Show: 25 50 75 100 Results

Search results: 5 out of 5

التقدير الطيفي للميترونيدازول == Spectrophotometric Determination of Metronidazole

Author name: ولادة حميد ابراهيم منصور
Supervisor name: وعد الله عبد العزيز بشير المختار
General topic: Chemistry
Specific topic: Analytical Biochemistry
Degree: Master
Language: Arabic
University location: Mosul

عزل ودراسة انزيمي كلوتاميت ديهيدروجينيز وكلوتامين سنثيتيز من مرضى سرطان خلايا الكلى وعلاقتهما بمسـتوى بعـض المتغيرات الكـيموحـيوية في الدم == Isolation and Studying of Glutamate Dehydrogenase and Glutamine Synthetase from Renal Cell Carcinoma Patients and It’s Relationships with Some Biochemical Parameters in Blood

Author name: محمود احمد محمد فخري
Supervisor name: طارق يونس احمد مصطفى
General topic: Chemistry
Specific topic: Analytical Biochemistry
Degree: Doctorate
Language: Arabic
University location: Mosul
First pages:
Abstract: يتضمن البحث دراسة انزيمي كلوتامين سنثيتيز وكلوتاميت ديهيدروجينيز وبعض المتغيرات الكيموحيوية لاشخاص مصابين بسرطان خلايا الكلى ومقارنتها مع اشخاص اصحاء (سليمين ظاهريا) حيث تم جمع (19) عينة نسيج كلى مصاب بسرطان خلايا الكلى مع اخذ عينة دم قبل اجراء العملية الجراحية لاستئصال الورم وبعدها .واظهرت الدراسة وجود زيادة معنوية في فعاليتي كلوتامين سنثيتيز وكلوتاميت ديهيدروجينيز في مصل دم مرضى سرطان خلايا الكلى عند مقارنتها مع الاشخاص الطبيعيين، كما ظهرت زيادة معنوية في البروتين الكلي الكلوبيولين ، اليوريا ، الكرياتينين ، النحاس، كلوتاميت اوكزالواستيت امينو ترانسفريز ، كلوتاميت بايروفيت امينو ترانسفريز ، لاكتيت ديهيدروجينيز والفوسفاتيز القاعدي ولوحظ وجود انخفاض معنوي في تركيز الالبومين، فيتامين C والخارصين في مصل دم الاشخاص المصابين بسرطان خلايا الكلى .واظهرت النتائج ايضاﹰ وجود زيادة معنوية بين فعالية كل من كلوتامين سنثيتيز وكلوتاميت ديهيدروجينيز وتركيز البروتين في انسجة الكلى المصابة عند مقارنتها مع الانسجة السليمة ، ولوحظ وجود علاقة ارتباط معنوية موجبة بين فعالية كلوتامين سنثيتيز في نسيج الكلى ومصل الدم للاشخاص المصابين بسرطان خلايا الكلى، ولم يلاحظ وجود علاقة ارتباط معنوية لفعالية كلوتاميت ديهيدروجينيز في نسيج الكلى ومصل الدم للاشخاص المصابين وكذلك الحال مع تركيز البروتين. كما تبين وجود علاقة ارتباط معنوية بين فعالية كلوتامين سنثيتيز وكلوتاميت ديهيدروجينيز مع فعالية اللاكتيت ديهيدروجينيز في مصل دم الاشخاص المصابين بسرطان خلايا الكلى. ويلاحظ زيادة نسبة الاصابة بسرطان خلايا الكلى مع تقدم العمر ، التدخين ، السمنة ، كما تزداد نسبة الاصابة في الذكور وكذلك في الاشخاص المتزوجين ، كما لوحظ انخفاض معنوي في فعالية الانزيمات ومستوى المتغيرات في مصل الدم بعد اجراء العملية الجراحية عدا الالبومين وفيتامين C والخارصين، حيث تزداد بعد العملية .كما تم عزل كلوتامين سنثيتيز وكلوتاميت ديهيدروجينيز من نسيج كلى سليم واخر مصاب بسرطان خلايا الكلى باستخدام التقنيات الحياتية المختلفة الترسيب بكبريتات الامونيوم، الفرز الغشائي والترشيح الهلامي باستخدام هلام Sephadex G - 200 , Sephadex G - 75 .ومن خلال استخدام تقنية الهجرة الكهربائية الحاوية على Sodium dodecyl sulfate تبين ان الوزن الجزئي التقريبي للوحدة الفرعية للكلوتامين سنثيتيز المعزول من نسيج الكلى السليم والمصاب متشابه وبحدود (42,600 Da) وكذلك الوزن الجزيئي التقريبي للوحدة الفرعية للكلوتاميت ديهيدروجينيز المعزول من نسيج الكلى السليم والمصاب متشابه وبحدود (53,900 Da) .