التحري الجزيئي عن جين الضراوة rmp لبكتيريا Neisseria gonorrhoeae المعزولة محليا من المرضى البالغين == Molecular Detection of Virulance rmp Gene in Neisseria gonorrhoeae Isolated from Adult patients
دراسة وراثية عن الطوافر البكتيرية المفككة للمركبات الفينولية
تاثير تعريض بذور واعضاء بادرات القرع الجبلي Cucurbita maxima والكالس الناشئ منها للاشعة فوق البنفسجية في محتوى الزيت وتشخيص مركب Cucurbitacin == Exposure Effect of Seeds and Seedlings Explants of Cucurbita maxima and Their Calli to UV in Oil Content with Diagnosis of Cucurbitacin Compound
تقدير الاسبارجين في مرضى سرطان الدم بوساطة الاسبارجينيز المقيد والمنقى من Portulaca oleracea L == Estimation of Asparagine in Serum Leukemia Patients by Immobilized L - asparaginase Purified from Portulaca oleracea L
Author name:
هادي ساجد عبد العباس عبد الله
Supervisor name:
محمد عبد الله جبر جاسم
Abstract:
جمعت عينات النباتات قيد الدراسة من منطقة الرارنجية \مدينة الحلة\العراق. وصنفت النباتات من قبل د.نداء عدنان في قسم علوم الحياة \كلية العلوم \جامعة بابل بالاعتماد على الصفات المظهرية للنباتات . تم التحري عن فعالية انزيم الاسباراجينيز والمحتوى البروتيني في المستخلص الخام لهذه النباتات , تبين ان اعلى فعالية نوعية لانزيم الاسباراجينيز في نبات البربينة Portulaca oleracea L., ثم قدرت الفعالية الانزيمية في اجزاء النبات والتي شملت (الاواق, السيقان,الجذور, نبات كامل) حيث ظهرت اعلى فعالية في النبات الكامل مقارنة بالاجزاء الاخرى ,بالاعتماد على هذه النتائج استخدم نبات البربينة Portulaca oleracea L. كمصدر لانتاج وتنقية وتوصيف والاستخدام الطبي لانزيم الاسباراجينيز.درست الظروف المثلى لفعالية انزيم الاسباراجينيز من النبات الكامل وقد اشارت النتائج الى ان اعلى فعالية للانزيم قد تحققت بحضن الانزيم الخام مع الاسبراجين بتركيز 200mM بنسبة 1 : 3 في محلول دارئ فوسفات البوتاسيوم المنظم بتركيز 0.05 مولار بدالة حامضية 8 وبدرجة حرارة 37 م مع الانخفاض التدريجي في الفعالية النوعية للانزيم الخام بعد خزنه لفترات زمنية محددة .تم تنقية انزيم الاسباراجينيز الخام المستخلص من نبات البربينة بثلاث خطوات تضمنت الاولى الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة 90% ثم التنقية بكروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستحدام السيفاديكس G - 100 وبعدها التنقية بكروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام السيفاديكس G - 150 وقد ظهرت ثلاثة اشكال للانزيم حيث بلغت الفعالية النوعية للانزيم النقي 7440 وحدة\ملغم وعدد مرات التنقية 4.08 وبحصيلة انزيمية بلغت 22.7%.تم توصيف الاسباراجينيز النقي ,اذ بلغ الوزن الجزيئي52±1 كيلو دالتون باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام السيفاديكس G - 100 بوجود البروتينات القياسية والتي هي Trypsin (23 KD), Pepsin (34.5 KD), Egg Albumin (43KD) , and Bovine serum albumin (67 KD) وكان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية وثبات الانزيم هو 8 في حين كانت درجة الحرارة المثلى لفعالية وثبات الانزيم هي 37 م وعند دراسة الثوابت الحركية للانزيم , ظهر ان معدلات قيم ثابت ميكالس (Km) والسرعة القصوى (Vmax) وعدد التحول(Kcat ) كانت 250 ملي مولار و100 ملي مولار \دقيقة و350 1\ثانية على التوالي. قيد الانزيم باستعمال الاكار,الاكاروز والجيلاتين وتم توصيف الانزيم المقيد ومقارنته مع الانزيم الحر. اظهرت نتائج الدراسة كفاءة التقييد باستعمال مادة الاكاروز والاكار والجلاتين حيث بلغت ( (70,72,78 % على التوالي وكما تبين من النتائج ان اعلى فعالية للانزيم الحر والمقيد بالاكاروز كانت عند الدالة الحامضية 8 اما الانزيم المقيد بالاكار والجيلاتين فكانت اعلى فعالية عند الدالة الحامضية 9. بالمقابل كانت درجة الحرارة 37 م هي المثلى للفعالية للانزيم المقيد بالاكار والجيلاتين والحر و40 م للانزيم المقيد بالاكاروز. واستخدم الانزيم المقيد في تقدير تركيز الاسبارجين في مصل الدم , اظهرت النتاج ارتفاع واضح في تركيز الاسباراجين لمرضى اللوكيميا (سرطان الدم) حيث بلغت〖10〗^( - 2) - 〖10〗^( - 3) مولار مقارنة مع الاشخاص الطبيعيين حيث بلغت〖10〗^( - 4) - 〖10〗^( - 7) مولار | Plants samples were collected during 2016 (August to September) from Al - Raranjia Hamlet field / Al - Hilah city / Iraq. These samples were classified by Dr. Nidaa Adnan Muhammed ,Biology Department/ Collage of Science / University of Babylon , according to their morphological characteristics. Activity of asparaginase was detected in whole plant, leaves, steems and roots extracts. Results showed that Portulaca oleracea L. was the best one from group of tested plants for research due high yield of L - asparaginase enzyme . Maximum asparaginase activity was detected in whole plant extracts which was 43.55 U/ml in comparison with 37.74,33.16 and 36.8 U/ml in extracts of leaves, steems and roots respectively. According to these results whole plant of Portulaca