases were of invasive ductal carcinomas and nine cases of invasive lobular carcinomas. The samples were obtained from archival paraffin embedded blocks for the years (2011) to (2013) from the histopathology files of department of pathology in Teaching Laboratories of medical city Hospital, Al - Ghadaq’s private Laboratory and Institute Of Forensic Medicine in Baghdad.. The histopathological diagnosis had been revised and all cases were stained by immunohistochemical technique with CD24, CD44 and ALDH1 tumor markers.Results There was significant difference among the three states of health status (normal breast cases, fibroadenoma cases and invasive breast carcinoma) and immunohistochemical expression of stem cell marker (CD24, CD44 and ALDH1 epithelial and stromal expression). Regarding Immunohistochemical expression of CD24, ten cases out of 37(27%) of non malignant breast cases were positive of CD24 expression. For malignant breast cases, forty one invasive ductal carcinoma cases out of 87(47.1%) and four invasive lobular carcinoma cases out of 9(44.4%) were CD24 with positive expression, and there was no significant difference regarding CD24 expression in relation to different clinicopathological variables (age of the patient, tumor grade, lymph node status and tumor size). For CD44 immunohistochemical expression, eight cases out of 37(21.6%) of non malignant breast cases were positive of CD44 expression. For malignant breast cases, Twenty seven invasive ductal carcinoma cases out of 87(31.03%) and three invasive lobular carcinoma cases out of 9(33.3%) were positive CD44 expression, and there was a significant difference regarding CD44 expression in relation to lymph node status of the patients (P=0.0140). Regarding the age of the patient in invasive breast carcinomas there was no significant difference between CD44 expression and the three groups of the patient age, so as for grade of tumor and tumor size (P > 0.05). Regarding ALDH1 epithelial immunohistochemical expression, seven cases out of 37(18.9%) of non malignant breast cases were positive of CD44 expression, while for malignant breast cases, thirty four invasive ductal carcinoma cases out of 87(39.2%) and three invasive lobular carcinoma case out of 9(33.3%) showed a positive expression of epithelial ALDH1. There was no significant difference in epithelial ALDH1 expression between different age groups of the patients. CD44 immunohistochemical expression was significantly different in different grades of invasive breast carcinomas (P=0.0323). The mean value of ALDH1 - E expression showed no significant difference between cases with positive lymph node involvement and those with a negative lymph node involvement, also there was no significant correlation in epithelial ALDH1 immunohistochemical expression in relation to the tumor size. For stromal ALDH1 immunohistochemical expression, eight cases out of 37(21.6%) of non malignant breast cases were moderate/strong of stromal ALDH1 expression and 29(78.4%) cases were none/weak expression. Regarding malignant breast cases, forty seven invasive ductal carcinoma cases out of 87(54.2%) and five invasive lobular carcinoma cases out of 9(55.6%) were moderate/strong expression of stromal ALDH1, and there was no significant difference regarding stromal expression of ALDH1 in relation to different clinicopathological variables (age of the patient, tumor grade, lymph node status and tumor size). Conclusions • A statistical significant correlation has been found between Malignant Breast cases and Non Malignant Breast cases regarding the Immunohistochemical over expression of stem cell markers (CD24, CD44 and ALDH1 epithelial and stromal Expression).• There was a statistical significant correlation between CD44 immunohistochemical expression and lymph node status in invasive breast carcinomas cases.• A statistical significant correlation has been found between ALDH1 Epithelial immunohistochemical expression and Grade of tumor in cases of invasive breast carcinoma. • The results of this study suggest that higher stem cell markers (CD24, CD44 and ALDH1) expression may be associated with malignant transformation and progression in breast cancer biology