ومن خلال دراسة الظروف المثلى لقياس فعالية كلوتامين سنثيتيز المنقى جزئيا من نسيج الكلى السليم ، تبين ان الانزيم يعمل في ظروف مثلى باستخدام المحلول المنظم Imidazole - HCl بتركيز (mM 100) وبدالة حامضية ( 7.2) ودرجة حرارة (45 C°) و15 mM)) من الكلوتاميت كمادة اساس، وبلغت قيمة ثابت ميكيلس والسرعة القصوى للانزيم باستخدام رسم لاينويفر - برك (mM 11.97) و(0.0818 U/ml) على التوالي ، ودرس تاثير تركيز كلوريد الامونيوم وادينوسين - 5 - ثلاثي الفوسفات على فعالية كلوتامين سنثيتيز وكان التركيز الامثل لكل منها (1 mM) و(4 mM) على التوالي , وبلغت قيمة السرعة القصوى لهما (0.065 U/ml) و(0.0609 U/ml) على التوالي بينما بلغت قيمة ثابت ميكيلس لهما (0.419 mM) و(1.64 mM) على التوالي باستخدام رسم لاينويفر - برك .كما اشارت الدراسة من خلال دراسة الظروف المثلى لقياس فعالية كلوتاميت ديهيدروجينيز المنقى جزئيا من نسيج الكلى السليم ، ان الانزيم يعمل في ظروف مثلى باستخدام المحلول النظم Tris - HCl بتركيز (100 mM)وبدالة حامضية (8.8) ودرجة حرارة (°40 C) و(50 mM) الكلوتاميت كمادة اساس ، وبلغت قيمة ثابت ميكيلس والسرعة القصوى للانزيم باستخدام رسم لاينويفر - برك (29.5 mM) و(0.6916 U/ml) على التوالي ، ودرس تاثير تركيز نيكوتين امايد ادينين ثنائي النيوكليوتيد على فعالية كلوتاميت ديهيدروجينيز وكان التركيز الامثل له (4 mM) ، وبلغت قيمة ثابت ميكيلس والسرعة القصوى لنيكوتين امايد ادينين ثنائي النيوكليوتيد (0.91 mM) و(0.424 U/ml) على التوالي | The research included studying glutamine synthetase, glutamate dehydrogenase and some biochemical parameters of (19) of renal cell carcinoma patients in comparison with control .The results showed a significant increase of glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase activity in serum of patients, a significant increase in total protein, globulin, urea, creatinine, copper, glutamate pyruvate aminotransferase, glutamate oxaloacetate aminotransferase, lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase, and a significant decrease in albumin, zinc and vitamin C .The study also showed a significant increase in glutamine synthetase, glutamate dehydrogenase and protein in tumor compared to normal kidney’ s tissue .Correlation study was performed between the measured biochemical parameters and glutamine synthetase, glutamate dehydrogenase. The results predicted that there were positive correlation between glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase with lactate dehydrogenase in serum. Also positive correlation between glutamine synthetase in serum with tissue, and no correlation between glutamate dehydrogenase, protein concentration in serum with tissue .The study also predicted that there was risk factors affecting on renal cell carcinoma disease such as age, sex, smoking, obesity, nutrition and martial status .The results also indicated that there were a significant decrease in enzymes activity and the levels of some biochemical parameters in serum after surgery except albumin, zinc and vitamin C .The research also concerned with isolation of glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase from tumor and normal kidney tissues using different biological techniques. These included : ammonium sulfate precipitation, dialysis, gel filtration chromatography on sephadex G - 75 and sephadex G - 200 .Further more, the comparative molecular weight of the subunit of glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase were determined by sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide electrophoresis techniques for tumor & normal kidney tissue and found to be (42,600 Da) and (53,900 Da) respectively .The results also showed that the optimum conditions of glutamine synthetase were obtained using imidazole - HCl (100 mM) as a buffer at pH (7.2), (45 C°) and (15 