Author name:
احمد حمزة هاشم المعموري
Supervisor name:
مسلم عبد علي عبد الحسين الربيعي
University location:
Najaf
Abstract:
نفذت التجربة في مختبر زراعة الانسجة النباتية العائد الى قسم البستنة وهندسة الحدائق - كلية الزراعة - جامعة الكوفة للمدة من نيسان 2014 الى حزيران 2015 لاختبار تحمل ثلاثة اصناف من العنب الاوربي العديمة البذور هي Crimson seedless وPrincess وSummer Royal ) للاجهاد الملحي خارج الجسم الحي بدلالة تاثير ملح NaCl في مؤشرات نمو النبيتات والتغيرات الفسيولوجية لانتخاب الصنف الاكثر تحملا للملوحة . اذ اسست المزارع النسيجية لهذه الاصناف وتبعتها مرحلة تقييم تحملها لملح NaCl خارج الجسم الحي ، وقد نفذت الاخيرة كتجربة عاملية باستخدام التصميم العشوائي الكامل (CRD)بعاملين ]الاصناف (Crimson seedless وPrincess وSummer Royal) x تراكيز NaCl ( 0 , 50 ،100 ، 150 ، 200 ) ملي مول [ . زرعت النبيتات الناتجة في وسط MSالسائل المزود ب 5 تراكيز من NaCl لمدة 21 يوما ، حسبت بعدها النسبة المئوية للنبيتات الحية ودرجة التضرر وارتفاع النبيتة ومعدل عدد الاوراق والوزن الطري والجاف للمجموع الخضري وطول الجذور والوزن الطري والجاف للمجموع الجذري باعتبارها مؤشرات نمو ومحتوى الافرع من الكلوروفيل والبرولين والسكريات الذائبة والبروتينات الذائبة وبعض الايونات منها النتروجين والفسفور والبوتاسيوم والصوديوم والكلوريد ونسبة البوتاسيوم الى الصوديوم وقياس فعالية انزيمي الكتليز وSOD. ويمكن توضيح اهم النتائج بما ياتي : 1 - ان زيادة تركيز NaCl في الوسط الغذائي سببت انخفاض معنوي في النسبة المئوية للنبيتات الحية وزيادة درجة تضرر النبيتات ، اذ سجلت اقل نسبة للنبيتات الحية واعلى درجة تضرر عند التركيز 200 ملي مول والتي بلغت 13.33% و2.44 على الترتيب مقارنة بمعاملة المقارنة ( 0 ملي مول ) التي سجلت 100% ، 0.00 على الترتيب . 2 - ان زيادة تركيز ملح NaCl في وسط النمو سبب انخفاض مؤشرات النمو الخضري والجذري للنبيتات ومنها ارتفاع النبيتة ومعدل عدد الاوراق والوزن الطري والجاف للمجموع الخضري وطول الجذور والوزن الطري والجاف للمجموع الجذري ، اذ سجلت اقل القيم عند التركيز 200 ملي مول . 3 - انخفاض محتوى المجموع الخضري للنبيتات من الكلوروفيل والبروتينات الذائبة الكلية وايونات النتروجين والفسفور والبوتاسيوم ونسبة البوتاسيوم الى الصوديوم عند زيادة تركيز ملح NaCl في الوسط الغذائي اذ سجلت اقل القيم عند التركيز 200 ملي مول بينما كانت اعلى القيم في الوسط الخالي من الملح ، في حين ارتفع محتوى الافرع من البرولين والسكريات الذائبة وايونات الصوديوم والكلوريد عند زيادة تركيز ملح كلوريد الصوديوم في وسط النمو مقارنة بالوسط الخالي من الملح الذي سجل اقل القيم . 4 - زيادة فعالية الانزيمات المضادة للاكسدة ( الكتليز وSOD ) عند زيادة تركيز ملح كلوريد الصوديوم في وسط النمو ، اذ سجلت اعلى القيم عند التركيز 150 ملي مول بلغت 2.06 مايكرومول . غم - 1 وزن طري. دقيقة - 1 و44.20 وحدة / ملغم بروتين على الترتيب ، بينما كانت القيم 1.18 مايكرومول . غم - 1 وزن طري. دقيقة - 1 ، 5.13 وحدة / ملغم بروتين على الترتيب في الوسط الخالي من الملح . 5 - اختلاف استجابة اصناف العنب للملوحة ، اذ تفوق الصنف Crimson seedless معنويا على باقي الاصناف المدروسة في معظم الصفات قيد الدراسة ( المظهرية والكيمياحياتية ) .6 - اظهرت نتائج التداخلات بين تركيز ملح كلوريد الصوديوم والاصناف وجود اختلافات معنوية في الصفات المدروسة اذ تفوقت نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 0 ملي مول والصنف Crimson seedless على بقية التداخلات في معظم الصفات المظهرية والكيمياحياتية للنبيتات الحية ، في حين تفوقت نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 0 ملي مول والصنف Princess في محتوى الافرع من الفسفور بينما تفوقت نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 0 ملي مول والصنف Summer Royal في طول الجذور والبوتاسيوم . وسجلت اعلى القيم في نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 200 ملي مول والصنف Crimson seedless من البرولين والسكريات الذائبة والصوديوم وسجلت نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 200 ملي مول والصنف Summer Royal اعلى القيم من الكلوريد في حين بلغت اعلى فعالية لانزيم الكتليز في نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 100 ملي مول والصنف Crimson seedless بينما كانت اعلى فعالية لانزيم SOD في نبيتات معاملة التداخل بين التركيز 150 ملي مول والصنف Prin | An experiment was carried out at the Plant of Tissue Culture Laboratory - Horticulture