oleracea L. were used as a source for asparaginase production, purification , characterization, and medical application . Activity of crude asparaginase extracted from whole plant were under optimal conditions studied. Results revealed the maximum activity of asparaginase was achieved when the enzyme was incubated with asparagine 200mM at 37°C in the presence of potassium phosphate buffer 0.05 M solution/plant sample (g) (3 : 1 ratio) at pH8 , with gradually increase in activity with increase of the substrate and gradually activity decrease after particular storage period. Crude asparaginase extract was purified in three steps ( Ammonium sulfate precipitation (90%), gel filtration chromatography technique by Sephadex G - 100 and gel filtration chromatography method by Sephadex G - 150. There are three isoform of enzyme while Specific activity of the purified asparaginase was 7440 U/mg and 4.08 Purification folds, 14.5 % yield. Characterization of the purified asparaginase showed that the molecular weight of the enzyme was 52±1 Kilo Dalton by gel filtration chromatography using Sephadex G - 100 in the presence of four standard proteins which they are Trypsin (23 KD), Pepsin (34.5 KD), Egg Albumin (43KD) , and Bovine serum albumin (67 KD). pH 8 was the optimum pH for enzyme activity and stability, while 37°C was the optimum temperature for both enzyme activity and stability, with Km of 250 mM toward L - asparagine as substrate and the maximum velocity (Vmax) and Kcat of 100 mM/min, 350 sec^( - 1) respectively . The activity of immobilized enzyme was determined and compared with free enzyme ,where immobilizing Efficiency of agar , agarose and gelatin techniques was ( 72 %,78 % and 70 % ) respectively, all immobilizing technique proved that the activity of the enzyme was increased significantly compared with free enzyme, where agar and gelatin methods showed more stability of enzyme at alkaline pH (pH 9) , whereas only agarose method get the enzyme more heat stability to enzyme than other immobilizing methods. There are significant elevation level of asparagine concentration in leukemic human serum samples than normal human serum samples , where reached to 〖10〗^( - 4) - 〖10〗^( - 7) M of asparagine in normal human serum samples while it was 〖10〗^( - 2) - 〖10〗^( - 3) M of asparagine in leukemic serum blood samples.
تقييم دور الجين في دم نساء عراقيات مصابات بسرطان الثدي == Evaluation The Rule of Mammoglobin A Gene In Blood of Iraqi Women With Breast Cancer
التحري عن التشوهات الكروموسومية وطفرات المورث FLT3/ITD في مرضى ابيضاض الدم النخاعي الحاد == Screening For Chromosomal Aberrations And Gene Mutations FLT3/ITD In Patients With Acute Myeloid Leukemia
انشاء وتوصيف لخط سرطان الثدي الخلوي العراقي == Establishment And Characterization of Iraqi Breast Cancer Cell Line
دراسة جزيئية عن جين المقاومة mecA في بكتريا العنقودية الذهبية المقاومة للمشيسلين والمعزولة من بعض مستشفيات بغداد == Molecular Study For Detection of Meca Gene In Methicillin - Resistant Staphylococcus Aureus Isolated From Some Hospital In Baghdad City
التحري عن فيروس التهاب الكبد نمط B باستخدام تقنيات ELISA وReal Time PCR في دم ولعاب المرضى في محافظة الانبار == Detection of Hepatitis B Virus By Using Elisa And Real Time PCR Techniques In Patients' Blood And Saliva In Al - Anbar Governorate
عزل وتشخيص الجين lipA المنتج من بكتريا الزائفة الزنجارية من مياه الصرف الصناعي == Isolation And Identification of lipA Gene Producing Pseudomonas Aeruginosa From Industrial Wastewater
مقارنة نسب الحمل للنساء اللواتي يعانين من توقف الطمث لاسباب ثانويه بعد استعمال ادوية المنشطه للحويصلات المبيضيه باستخدام التمنيه داخل الرحم والطريقه الطبيعيه للحمل == Comparison of Pregnancy Rate Between Intrauterine Insemination And Spontaneous Pregnancy After Ovulation Induction In Women With Secondary Amenorrhea
انتاج انزيم السيليلز من عزلة محلية لبكتريا B167 Streptomyces sp. واستخدامه في انتاج الوقود الحيوي == Cellulase Production From Local Isolate of Streptomyces Sp.B167 And Its Application In Biofuel Production
التاثير التثبيطي لبعض المستخلصات على فعالية انزيم Angiotensin converting enzyme وبعض المؤشرات الحيوية المساهمة في ارتفاع ضغط الدم == Inhibitory Effect of Some Plant Extracts On Angiotensin Converting Enzyme Activity And Some Biochemical Marker That Associated With Hypertension
تحديد تعبير الجين المتحمل للملوحة TaGSK1 في عدد من اصناف الحنـطـة == Determination of Gene Expression of Salt Tolerant Gene Tagsk1 In Wheat Cultivars