Share
عزل وتشخيص بعض انواع الجراثيم المحللة للمركبات الهيدروكاربونية من ترب محافظة نينوى == Isolation and Identification of some Hydrocarbon Degrading Bacteria from Soil in Nenavha Governorate
Author name:
ايمان محمد طاهر عزيز
Supervisor name:
اديبة يونس شريف حمو النعمان
General topic:
Biology
Specific topic:
Microbiology
Degree:
Master
University:
University of Al Mosul - College Of Science
Language:
Arabic
University location:
Mosul
First pages:
24T3105 - p.pdf
Abstract:
تضمنت الدراسة جمع (100) عينة تربة من مناطق مختلفة من محافظة نينوى والاقضية التابعة لها بعضها مناطق ملوثة كمصفى الكسك وقرية العلولية وقرية البوير ومنطقة الشيخان بهدف عزل وتشخيص الانواع الجرثومية للتربة ودراسة قابلية بعض الجراثيم المعزولة على تحليل النفط الابيض وزيت الغاز والنفط الخام. اظهرت نتائج العزل الحصول على 137 عزلة جرثومية من الانواع الموجبة والسالبة لصبغة كرام. وبنسبة 74.45% للانواع الموجبة لصبغة كرام و25.55% للانواع السالبة لصبغة كرام، شكل الجنس Bacillus نسبة 69.6% من الجراثيم الموجبة لصبغة كرام وان اكثر الانواع عزلا كان النوع B.circulans وبنسبة 26.47% من مجموع الجراثيم الموجبة وشكلت Proteus mirabilis اكثر الانواع عزلا من الجراثيم السالبة لصبغة كرام وبنسبة 28.57% من مجموع الجراثيم السالبة لصبغة كرام. وعند التحري عن قابلية عدد من انواع الجراثيم المعزولة من الترب المحلية لتحليل المركبات الهيدروكاربونية والتي شملت انواع من جنس Bacillus وهي B.cereus وB.subtilis وB.mycoides وB.megaterium وB.circulans، وانواع من جنس Micrococcus وهي M.roseus وM.luteus وM.varians وذلك باستخدام وسط الاملاح المعدنية الحاوي على المصادر الهيدروكاربونية وبنسبة 1%. اظهرت نتائج الدراسة زيادة في معدلات نمو معظم عزلات M.roseus وM.luteus وM.varians اذ كانت معدل اعدادها عند بداية التجربة 109×42 و109×31 و109×24 و107×25 و109×30.4 و109×25.3 للنوعين M.roseus وM.luteus على المصادر الهيدروكاربونية النفط الابيض وزيت الغاز والنفط الخام على التوالي ووصلت الى 106×36 و108×36 و109×31.2 و106×30 و107×28.5 و106×22.5 لهذين النوعين من الجراثيم على التوالي وعلى المصادر الهيدروكاربونية نفسها في حين لم تتمكن احدى عزلات M.luteus من النمو في الوسط الحاوي على النفط الابيض زيت الغاز والنفط الخام واحدى عزلات M.varians وعزلتي M.roseus على النفط الابيض والنفط الخام.اما الانواع التابعة لجنس Bacillus والنامية على النفط الابيض وزيت الغاز والنفط الخام فقد اظهر نموا جيدا وباعداد اعلى 105×30 لمعظم انواعها ما عدا B.circulans التي لم تتمكن من النمو على النفط الابيض واحدى عزلات B.megaterium وB.subtilis وB.cereus على النفط الخام وسجلت زيادة في الامتصاصية الضوئية خلال اوقات التجربة وبتناسق مع الزيادة في الاعداد الحية للبكتريا للانواع التابعة لجنس Micrococcus وBacillus النامية على النفط الابيض وزيت الغاز والنفط الخام.كما سجل انخفاض في الدالة الحامضية لجميع العزلات التي اظهرت نموا جيدا على المصادر الهيدروكاربونية المختلفة في الدراسة والتي عدت دليلا على قدرتها لتحليلها. فيما بقيت الدالة الحامضية عند 7.0 pH للعزلتين M.roseus النامية على النفط الابيض واحدى عزلات M.luteus وعزلتين لـ M.roseus واحدى عزلات M.luteus النامية على النفط الخام وكان الانخفاض في الاس الهيدروجيني قليلا اذ وصل الى 6.5 للعزلتين M.luteus وM.varians النامية على النفط الابيض والنفط الخام واحدى عزلات