mM) of glutamate as a substrate. Using Linweaver - Burk plot, it was found that Vmax and Km have the values of (0.0818 U/ml), (11.97 mM) respectively. The effect of ammonium chloride and Adenosine - 5́ - triphosphate concentration on the enzyme activity were also preformed. The optimum concentration of ammonium chloride is (1 mM) with Vmax (0.065 U/ml)and Km (0.419 mM). On the other hand, the optimum concentration of Adenosine - 5́ - triphosphate is (4 mM) with Vmax (0.0609 U/ml) and Km (1.64 mM) .Finally, The optimum conditions of glutamate dehydrogenase were obtained using Tris - HCl (100 mM) as a buffer at pH (8.8) , (40 C°) and (50 mM) of glutamate as a substrate. Using Linweaver - Burk plot, it was found that Vmax and Km have the values of (0.6916 U/ml), (29.5 mM) respectively. The effect of nicotinamide adenine dinucleotide concentration on the enzyme activity was also preformed. The optimum concentration of nicotinamide adenine dinucleotide is (4 mM) with Vmax (0.424 U/ml) and Km (0.91 mM) .

تقدير نسبة المكونات الدهنية وتركيب احماضها الدهنية في مصل الدم لمرضى داء السكر == Lipid Components and Fatty - Acid Composition of Human Serum in Diabetic Patients

Author name: محمد عبد الهادي جاسم العبيدي
Supervisor name: يسار يحيى حسين التمر
General topic: Chemistry
Specific topic: Analytical Biochemistry
Degree: Doctorate
Language: Arabic
University location: Mosul
First pages:
Abstract: صممت هذه الدراسة للتعرف على تاثير نوع داء السكر على مستوى المتغيرات الكيموحياتية والنسبة المئوية للاحماض الدهنية في مصل الدم, وكذلك التعرف على تاثير عوامل العمر والجنس على مستوى هذه المتغيرات.تضمنت هذه الدراسة (100) عينة من المرضى الذين يعانون من الاصابة بداء السكر من النوعين الاول والثاني (50 ذكور و50 اناث ) تتراوح اعمارهم مابين (15 - 70) سنة, و(100) عينة لاشخاص اصحاء غير مصابين بداء السكر او اي مرض اخر (50 ذكور و50 اناث) تم اعتبارهم كمجموعة سيطرة من نفس الفئات العمرية اعلاه.تم جمع نماذج الدم لمرضى داء السكر في مركز الوفاء لبحوث داء السكر في مدينة الموصل.حيث تم جمع جميع عينات الدم في هذه الدراسة من اشخاص بعد فترة انقطاع عن الطعام لمدة لاتقل عن (12) ساعة ومن ثم تم فصل مصل الدم ,حيث قسم المصل الى جزئين.تم قياس المتغيرات الكيموحياتية الاتية في الجزء الاول من مصل الدم (الكلوكوز, الكوليستيرول الكلي, كوليستيرول البروتين الدهني واطي الكثافة, كوليستيرول البروتين الدهني عالي الكثافة, كوليستيرول البروتين الدهني واطي الكثافة جدا,الكليسيرايد الثلاثي وباستخدام عدد التحليل الجاهزة (Kits) وتم تقدير الدهون الفوسفاتية بالطريقة اللونية.بينت نتائج هذه الدراسة وجود ارتفاع معنوي في مستوى المتغيرات الكيموحياتية, وذلك لمرضى كلا النوعين من داء السكر مقارنة مع مجاميع السيطرة, ووجود انخفاض معنوي في مستوى كوليستيرول البروتين الدهني عالي الكثافة لكلا النوعين من داء السكر مقارنة مع مجاميع السيطرة.ولوحظ في هذه الدراسة وجود تاثير لعامل العمر على مستوى المتغيرات الكيموحياتية حيث بينت النتائج وجود ارتفاع في مستوى هذه المتغيرات لمرضى داء السكر من النوع الثاني مقارنة مع مرضى داء السكر من النوع الاول وكذلك ارتفاع مستوى هذه المتغيرات في الفئات العمرية الكبيرة (>40) سنة مقارنة مع مستواها في الفئات العمرية الصغيرة او المتوسطة (<40) سنة.واشارت نتائج هذه الدراسة الى وجود تاثير لعامل الجنس على مستوى المتغيرات الكيموحياتية. حيث بينت النتائج وجود انخفاض في مستوى هذه المتغيرات لمرضى داء السكر(النوع الاول) في الاناث مقارنة مع الذكور .ووجود ارتفاع في مستوى هذه المتغيرات لمرضى داء السكر(النوع الثاني) في الاناث مقارنة مع الذكور.