Share
استهداف الخلية السرطانية بواسطة نانو الهجين الحويصلي كنهج جديد لموت الخلايا المبرمج == Targeting Cancer Cell by Nano Hybrid Liposome : A new Approach for apoptosis
Author name:
نورا عبد عواد
Supervisor name:
قسمة محمد تركي | ناهي يوسف ياسين
General topic:
Medicine
Specific topic:
Clinical Biochemistry
Degree:
Doctorate
University:
University of Baghdad - Faculty Of Medicine
Language:
English
University location:
Baghdad
First pages:
19T1349 - p.pdf
Abstract:
الخلفية : يعتبر العلاج الهادف للسرطان بالنانو حقلا مهما للبحث عن علاجات خاصة بالسرطان لتجنب الاعراض الجانبيه للادويه الكيمياويه التقليديه ،ولان خلايا السرطان تعاني من عطل في منظومة الموت المبرمج يؤدي هذا الى تفضيلهه لمسارات البقاء على قيد الحياة ومقاومة الادويه ولهذا يعتبر تحفيز الموت المبرمج في الخلايا السرطانية من الوسائل المفضلة للتطبيق في اي دواء مستحدث لعلاج السرطان .ان اهداف العلاج بالنانو هو رفع الكفاءة العلاجية للدواء وانتقائيتة والتغلب على مقاومة الخلايا له والتي تمثل عقبة في علاج السرطان.وقد يفيد استعمال الاجسام النانويه الدهنية المهجنة بكل هذه الاغراض في علاج السرطان .تتكون الاجسام النانوية الدهنية المهجنه من مع الايثر)C12(EO)23)L - DMPC والذي يتداخل انتقائيا مع جدار الخلية السرطانية مؤديا الى موتهاالاهداف : تقييم قابلية اجسام النانو الدهنيه المهجنه والمصنعه محليا على احباط نمو خلايا سرطان عنق الرحم والرابدومايوساركوما كتاكيد لحصول الموت المبرمج في زراعتها المحضونه مع الهجين الحويصلي المصنع مختبريا.طرق العمل حضرت اجسام النانو الدهنية الهجينة من مزج [DMPC & C12(E0)23] ومزجها في وسط زررعي خاص ثم بعد ذلك يتم وضعها في حمام مائي لامواج فوق الصوتية Sonicatore) ) للحصول على الشكل الكروي والحجم النانوي الهجين وللتاكد من ذلك تم فحصها باستخدام المجهر الالكتروني الماسح (SEM) ومجهر القوة الذرية (AFM) , وتم تحديد حيوية الخلايا عن طريق احتساب نسه الخلايا الميتة الى الحية بعد تصبيغهه بالصبغات التي تبين سمية الخلايا Crystal Violate&MTTوتم فحص والتاكد من الموت المبرمج بتقنيات متعدده منها الصبغات المتفلوره واختلال شدة نفاذية المايتوكوندريا وقياس فعاليه انزيم PCR وال, (Caspase - 3) النتائج : النتائج تمكن الهجين الحويصلي الواقع ي مجال وانتقائية النانو من احباط انقسام خلايا سرطاني عنق الرحم، والرابدومايوساركوما وبتركيز نصفي (IC50) مساوي لــ (0.2 mmol)، بينما لم تتاثر الخلايا اللمفاوية الطبيعية بهذه الظروف.وكان التاثير واضحا في كل الطرق التي استعملت لقياس الموت المبرمج وقدمت ادله واضحة على ان الهجين الحويصلي قادر على تحفيز الموت المبرمج في خلايا سرطاني عنق الرحم والرابدمايوساركوما عند حضنها مع الجرعه المحبطه النصفية للهجين الحويصلي ولمدة 24 ساعه .الاستنتاجات : يمكن اعتبار الهجين الحويصلي المصنع كوسيلة ممكنه للعلاج بالنانو وباقل اضرار جانبيه للخلايا الطبيعيه مقارنة مع العلاجات المستعمله الاخرى. وتوصي هذه الدراسة ببحث طريقة عمل الهجين الحويصلي وقابليته على احباط نمو انواع اخرى من الخلايا السرطانيه في المختبر وفي البحوث الحيه | Background : Cancer targeted nanotherapy represent an exciting field in the search for new cancer specific therapies to avoid conventional chemotherapy side effects. Because cancer cells usually have malfunctioning apoptotic machinery which favors survival pathways and drug resistance, cancer cell apoptosis is the favorable event to be induced in any new anticancer agent development. Nanotherapy goals are to elevate therapeutic efficiency, selectivity, and overcome drug resistance as major obstacle in cancer treatment. Hybrid nanoliposomes (nHLs) may fulfill all these features in cancer therapeutics.Hybridnanoliposomes (HLs) composed of L - α - dimyristoylphosphatidylcholine (DMPC) and Polyoxyethylene (23) dodecyl ether (C12 (EO)23) can integrate selectively into the cancer cell membrane inducing cancer cell death.Objectives : to assesses the capacity of locally synthesized hybrid nanoliposome to inhibit the growth of cervix cancer cells (HeLa) andrabdomyosarcoma(RD)to confirm the event of apoptosis in HeLa and RD cell lines incubated with in - house synthesized and characterized nHLs.Methods : hybrid nanoliposomes(nHLs) synthesized by sonication method from a mixture of DMPC and C12(EO)23 in tissue culture media RPMI - 1640 for 6 hours at 300W and 40ºC then filtration with 0.2µm filter. Shape and size characterized with scanning electron microscope (SEM) and atomic force microscope(AFM). Viability of HeLacell,RD cell, and normal lymphocytes challenged with HLs were determined using MTT and Crystal violate assay. Induction of apoptosis in the challenged cells was examined by staining with fluorescence dye mix cridine orange/propidium iodide,cell gel electrophoresis, mitochondrial membrane potential disruption, caspase - 3 activity and real time PCR.Results : synthesized nHLs were in nanozise range and selectively inhibited HeLa cells proliferation with IC50 of 0.2mM with no effect against normal lymphocytes. Apoptosis was evident ofHeLa cells population and RD was evident of treated with nHLs.All apoptosis detection procedures used gave a clear defined significant indication that nHLs was capable of inducing apoptosis in HeLa and RD cells incubated with the IC50.Conclusion : synthesized nHLs may considered as promising nanotherapy, this study recommends further inspections for the mechanism of action of nHLs and there capabilities to inhibit other types of cancers both invitro and in vivo.
