Author name:
احمد محمد علي شاكر مالك
Supervisor name:
مؤيد عمران موسى الغزالي | ملال محمد الجبوري
Abstract:
العقم هو المشكلة الطبية الوحيدة التي تؤثر على كلا الزوجين مع اثار نفسية واقتصادية مضاعفات سريرية. هرمون الاستروجين كهرمون مهم لحدوث الحمل يعمل من خلال نوعين من المستقبلات. مستقبل الاستروجين الفا, الذي يشفر بواسطة الجين المسمى جين مستقبل الاستروجين الفاو الذي موجود بكمية اكبر من مستقبلات هرمون الاستروجين الاخرى، , والنوع الثاني هو مستقبل الاستروجين بيتا, الذي يشفر عن بواسطه الجين المسمى جين مستقبل الاستروجين بيتا والموجود في جميع نظم التكاثر البشرية. التغاير الجيني في هذا المستقبل له تاثير على كثير من الامراض منها متلازمة تكيس المبايض، وخطر الاصابة بسرطان الثدي، والعقم المرتبط ببطانة الرحم وفشل الحقن المجهري.الغرض من هذه الدراسة هو لمعرفه هل يوجد تاثير للتغاير الجيني الموجود على جين مستقبل الاستروجين الفا, هورمون المضاد للموليريان ومستوى هورمون الاسترادايول على عملية الحقن المجهري الاجباري خارج الجسم. وقد شملت الدراسة (44) امراة عقيمة كمجموعة مرضى، و(44) امراه لم تعاني من مشكلة الاخصاب وو لديها الدورة منتظمه كمجموعه سيطرة. وقد استخدمت عينات الدم التي تم جمعها من مجموعة المرضى ومجموعة السيطرة لقياس مستوى هورمون المضاد للموليريان, هورمون الاستروجين ولاستخراج الحمض النووي لدراسة التغاير الجيني الموجود على جين مستقبل الاستروجين الفا باستخدام تقنية التفاعل السلسلة التكراري . تم اجراء التحليل الاحصائي باستخدام برنامج اس بي اس اس الاصدار رقم 20. واعتبار القيم الاصغر من 0.05 قيمة ذات دالة احصائيةاشارت نتائج هذه الدراسة الى ان التراكيب الوراثية لسباي في المجموعة السيطرة كانت 7 (15.9٪) و24 (54.5٪) و13 (29.6٪) AA, AG, GG على التوالي. كانت تراكيب النمط الجيني 22 (50٪)، 18 (40.9٪)، و4 (9.1٪) AA, AG, GG في المجموعة المرضى، على التوالي. كانت الترددات الاليلية Aو G في المجموعة السيطرة 43٪ و57٪ على التوالي وفي المجموعة المرضى كانت 70٪ و30٪ على التوالي. تم العثور على ارتباط بين التغاير الجيني لمستقبل الاستروجين الفا المرقم rs9340799 تعدد الاشكال والنمط الظاهري السريري في مجموعة المرضى (P = 0.00026) مقارنة مع مجموعة السيطرة.اما مستوى هورمون الاستروجين ومستوى هورمون المضاد للموليريان فلم يكن لهما تاثير على نسبة الانجاب بعملية الحقن المجهري الاجباري. | Infertility is the only complex medical problem that affects a couple with important psychologic, economic, demographic and medical implications. Estrogen as a significant hormone within pregnancy performance the actions by two types of receptor. estrogen receptor alpha, encoded by estrogen receptor 1 (ESR1) gene, is present in a larger quantity of the other estrogen receptor, estrogen receptor beta, encoded by estrogen receptor 2 (ESR2) gene. ESR1 exists in all human reproductive systems. Association of ESR1 gene polymorphism has been shown in Polycystic ovary syndrome, breast cancer risk, endometriosis - related infertility and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) failure.In this study, the hypothesis that polymorphisms in (ESR1) gene, anti mullerian hormone and estradiol level in women may be associated with ICSI outcome.The study included (44) infertile women as study group, (23) with ICSI failure as non - pregnant group and other (21) with ICSI success as pregnant group and (44) regularly menstruating women as control. Hormonal assay were done for all patients after obtaining blood samples and then centrifuged to get serum for hormonal assay that included the following : (Testosterone, FSH, LH, prolactine, TSH, AMH, Estradiol). DNA was extracted from the whole blood samples by using genomic DNA purification kit. Then, the extracted DNA was used for amplification of targeted fragments by using PCR. PCR - RFLP was applied for, the identification of these SNPs by using XbaI restriction enzymes, respectively, then, sequencing was used for checking. Whole blood samples collected from patients and control group had been used to extract DNA for ESR1 gene polymorphism study using PCR - RFLP technique. Statistical analysis was done through χ², by using SPSS software, version 20. values smaller than 0.05 were considered significant.The Results of the present study refer to frequencies of XbaI genotypes in the control group were 7 (15.9%), 24 (54.5%), and 13 (29.6%) for AA, AG, and GG, respectively. The genotype frequencies were 22 (50%), 18 (40.9%), and 4 (9.1%) for AA, AG, and GG in infertile group, respectively. Allele frequencies of A and G alleles in the control group were 43% and 57%, respectively and in the infertile group they were 70% and 30%, respectively. An association was found between the ESR1 rs9340799 polymorphism and clinical phenotype in infertile group (P = 0.00026) compared to the control group.In conclusion, ESR genotype analysis could help ICSI clinicians in the modification of the control ovarian stimulation so as to achieve synchronization in the follicular development and therefore higher mature oocyte numbers and IVF/ICSI results.
