Author name: ماجد حميد جعفر الدباغ

Supervisor name: عبد الامير ناصر غلوب | محمد باقر محمد رشاد فخر الدين

General topic: Biology

Specific topic: Zoology

Degree: Master

University: Mustansiriyah University - College Of Science

Language: English

University location: Baghdad

First pages:

Abstract: تهدف الدراسة الحالية الى تقييم سلامة المادة الوراثية للنطف لكل من الرجال السليمين والعقيمين وذلك من خلال استعمال الفحصين Acridine orange (AO.) وAniline blue (AB.) ، ومن ثم تقييم العلاقة بين متغيرات السائل المنوي مع كل من الفحصين السابقين اعلاه.تم فحص السائل المنوي ل (39) من الذكور السليمين ومتوسط اعمارهم (33.61± 5.23 ) سنة في حين كان عدد الذكور العقيمين الذين تم اجراء فحص السائل المنوي لهم هو(111 ) وكان متوسط اعمارهم ( 44.121 ± 6.708 ) سنة. كذلك اجري فحص (AO test ) لكل من الذكور السليمين والعقيمين من اجل معرفة سلامة المادة الوراثية للنطف. فيما بعد اجري فحص (AB test ) لكل من الرجال السليمين والعقيمين لقياس مدى تكثيف المادة الوراثية (Chromatin condensation ) التي تحصل اثناء تكوين الحيامن في الخصى والمهمة في المحافظة على سلامة المادة الوراثية. تم تقسيم المرضى العقيمين الى سبع مجاميع ، تتضمن مرضى قليلي النطف(oligozoospermia;O.) عددهم 12 ومرضى ذوي نطف قليلة العدد وشاذة(oligoteratozoospermia; OT.) عددهم 10 ومرضى يعانون من قلة عدد النطف وبطيئة الحركة وشاذة (oligoasthenoteratozoospermia; OAT.)عددهم 18 ومرضى يعانون من بطئ في حركة النطف(asthenozoospermia; A.) عددهم 6 ومرضى لديهم النطف بطيئة الحركة وشكل شاذ (asthenoteratozoospermia; AT.)عددهم 17 ومرضى نطفهم فقط شاذة الشكل(teratozoospermia; T.) عددهم 22 واخيرا مجموعة مرضى العقم غيرالمشخص وعددهم 26 . اظهرت نتائج الدراسة الحالية وجود فرق معنوي ( P< 0.05 ) بين الضرر في (DNA ) في نطف المرضى العقيمين مقارنة بالذكور السليمين باستعمال فحص (AO test )،في حين لم يسجل اي فرق معنوي بين مجموعتي الذكورالخصبين والعقيمين باستعمال فحص (AB test ). كذلك اظهرت نتائج الدراسة علاقة سالبة(r = - 0.575 ; P= 0.050), بين (AO test ) ومستويات الاس الهيدروجيني pH للسائل المنوي في مجموعة المرضى قليلي النطف(O) ، وكذلك ( r = - 0.500 ; P = 0.034) في مجموعة المرضى الذين يملكون نطف قليلة وبطيئة الحركة وشاذة المظهر(OAT). كذلك اظهرت مجموعة المرضى قليلي النطف علاقة سالبة ( r = - 0.634 ; P = 0.027)بين فحص (AO test) وكل من نشاط النطف (sperm activity) الصنف (A) وكذلك ظهرت علاقة سالبة ( r = - 0.684 ; P = 0.014) مع وقت التميع للسائل المنوي (semen liquefaction time). بالمقابل ظهرت علاقة سالبة قوية بين فحص ( AB test ) والنسبة المئوية لعدد النطف (r = - 0.840 ; P = 0.037) وكذلك مع النسبة المئوية للشكل المظهري الطبيعي للنطف( r = - 0.875 ; P = 0.022) في مجموعة المرضى ذوي نطف بطيئة الحركة . من ناحية اخرى النتائج اظهرت ان نسبة الضررفي المادة الوراثية لفحص (AO test ) كانت اكبر من نسبة فحص (AB test ). وبينما لوحظت علاقة موجبة بين الفحصين ( AO ,AB ) لاغلب مجاميع العقم السابقة فانه لم يسجل وجود فروق معنوية بين الفحصين (AO , AB ) لجميع مجاميع العقم. من النتائج التي ظهرت في هذه الدراسة نجد ان فحص السائل المنوي كان غير كافيا لتحديد خصوبة الرجل من عدمها بمعزل عن فحص المادة الوراثية والتي اظهرت كفاءتها في تحديد سلامة DNA النطف ، واخيرا فان الدراسة الحالية اظهرت ان فحص ( ( AO هو اكثر دقة من فحص (AB ) في التعرف على الضررالحاصل للمادة الوراثية. | The aim of this study was to evaluate the sperm DNA integrity for fertile men and infertile patients by using acridine orange (AO) test and aniline blue (AB) test, then to assess correlation between semen parameters with both AO test and AB test. Also to study the correlation between results of AO test and of AB test.Seminal fluid analysis was performed for thirty nine fertile men with average age (33.61 ± 5.23) years, and one hundred eleven infertile patients with average age (40.121 ± 6.708) years. The AO test was performed also for fertile and infertile men, then the chromatin condensation was measured by using AB test for fertile and infertile men. Infertile patients were divided into seven groups included Oligozoospermia (O.)=12, Oligoteratozoospermia (OT.)=10, Oligoasthenoteratozoospermia (OAT.)=18, Athenozoospermia (A.)=6, Asthenoteratozoospermia (AT.)=17, Teratozoospermia (T.)=22 and Unexplained infertility group=26. The results of the present study showed a significant (P< 0.05) difference in DNA fragmentation percent between fertile and infertile men by using AO test, but no significant difference (P>0.05) assessed by using AB test between both fertile and infertile men. Also a negative correlation was recorded between AO test and pH in oligozoospermia group (r = - 0.575; P= 0.050), and oligoasthenoteratozoospermia group ( r = - 0.500 ; P = 0.034). There was a good negative correlation assessed between AO test and grade (A) for sperm activity ( r = - 0.634 ; P = 0.027) , and liquefaction time ( r = - 0.684 ; P = 0.014) in oligozoospermia group. On the other hand, a strong negative correlation was noticed between AB test and sperm concentration (r = - 0.840 ; P = 0.037), and sperm morphology percentage ( r = - 0.875 ; P = 0.022) in asthenozoospermia group. Furthermore, results of DNA fragmentation percentage using AO test was higher than those using AB test with no significant difference. While there was a positive correlation between AO test and AB test in most of infertility groups, but no significant difference was assessed between the percentage of AO test and AB test in all infertility groups. From the results of this study, it was concluded that the seminal fluid analysis was not enough to obtain the fertility potential, and the sperm DNA integrity test was essential to detect DNA fragmentation in fertility clinics and laboratories. Both AO and AB test were easy and not expensive to perform for integrity test. Finally, AO test was more accurate test to detect abnormality of sperm DNA than AB test.