وتم في هذه الدراسة تحليل وقياس النسبة المئوية للاحماض الدهنية في المكونات الدهنية لمصل الدم. حيث تم استخلاص الدهون من مكونات الجزء الثاني من مصل الدم باستخدام المذيبات العضوية, ومن ثم فصلت المكونات الدهنية المختلفة (استر كوليستيرول، الكلسيريدات الثلاثية والدهون الفوسفاتية) للدم باستخدام تقنية كروموتوكرافيا الطبقة الرقيقة (TLC). ومن ثم تمت اعادة استرة الاحماض الدهنية في هذه الاجزاء الثلاثة من دهون مصل الدم باستخدام (BF3/Methanol) (16%) في محيط مشبع بالنتروجين.تم بعد ذلك قياس النسبة المئوية للاحماض الدهنية في الاجزاء الثلاثة باستخدام جهاز كروموتوكرافيا الغاز الشعري(Capillary Gas Chromatography) (CGC).اشارت نتائج هذه الدراسة الى وجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية المشبعة (SFA)(المجموع الكلي), ووجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة الاحادية (MUFA), ووجود انخفاض معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة المتعددة (PUFA) (المجموع الكلي) في جزء استر الكوليستيرول لمصل الدم لكلا النوعين من مرضى داء السكر مقارنة مع مجاميع السيطرة. واشارت نتائج هذه الدراسة الى وجود انخفاض معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية المشبعة (SFA) (المجموع الكلي), ووجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة الاحادية (MUFA), ووجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة المتعددة (PUFA) (المجموع الكلي) في جزء الدهون الفوسفاتية لمصل الدم لكلا النوعين من مرضى داء السكر مقارنة مع مجاميع السيطرة. وبينت نتائج هذه الدراسة وجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية المشبعة (SFA) (المجموع الكلي), ووجود انخفاض معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة الاحادية (MUFA), ووجود ارتفاع معنوي في النسبة المئوية للاحماض الدهنية غير المشبعة المتعددة (PUFA) (المجموع الكلي) في جزء الكليسيرايد الثلاثي لمصل الدم لكلا النوعين من مرضى داء السكر مقارنة مع مجاميع السيطرة. ويستنتج من هذه الدراسة ان لدى مرضى داء السكر من النوع الثاني (NIDDM) عوامل خطورة اكبر لتطور داء السكر وظهور الامراض الاخرى المصاحبة له مثل امراض القلب التاجية وامراض شبكية العين والامراض الكلوية مقارنة مع مرضى داء السكر من النوع الاول (IDDM).ان زيادة فترة المرض تودي الى زيادة الخلل في ايض الدهون وتراكمها مما يؤدي الى خلل كبير في مستوى المتغيرات الكيموحياتية التي تمت دراستها لمرضى النوع الثاني مقارنة مع النوع الاول.وتم استنتاج وجود تاثير كبير لعوامل السمنة,العمر والجنس على مستوى المتغيرات الكيموحياتية حيث توثر بشكل كبير على عمليات الايض المختلفة, مما يؤدي الى اختلاف مستوى هذه المتغيرات ونسبة الاحماض الدهنية مما يوثر سلبا على تطور عوامل الخطورة وظهور الامراض الاخرى المصاحبة لداء السكر. | he study was designed to estimate the effect of the type of diabetes mellitus on the level of some biochemical parameters, percentage and level of the fatty acids in serum lipids and the effect of age and gender on these parameters. The study include (100) diabetic patients of both types (50 males, 50 females),the age ranged between (15 - 70) year, and (100) apparently healthy subjects (50 males, 50 females)as a control group of matched age group.Samples of this study were collected in Al - Waffa center for diabetic research and management in Mosul city.Blood samples were collected from asubjects on starvation for 12hr, blood serum was separated and divided into 2 parts.The measured biochemical parameters include glucose, total cholesterol, high - density lipoprotein cholesterol, low - density lipoprotein cholesterol, very low - density lipoprotein cholesterol, triglyceride and phospholipids, using Kits obtained from regional and international suppliers.The result showed