Author name:
اسيل نبيل كامل
Supervisor name:
باسل عويد محمد صالح | كفاح حمدان
Abstract:
سرطان الثدي هو الورم الخبيث الاكثر شيوعا في النساءويعتبرالسبب الرئيسي الثاني لوفاة مرضى السرطان في العالم. تعتبر الوقاية والكشف المبكر هوالطريقة الاكثر فعالية لمكافحة السرطان. خلال العقد الماضي ، جذبت الكثير من علامات البيوكيميائية لسرطان الثدي انتباه العديد من الباحثين. هذه العلامات يمكن استخدامها في مراقبة العلاج ، والتنبؤ بدرجة اصابة الانسجة ، وسلوك الورم ، ومدى انتشاره ، واحتمالية اصابةالعقد الليمفاوية. من بين هذه الواصمات الحيوية ، عامل نمو بطانة الاوعية الدموية (VEGF) ، خلايا البلعوم المحفزة للحفظ (M - CSF)، ومصفوفة الميتالوبروتنيز MMP - 2))، ومثبطات الانسجة لمركب الميتالوبروتينيز(TIMP - 2). تشير الدلائل المتزايدة الى ان قياس VEGF هو افضل مرشح لتشخيص سرطان الثدي (افضل من مستضد السرطانCA 15 - 3 ) خاصة في المرحلتين الاولى والثانية وكذلك في التمايز بين الورم الخبيث وورم الثدي الحميد. اظهرت الدراسات ان قياس VEGF لا سيما مع CA 15 - 3 ، اعلى فائدة وقوة تشخيصية في الكشف عن سرطان الثدي.وفي الاونة الاخيرة ، تم التوصل في البحوث الحديثة الى ان TIMP - 2 قد يكون ذو فائدة في التشخيص المبكر لسرطان الثدي في مراحله الاولى زتهدف هذه الدراسة الى : 1) قياس تركيزات البلازما لبعض المرقمات الحيوية الجديدة بما في ذلك : عامل نمو بطانة الاوعية الدموية (VEGF) ، ومصفوفة الميتالوبروتينيز ((MMP - 2 ، ومثبط الانسجة لمركب الميتالوبروتينيز ((TIMP - 2 ، وعامل تحفيز مستعمرة البلعم (M - CSF) بالاضافة الى مثبط السرطان 15 - 3 ( CA15 - 3) في النساء المرضى الذين يعانون من ورم الثدي بالمقارنة مع النساء الاصحاء.2) التحقيق في الاداة التشخيصية لكل من المرقم الحيوي المقاس (وبالاقتران مع بعضها البعض) في الكشف عن ورم الثدي و(3) مقارنة النتائج مع معلمات الهستوباثولوجي ( العمر, الجنس , الحالة الزوجية , سن الياس حجم الورم , مرحلة الورم السرطاني , مستقبل الاستروجين , مستقبل الروجيستيرون ومستقبلات 2 Her)المواد وطرق العمل : اشتملت الدراسة على 88 امراة عراقية تم تقسيمهم الى ثلاثة مجاميع : 38 امراة مصابة بسرطان الثدي (Group I, BC) ، 25 امراة مصابات بورم الثدي الحميد الغدي الليفي Fibroadenoma (FA) (Group II, FA benign ) اللواتي تم تشخيصهن من قبل مجموعة اخصائي الاورام و25 امراة سليمة (كمجموعة ضابطة). تم تشخيص ورم الثدي من قبل مجموعة من الاخصائيين في الاورام. حيث تم التشخيص بناء فحوصات تجرى على عينة تؤخذ من خزعة نسيجية من ورم الثدي او بعد استئصال الثدي. تم تنفيذ اجراءات التدريج العلاجي على اساس فحوصات الجسم والدم ، والتصوير الشعاعي للثدي ، وفحص الثدي بالموجات فوق الصوتية ، والاشعة السينية للصدر حسب توفرها وضرورتها. تم اجراء تصنيف الاورام وتدريجها اعتمادا على معايير الاتحاد الدولي لمكافحة سرطان الاورام - (UICC - TNM) واللجنة الامريكية المشتركة لمرحلة مكافحة السرطان. تم تقسيم النساء المصابات بسرطان الثدي الى مجموعات فرعية على اساس مراحل السرطان ؛ المجموعة (ا) : تشمل 12 امراة في المرحلة الاولى (T1N0M0) ، حيث حجم الورم <2 سم ، المجموعة ب : 14 امراة في المرحلة الثانية (T2N0M0 ، T2N1M0 ، T3N0M0) ، حجم الورم (2 - 5) سم ومجموعة C : تشمل 12 امراة في المرحلة الثالثة (T2N2M0 ، T3N1M0 ، T3N2M0 وT4N2M0) ، كما كان لديهم حجم الورم > 5 سم. في هذه الدراسة تم استبعاد النساء المصابات بسرطان الثدي في المرحلة المتقدمة (المرحلة الرابعة) ، والنساء اللواتي يعانين من المرض سابقا او اللواتي يعانين من انواع اخرى من السرطانات؛ السرطانات التناسلية الانثوية (سرطان المبيض ، سرطان عنق الرحم ، سرطان الرحم) ، اورام الكلى ، القولون والمستقيم ، البنكرياس ، الرئة والراس والعنق. ايضا ، تم استبعاد المدخنين والنساء اللواتي يتناولن المشروبات الكحولية من هذه الدراسة. تم سحب عينة الدم من كل امراة لقياس VEGF ، M - CSF ،TIMP - 2,MMP - 2 و3 CA15 - . ايضا تم قياس مصل 25 هيدروكسي فيتامين D (25OHD) ومعلمات الدهون بما في ذلك الكولسترول الكلي (TC) ، والدهون الثلاثية (TG) ، والكوليسترول الدهني عالي الكثافة (HDL - C) ، والكولسترول الدهني منخفض الكثافة (LDL - C) فقط في المجموعة الاولى والمجموعة الثانية | Breast cancer (BC) is the most common malignancy in women and the second leading cause of their death from cancer in the world. The most effective way to combat cancer is its prevention and early detection. During the last decade, biochemical markers of breast cancer have attracted the attention of many researchers. Among these biomarkers, the interest points to Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), Macrophage Colony Stimulating Factor (M - CSF), Matrix Metalloproteinase - 2 (MMP - 2), Tissue Inhibitors of Metalloproteinase - 2 (TIMP - 2). Growing evidence indicates that measurement of VEGF maybe the best candidate for BC diagnosis (better than CA 15 - 3) especially in stages I and II as well as in the differentiation between BC and benign breast tumor. More recently it has been reported that TIMP - 2 maybe useful in early diagnosis of BC and differentiation of breast cancer stages. The aim of this study are to : (1) Measure the plasma concentrations of some of new biomarkers including : Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), Matrix Metalloproteinase - 2 (MMP - 2), Tissue Inhibitor of Metalloproteinase - 2 (TIMP - 2) and Macrophage - Colony Stimulating Factor (M - CSF) in addition to CA 15 - 3 in women patients with breast tumor in compare son with healthy control women, (2) Investigate the diagnostic utility of each of the measured biomarker (and in combination with each other) in detection of breast tumor and (3) Correlate the findings with the clinicopathological parameters (age, menopause, marital status, stages, tumor size, Estrogen Receptor (ER), Progesterone Receptor (PR) and Her - 2/neu receptor) in those patients.Subjects and Methods : Eighty - eight Iraqi women were enrolled in the study; 38 women with primary breast cancer (BC, Group I), 25 women with Fibroadenoma (FA) benign breast tumor (FA, Group II) and 25 apparently healthy women (served as control group). The diagnosis of breast tumor was achieved by the Oncology group. Histopathology investigations were performed by Consultant Histopathologic based on tissue biopsy of mammary tumor or after mastectomy. Tumor classification and staging were performed depending on criteria of International Union against Cancer Tumor - Node - Metastasis (UICC - TNM) classification and the American Joint Committee on Cancer Staging. Accordingly, women with breast cancer were classified into subgroups based on the stage of their BC; Group A : 12 women with stage I, Group B : 14 women with stage II, and Group C : 12 women with stage III. Exclusion criterion includes those women with breast cancer of advanced stage (stage IV), a previous history of multiple type of cancers; female reproductive tract cancers (ovarian, cervical and endometrial cancers), renal, colorectal, pancreatic, lung, head and neck tumors. Blood sample was aspirated from each woman for the measurement of plasma VEGF, M - CSF, MMP - 2, TIMP - 2 and serum CA15 - 3 by using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Also, serum vitamin D3 was measured in group I only using ELISA and serum lipid profile parameters were measured in group I and group II. Results : The mean (±SD) values of plasma levels of VEGF (p<0.001), MMP - 2 (p< 0.001), TIMP - 2 (p < 0.001), M - CSF (p < 0.05), and CA 15 - 3 (p<0.001) of group I was significantly higher compared to that of group II and controls. However, the mean value of plasma MMP - 2 was the only measured biochemical marker which was significantly increased in group II compared to controls (p<0.001). Regarding the BC stages, the mean values of all the measured biochemical markers were significantly higher in stage III than in stage I and stage II (p<0.001). Interestingly, the mean (± SD) value of plasma TIMP - 2 levels was the only biochemical marker of the measured ones which was significantly increased in stage II than in stage I (p=0.001). The cut - point value of plasma VEGF (>55.73 pg/ml) or TIMP - 2 (>102 ng/ml) (for both, AUC=1.0) was the excellent test in differentiating women with stage I of BC from healthy women. While that of VEGF (>55.73 pg/ml), TIMP - 2 (>102 pg/ml) or CA15 - 3 (>10.82 u/ml) (for all, AUC=1.0) was considered as the best test in discriminating the BC stage II from healthy women. While, the cut - point value of plasma TIMP - 2 (>142 ng/ml) which has the highest (AUC=1.0) considered as the excellent test in differentiating BC stage I from women with fibroadenoma benign tumor (FA). While that of VEGF (>88.67 pg/ml) or TIMP - 2 (>254 ng/ml) which has the highest (for each, AUC=0.991) was considered as the best test in discriminating the BC stage II from FA. In addition, the plasma measurement of VEGF has the superior diagnostic utility in differentiation of FA women and healthy control women (p<0.001, AUC=0.998).Conclusion : Measurement of plasma VEGF (cutoff >55.22pg/ml) or TIMP - 2 (cutoff >102 ng/ml) is the best biochemical marker in diagnosis of stage I or stage II BC and differentiates them from healthy women; they have more diagnostic utility than CA 15 - 3. Also, measurement of TIMP (cutoff > 142 ng/ml) has the excellent diagnostic utility in diagnosis and differentiation of stage I BC from benign tumor fibroadenoma (FA). Moreover, TIMP - 2 (cutoff > 254 ng/ml) or VEGF (cutoff > 88.67 pg/ml) has the superior diagnostic utility over that of CA 15 - 3 in diagnosis and differentiation of stage II BC from FA. Plasma measurement of TIMP - 2 was the best biochemical marker in studying early progression of BC; it can differentiate stage II from stage I BC. Furthermore, plasma measurement of VEGF was found to be the excellent parameter in differentiation between women with FA from healthy ones.