Department - Faculty of Agriculture - University of Kufa from April 2014 to June 2015 to test salt tolerance of three grape (Vitis vinifera L.) seedless cultivars ( Crimson seedless, Princess and Summer Royal) in vitro, according to effects of NaClon plantlets growth indicators and physiological changes for the selection of the most salt - tolerant cultivar . The experiment was carried out in two stages, the first was the in vitro plantlets production followed by the next stage, which included studying the responses of plantlets to NaCl for evaluating their tolerance to NaCl in vitro. The experiments were set up as a factorial experiment in Complete Randomized Design with two factors {3 cultivars (Crimson seedless , Princess and Summer Royal)× four levels of NaCl}. Plantletswere cultured in liquid MS medium provider with 5 concentrations of NaCl (0, 50, 100 .150 200) mM for 21 days in the culture room.At the end of the experiment, plantlets survival percentage, plantlets damage index, vegetative and root growth ,total chlorophyll content , shoot contents of total soluble sugars, total soluble protein, proline, N, P, K+, Na+andCl - ions, and the activity of SOD and catalase enzymes were calculated.Results can be shown as follows : Increasing the concentration of salt NaCl in growth medium caused a decline in plantlets survival percentage and an increasein the degree of plantlets damage. the lowest survival percentage and a higher degree of damage was obtained with the concentration of 200 mM, which gave 13.33% and 2.44 respectively, compared to the control (0 mM), which recorded 100%, and 0.00, respectively. Increasing the concentration of salt NaCl in growth medium caused a decline in vegetative and root growth indicators which includes plantlets height, number of leaves,plantlets fresh and dry weight, root length and root fresh and dry weight system, as it recorded the lowest values when it was grown at200 mM. Contents of chlorophyll, proteins total soluble, ions ( N, P, K+ and potassium / sodium ratio) in plantlets fresh was reduced when increasing the concentration of NaCl in growth medium as it recorded the lowest values at 200 mM concentration, while the highest values were in the salt - free medium. On the other hand,the content of proline, soluble sugars , sodium and chloride ions was obtained with increasing the concentration of sodium chloride salt in the growth medium compared to the non - salt growth medium, which gave lower values . There was an increasein antioxidant enzymes (catalase and SOD ) activities when increasing the concentration of sodium chloride salt in the growth medium, and the highest values were recorded at 150 mM NaCl 2.06 µmole. g - 1FW. min - 1 and 44.20 unit respectively, while the lowest values were 1.18 µmole. g - 1 FW . min - 1 and 5.13 unit, respectively, in the salt - free medium . There was a significant differences in the response of grape cultivars to salt stress. Results showed that Crimson seedless was more salt tolerant compared with the rest studied cultivars in the most morphological and biochemical characters. There was a significant differences between interaction treatments in which the interaction 0 mM NaCl and Crimson seedless gave higher values in most studied traits,while interaction treatment 0 mM NaCl and Princess was superior phosphorus content. The interaction treatment 0 mM NaCl and Summer Royalgave the highest values of root length and potassium, whereas, the highest values of proline, soluble sugars and sodium was recorded in the plantlets of interaction treatment 200 mM and Crimson seedless.While interaction treatment 200 mM and Summer Royal recorded higher values in chloride ion contents.On the other hand the highest catalase enzyme activity was in interaction treatment between 100 mM NaCl and Crimson seedless,while the highest SOD enzyme activity in plantlets was in interaction treatment between 150 mM NaCl and Princess cultivar