that there was a significant increase in the level of biochemical parameters in both types of diabetic patients in comparison with control groups and a significant decrease in the level of HDL - C in both types of diabetic patient in comparison with the control group, and there effects were found to be age - related.The results also showed that there was increase in the level of these parameters in type (2) diabetic patients in comparison with type (1) diabetic patients.Also there was an increase in the level of these parameters in older patients (>40) year in comparison with younger and middle age group (<40) year.Moreover the results of this study showed that there was an effect of gender on the level of biochemical parameters.It was found that there was a decrease in the level of these parameters in type (1) diabetic patients in the females in comparison with males, and there was an increase in the level of these parameters of type (2) diabetic patients in females in comparison with males.Furthermore, this study include analysis and measurement of percentage and level of fatty acids in serum lipids were done, lipids extraction from serum was performed using organic solvents and then separation of serum lipids was followed by thin layer chromatography (TLC).The separation of three main lipids parts (CE ,TG,PL) was achieved by this technique, this was followed by transmethylation of fatty acids in these three parts of serum lipids using (16%) (BF3/Methanol) under Nitrogen.Then, the measurement of percentage of fatty acids in the three parts was performed by Capillary Gas Chromatography (CGC).The results showed that there was a significant increase in the percentage and level of saturated fatty acids (SFA), a significant increase in monounsaturated fatty acids (MUFA) and a significant decrease in polyunsaturated fatty acids (PUFA), in the cholesterol ester (CE) part of serum lipids in both types of diabetic patients in comparison with the control groups.Also, the results of this study showed that there was a significant decrease in (SFA), a significant increase in (MUFA) and a significant increase in (PUFA) in phospholipids (PL) part in the serum in both types of diabetic patients in comparison with the control groups. The results showed that there was a significant increase in (SFA), a significant decrease in (MUFA) and a significant increase in (PUFA) in triglyceride (TG) part in serum of both types of diabetic patients in comparison with control groups.Finally, it was found that type (2) diabetic patients (NIDDM) had higher risk factor for deterioration of diabetes mellitus and development of other diseases a companying diabetes mellitus, such as Coronary Heart Disease (CHD), Retinopathy and Nephropathy in comparison with type (1) diabetic patients.Also we found that females had more risk for development (CHD) and atherosclerosis than males in type (2) diabetes mellitus.The long duration of diabetes mellitus lead to increase disorder in metabolism of carbohydrate, protein and lipids, which lead to disturbances in the level of biochemical parameters in type (2) diabetic patients in comparison with type (1) diabetic patients.Also we found that there was effect of obesity, age and gender on the level of biochemical parameters, which had effect on different metabolic process, that affect on the level of biochemical parameters.

