Author name:
نهى محمد موسى الدوري
Supervisor name:
فوزية احمد الشنوي
Abstract:
ان هدف هذه الدراسة اختبار فعالية كل من المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان Punica granantum L. وثمار الشفلحL. Capparis spinosa بتراكيز )300،200،100،50 (مليغرام /مليليتر.كما تم خلط المستخلصات المائية لقشور الرمان وبتراكيز (100،50) مليغرام /مليليتر مع (200،100) مليغرام /مليليتر من المستخلص المائي لثمار الشفلح وبالتراكيزنفسها تم خلط المستخلصات الكحولية وتقويم فعاليتها في تضعيف حيوية الرؤيسات الاولية لطفيلي المشوكة الحبيبية Echinococcus granulosus .Batch,1786 الماخوذة من كيس مائي لكبد احد الاغنام خارج الجسم In vitro لمعرفة جودة وفعالية التراكيز في قتل الرؤيسات الاولية ليتم اختبارها فيما بعد داخل الجسم ,اتضح من الدراسة خارج الجسم الحي (في الزجاج ) اذ انخفضت حيوية الرؤيسات الاولية عند استعمال المستخلص المائي لقشور الرمان وبتراكيز 300,200مليغرام /مليليتر والمستخلص المائي لثمار الشفلح ووبنفس التراكيز وللخليط المائي بتركيز (200+100)مليغرام /مليليتر لهما فحصل القتل التام للرؤيسات في الزمن60 ,60, 90,45,90دقيقة لكل من التراكيز .بينما تميزت المستخلصات الكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح والخليط الكحولي لهما فاحدثت القتل التام للرؤيسات في الزمن30,30 60,دقيقة عند التراكيز (200+100),300مليغرام /مليليتر وقبل اجراء اختبار فعالية المستخلصات داخل الجسم تم تحديد الجرعة المميتة المتوسطة التي بلغت 11.38,8.8,10,8.1,10.7,9.41غرام / كيلوغرام بالنسبة للمستخلصات المائية للرمان والشفلح والمستخلصات الكحولية للرمان والشفلح والخليط المائي والخليط الكحولي على التوالي, لكي تعد امينة الاستعمال وقليلة السمية . كما تضمنت الدراسة اختبار التراكيز المناسبة ومعاملتها بمجاميع الفئران المحقونة بالرؤيسات الاولية اما مجموعة السيطرة السالبة فتم حقنها بمحلول الملح الفسيولوجي Normal saline من اجل بيان تاثير المستخلصات النباتية داخل الجسم كما تم دراسة التغيرات الحاصلة في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية والنسب المئوية لاختزالها في الجسم اذ تبين حدوث انخفاض في معدلات اعداد واوزان واقطار الاكياس العدرية الثانوية المتطورة في الفئران المعاملة بالمستخلصات المائية لنباتي الرمان والشفلح وزيادة نسب الاختزال قياسا بمجموعة السيطرة الموجبة في بقية المجاميع حيث وصلت النسبة المئوية لاختزال اعداد الاكياس العدرية الى 100%في بقية المجاميع المعاملة .اما التغيرات الحاصلة في معدلات اوزان الكبد والطحال ومعدلات التضخم فقد لوحظ حدوث تباين في معدلات الاوزان والتضخم اذ تقاربت قيم معدلات الوزن وتضخم الكبد للمجموعة المعاملة بالمستخلص المائي للشفلح والرمان مع مجموعة السيطرة الموجبة ,بينما حدث انخفاض معنوي واضح لهذه المعدلات في بقية المجاميع وكانت الافضلية للمجموعة المعاملة بالخليط الكحولي والمجموعة المعاملة بالمستخلص الكحولي للرمان اذ اقتربت من معدلات السيطرة السالبة .هذا وشملت الدراسة تقويم تاثير هذه المستخلصات النباتية والالبندازول Albendazole من دراسة التغيرات النسيجية الحاصلة في الكبد والطحال, ففي الكبد ظهرت تغيرات نسيجية عديدة اهمها وجود احتقان في بعض اوردة الكبد مع تغيرات لحجم الخلايا الكبدية وزيادة في اعداد خلايا كوفر Kupffer cells الدفاعية التي كانت اقل مما ظهر في مجموعة فئران السيطرة الموجبة ,اما الطحال فقد اظهر توسع اللب الابيض على حساب اللب الاحمر وزيادة ارتشاح الخلايا المولدة للصفيحات الدموية (خلايا النواء Megakaryocytes). وكانت هذه التغيرات اقل حدة في الفئران المعاملة بالخلط الكحولي. كما كانت التغيرات قليلة في المجاميع المعاملة بالمستخلصات الكحولية للنباتين ,لذا تبين من هذه الدراسة امكانية استخدام الخلط الكحولي والمستخلصات الكحولية بطريقة امنة عن طريق قدرتها على تحفيز الجهاز المناعي وتضعيف الرؤيسات ومنع تطورها الى اكياس عدرية ثانوية داخل الجسم الحي دون احداث اثار جانبية سلبية قياسا ببقية العقاقير الكيميائية مما يؤهلها للتقليل من المضاعفات الحاصلة في العمليات الجراحية . وباجراء التحليل الاولي للكشف عن المجاميع الفعالة في المستخلصات المائية والكحولية لقشور الرمان وثمار الشفلح تبين احتواء المستخلص المائي والكحولي لقشور الرمان على : القلويدات Alkaloids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، والفلافونيدات Flavonoids ،و فينولات Phenols ، وتانينات Tannins ، وتربينات Terpenoids ،و سترويدات Steroids بينما احتوى المستخلص الكحولي فضلاعن هذه المواد الراتنجات Resins ايضا. اما المستخلص المائي والكحولي لثمار الشفلح يبين احتوائه على : القلويدات Alkaloids ، والفلافونيدات Flavonoids ، والكلايكوسيدات Glycosides ، بينما احتوى | This study aims to test the efficiency of each of the aquatic and alcoholic extracts for the Pericarp of Punica granatum L. and Fruit of Capparis spinosa L. in concentrations of ( 50 , 100 , 200 , 300 ) mg/ml. Also a mixture of aquatic extract of Punica granatum Pericarp in concentration of (50,100) mg/ml, and (100, 200) mg/ml concentrate of the aquatic extract of Capparis spinosa Fruit . And a similar mixture was prepared for the alcoholic extracts in similar concentrations. A test was performed for the efficiency of each of the prepared extracts, in attenuation of protoscolices Echinococcus granulosus. Batch,1786 which were isolated from hydatid cysts of liver in sheep In vitro to determine the optimum concentration to kill the protoscolices, where the test is then to be performed by injecting the protoscolices intraperitonealy in white mice In vivo. Actually the vitality of protoscolices had dropped drastically with the application of aquatic extracts of Punica granatum Pericarp at the concentrations of (200 , 300) mg/ml, and aquatic extracts of Capparis spinosa Fruit at the concentration of (200 , 300) mg/ml, and the mixture of both the aquatic extracts at the concentration (100+200) mg/ml, where complete death was achieved at times, 90 , 45 , 90 , 60 , 60 minutes respectively. Alcoholic extracts of Punica granatum Pericarp and Capparis spinosa Fruit , and their mixture showed complete killing of Protoscolices at the time 30 , 30 , 60 minute in concentrations of {300 & (100+200)} mg/ml.Before performing the test In vivo, we determined the average lethal doses which were 9.41 , 10.7 , 8.1 , 10 , 8.8 , 11.3 g/ kg for the aquatic extract of Punica granatum, Capparis spinosa, their Alcoholic extracts, the aquatic mixture, and the alcoholic mixture respectively. Thus, the extracts in such concentrations could be considered as safe and low poisoning . The study included testing and application of the best concentration for treatment of the white mice that were injected with protoscolices, a negative group were injected with normal saline to determine the effect of extracts In vivo. The study measured, also the changes in average numbers, weights, dimensions, and percentage of reduction of hydatid cysts In vivo. Where it showed a decrease in the average number, weight, factors of its distension of the secondary hydatid cysts which developed in mice treated with the aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa, and increase of percentage of reduction compared with the positive control group, where a 100% reduction of hydatid cysts was achieved in the treated groups.Changes in liver and spleen weights, and average of hypertrophy showed some variations. Where average of weights and hypertrophy of liver of mice treated with aquatic extracts of Punica granatum , Capparis spinosa were similar to those of the positive group. A significant drop in these averages was observed in other groups. Best results were observed in groups treated with the alcoholic mixture, as well as in those treated with the alcoholic extract of Punica granatum, where the changes were close to those of the negative group. The study included observation of the effect of treatment with the above mentioned extracts and with Albendazole, on tissue changes of liver and spleen. Where liver showed significant changes, most important of which were the changes of the liver cell and increase in the number of the kupffer cell as a defensive mechanism, which were much less than their rate in the positive control group. On the other hand, spleen showed dilation of the white pulp and the appearance of cells composing of the Hemic platelet (megakaryocytic cells) in processed mice compared with unprocessed negative control group. These tissue changes were less persistent in groups processed with the alcoholic mixture of Punica granatum and Capparis spinosa and groups processed with the mixture of alcoholic extracts. By performing physiochemical analyses for the extracts to specify their effective compounds, we came to conclude that the aquatic and alcoholic extracts of Pericarp Punica granatum contain Alkaloids ,Flavonoids ,Glycosides, Phenols, Terpenoids, Tannins, and Steroids. whereas the alcoholic extracts in addition to these compounds, contain resins. whereas the aquatic extract of carp Capparis spinosa contain Alkaloids, Flavonoids, Glycosides, Terpenoids. Alcoholic extract of fruit Capparis spinosa contains in addition to these compounds ,tannin