دراسة كيموحياتية لانزيم الكايتينيز وعلاقته بمرض الثلاسيميا == Biochemical Study of Chitinase and its Relation with Thalassemia

Author name: براء رعد محمود البرهاوي
Supervisor name: ذكرى علي علوش
General topic: Chemistry
Specific topic: Analytical Biochemistry
Degree: Master
Language: Arabic
University location: Mosul
First pages:
Abstract: تضمن البحث دراسة كيموحيوية لانزيم الكايتينيز وعلاقته بمرض الثلاسيميا ، اذ ظهر من خلال جمع (87) نموذج مصل دم لاشخاص مصابين بالمرض تتراوح اعمارهم بين (2 - 45 year) من كلا الجنسين وجود انخفاض معنوي في فعالية انزيم الكايتينيز عند مقارنته مع (66) نموذج مصل دم لاشخاص اصحاء تتراوح اعمارهم بين (1 - 55 year) من كلا الجنسين . ووجد ان المعدل الطبيعي لفعالية انزيم الكايتينيز في مصل دم مجموعة السيطرة (1.79±0.10 U/ml ) وفي مصل دم مجموعة المرضى (±0.11 U/ml 1.29), كما وجد ان فعالية الانزيم لاتتاثر بالجنس بينما تزداد مع تقدم العمر لدى مجموعتي السيطرة والمرضى ,وبينت النتائج عدم تاثر فعالية الانزيم بنوع المرض (الفا او بيتا - ثلاسيميا) وشدة مرض البيتا - ثلاسيميا (البيتا - ثلاسيميا الكبيرة والبيتا - ثلاسيميا المتوسطة) واستئصال الطحال . اظهرت النتائج وجود انخفاض معنوي في مستوى الهيموكلوبين ، بينما لوحظ وجود ارتفاع معنوي في مستوى كل من انزيم الكلوتاميت بايروفيت ترانس امينيز (GPT) وانزيم الكلوتاميت اوكزالواسيتيت ترانس امينيز (GOT) والحديد (Fe) والسعة الكلية لارتباط الحديد (TIBC) لدى مرضى الثلاسيميا مقارنة بمجموعة السيطرة . ودرست العلاقة بين فعالية انزيم الكايتينيز وعدد من المتغيرات السريرية لدى مجموعتي السيطرة والمرضى وذلك بايجاد معامل الارتباط الخطي ، وتبين ارتباط انزيم الكايتينيز بعلاقة عكسية معنوية مع الحديد وبعلاقة طردية معنوية مع انزيم (GPT) لدى مجموعة السيطرة وكذلك تبين ارتباط انزيم الكايتينيز بعلاقة طردية معنوية مع الهيموكلوبين لدى مجموعة المرضى . واظهرت طريقة عزل انزيم الكايتينيز من الجسيمات الحالة لبلازما الدم(الحزمة B) عدد مرات تنقية عالية مقارنة بطريقة عزل الانزيم من محلول راسب كبريتات الامونيوم بتشبع (75%) (الحزمة E) لبلازما الدم بتقنية الترشيح الهلامي باستخدام عمود الفصل الحاوي على (Sephadex G - 75) . كما وجد ان الحزمتين البروتينيتين ( BوE) لهما وزن جزيئي (1000 ± 39810 دالتون) و(1000 ± 36307 دالتون) على التوالي . درست الظروف المثلى لعمل انزيم الكايتينيز للحزمتين المعزولتين فوجد ان لهمزامن تفاعل امثل عند الدقيقة (35) و(30) والاس الهيدروجيني الامثل عند (pH= 7) ودرجة حرارة مثلى (60C) و(55C) والتركيز الامثل لمادة الاساس الكايتين الغروي (12 mg/ml) و(10mg/ml) وقيمة السرعة القصوى (2.08U/ml)Vmax و(2.00U/ml) وقيمة ثابت ميكيلس - منتن Km (2.12mg/ml) و(2.00mg/ml) على التوالي . وتم تقدير الفعالية البايولوجية لانزيم الكايتينيز المعزول من بلازما الدم (الحزمتين Bو E) تجاه نمو بعض البكتريا والفطريات الممرضة ووجد ان للانزيم القابلية على تثبيط نموها بنسبة (100%) للحزمة B)) و(50 %) للحزمة (E). | The present research is a biochemical study of chitinase and its relation with thalassemia . It had been found that a (87) of serum samples for thalassemia patients at ages between (2 - 45 years) of both sex had shown a significant decrease of chitinase activity when compared with (66) serum samples of controls at ages between (1 - 55 years) of both sex. It had been found that the normal range of chitinase activity in serum of healthy control (1.79 ± 0.10 U/ml) and in serum of patient (1.29±0.11 U/ml),it was also found that the activity was not affected by sex whereas an increase was found with aging in both patients and control. The result demonstrated that the chitinase activity was not affected by the type of thalassemia ( or β - thalassemia), distress of β - thalassemia (β - thalassemia major and β - thalassemia intermediate) and splenctomy. The results also showed a significant decrease in hemoglobin level while show a significant increase in (GPT), (GOT), (Fe) and (TIBC) of thalassemia patients compared with control. Correlation coefficient between chitinase activity and clinical variables of thalassemia patients studied showed a significal reversible relation between chitinase and (Fe) and irreversible relation between chitinase and(GPT) in control. It also show a reversible relation between chitinase and hemoglobin in patients. The isolation method of chitinase from lysosome of plasma (protein peak B) showed a high number of purification compared with the method for the isolation of chitinase from ammonium sulphate solution (75%) saturation of plasma (protein peak E) by gel filtration technique, using column containing sephadex G - 75, it was found that the two peaks (B and E) had apparent molecular weight (39180 ± 1000 dalton) and (36307 ± 1000 dalton) respectively. The study of the optimum condition of chitinase activity in the two peaks show an optimum reaction time at (35), (30) minute , optimum pH at (7) , optimum temperature at (60C), (55C) , optimum concentration of substrate colloidal chitin (12 mg/ml), (10 mg/ml) , Vmax (2.08 U/ml) , (2.00 Uml) and Km (2.12 mg/ml) and (2.00 mg/ml) respectively. Finally the biological activity had been improved for the isolated chitinase from plasma (for B and E peak) upon the growths of some bacteria and fungi pathogen , it had been found that the enzyme had the ability to inhibit its growth at ratio (100%) for peak (B) and (50%) for peak (E)

عزل ودراسة انزيم الديوكسي رايبونيوكليز الحامضي من دم المرضى المصابين باحتشاء العضلة القلبية الحاد == Isolation and Study of Acid Deoxyribonuclease from Blood of Acute Myocardial Infarction Patients

Author name: رغد عبد الموجود محمد حمو
Supervisor name: ليلى عبد الله مصطفى عبد الله
General topic: Chemistry
Specific topic: Analytical Biochemistry
Degree: Master
Language: Arabic
University location: Mosul
First pages:
Abstract: تضمن البحث الحالي دراسة كيموحيوية لانزيم الديوكسي رايبونيوكليز الحامضي DNaseII الذي تم عزله من مصل دم الاشخاص المصابين باحتشاء العضلة القلبية الحاد لغرض التحقق من استخدام الانزيم كمؤشر للاصابة بالاحتشاء القلبي الحاد، اذ تم جمع (135) عينة دم من الاشخاص المصابين الراقدين في مستشفى ابن سينا التعليمي / وحدة العناية المركزة تراوحت اعمارهم بين (90 - 31) سنة وكان عدد الذكور والاناث المشمولين في الدراسة (97) و(38) على التوالي، كما جمعت (90) عينة لاشخاص اصحاء تراوحت اعمارهم بين (70 - 15) سنة لغرض المقارنة ولايجاد القيمة المرجعية لانزيم DNaseII.واظهرت النتائج وجود زيادة معنوية في فعالية انزيم DNaseII في مصل دم الاشخاص المصابين اذ بلغ معدل الفعالية (268.0+6.90) وحدة/لتر مقارنة مع معدل الفعالية للاشخاص الاصحاء (25.70+1.60) وحدة/لتر، لذا يعد انزيم DNaseII كمؤشر للاصابة باحتشاء عضلة القلب الحاد.تم عزل انزيم DNaseII من مصل دم الاشخاص المصابين بالاحتشاء القلبي الحاد باستخدام التقنيات الحياتية المختلفة حيث تم فصل حزمتين بروتينيتين رئيستين من البروتينات بتقنية الترشيح الهلامي للراسب البروتيني الناتج من عملية الترسيب بكبريتات الامونيوم، واظهرت واحدة منها فقط فعالية لانزيم DNaseII، وقدر وزنه الجزيئي باستخدام تقنية الترشيح الهلامي وكان بحدود (67000) دالتون.وتضمن ايضا ايجاد الظروف المثالية لفعالية انزيم DNaseII وكانت الفعالية القصوى كالاتي باستخدام (32) مايكروغرام/لتر من الحامض النووي الديوكسي رايبوزي DNA كمادة اساس للانزيم، و(0.1) مولار من المحلول المنظم للخلات عند الاس الهيدروجيني (pH=4.5) وبدرجة حرارة (40) درجة مئوية وبزمن تفاعل (150) ثانية.تم ايجاد قيمة السرعة القصوى وثابت مكيلس - منتن باستخدام رسم لاين ويفر - برك وكانت مساوية لـ (125) وحدة/لتر و(1.8) مايكروغرام/مليلتر على التوالي.واخيرا تمت دراسة تاثير بعض المركبات الكيميائية والنيوكليوتيدات والادوية على فعالية انزيم الـ DNaseII، ووجد ان الايزورديل يعمل كمثبط تنافسي لفعالية الانزيم عند تركيز (0.01) مولار | The current research is a biochemical study of acid deoxyribonuclease DNaseII which was isolated from the serum of patients suffering Acute myocardial infarction (AMI) in order to use the the enzyme as a marker for identification of AMI. blood samples from (135) AMI patients who entered in the CCU of Ibn - Sina teaching Hospital, their ages ranged between (31 - 90) years, (97) males and (38) females, the blood of (90) samples were collected from healthy individuals their ages ranged between (15 - 70) year as control. The results showed a significant increase in the activity of DNaseII enzyme in the serum of the AMI patients with an activity mean (268.0+ 6.90) U/L compared to the activity of healthy people (25.7+ 1.60) U/L. The DNaseII has been isolated from the blood of AMI patients using different biochemical techniques, two proteins components had been isolated by gel filtration technique from precipitate produced by ammonium sulfate. It was found that only the first peak has DNaseII enzyme activity. The apparent molecular weight of DNaseII using gel filtration was found to be (67000) Dalton. The research was concerned with finding of optimum conditions for DNaseII activity. Maximum activity was obtained using (32) g/ ml of deoxyribonucleic acid as a substrate for the enzyme, acetate buffer at pH (4.50) and temperature of (40) degree C0 at a reaction time of (150) sec. using Line Weaver - Burk blot, it was found that Maximum Velocity Vmax and Michaelis Menten constant Km have the values of (120.5) U/ L and (1.8) g / ml respectively. Finally, the effect of some chemical compounds and nucleotides and drugs on the DNaseII activate was also studied. It was found that Isordil Showed a competitive inhibition on the activity of the enzyme at a concentration of (0.01) M.