M.roseus النامية على زيت الغاز والنوع B.circulans النامية على النفط الابيض وB.cereus وB.subtilis وB.megaterium النامية على النفط الخام وان هذا الانخفاض ظهر في العزلات التي توقف نموها في اليوم الرابع للتجربة وعد استحلاب الوسط واختفاء الطبقة الزيتية من على سطحه دليلا على قدرة الجراثيم لاستهلاكه. اذ اظهرت معظم الانواع والعزلات المحللة استحلابا كاملا. كما تم اعتماد تقنيتي Gas - Chromatography GC وInfra - IR اذ لوحظ اختفاء اعداد كبيرة من الحزم العائدة للنفط الابيض وزيت الغاز المعامل بالعزلات الجرثومية المستخدمة في الدراسة مقارنة مع عينة النفط الابيض وزيت الغاز غير المعامل. ولوحظ كذلك اختفاء عدد من الاواصر عند استخدام تقنية IR اذ ظهرت اواصر الحامض الكاربوكسيلي والامايد والاستر في العينات المعاملة بالعزلات الجرثومية المحللة. ومن النتائج لوحظ ان الانواع المعزولة من مناطق ملوثة اظهرت قابلية جيدة لتحليل المركبات الهيدروكاربونية. | The study include the collection of 100 soil sample from Nenavah and it's vicinity, some of them were pollutant areas from Al - Kassic, Alalolia, Al - bwer Village, and Al Shikhan to isolated and identify and study the ability of some bacteria to degrade kerosene, diesel and crud oil. The results showed that the isolation of (137) bacterial isolates of both gram negative and positive bacteria, (74.45)% represent gram positive bacteria and (25.55)% were of the gram negative. Bacillus formed (69.6)% of the gram positive isolates, B.circulans was (26.47)% the most frequent isolate while Proteus mirabilis form (28.57)% of all gram negative bacteria. The ability of some isolated bacteria to degrade hydrocarbons including kerosene, diesel, crude oil was studied for Bacillus and Micrococcus which includes, B.circulans, B.cereus, B.mycoids, B.subtilis, B.megaterium, B.circulans, M.luteus, M.roseus and M.varians in mineral salts medium containing (1)% of hydrocarbon sources. The results showed an increase in the growth rates for most strain of M.roesus, M.luteus and M.varians as the mean count were 42×109, 31×109, 24×109, 25×107, 30.4×109 and 25.3×109 for M.roseus and M.luteus grown on kerosene, diesel and crude oil respectively, at the beginning and reached 36×106, 36×108, 31.2×109, 30×106, 28.5×107, 22.5×106 for mentioned species respectively on the same hydrocarbonic source at the end, whereas one strain of M.luteus didn't grow in the media containing kerosene diesel, and crude oil, and one strain of M.varians and two strain of M.roseus didn't grow in the media containing kerosene and crude oil all Bacillus species growing on kerosene, diesel and crude oil showed a good growth with colony count more than 30x105 for all strains except B.circulans which didn't grow on kerosene and of the strains of B.megaterium, B.subtilis and B. cereus which didn't grow on crude oil. An increase in photo absorption was recorded during the experimental period which were corresponding with increased viable counts of bacteria belonging to the genera of Micrococcus and Bacillus on kerosene, diesel, and crude oil. A decrease in pH was also recorded for all strain which showed a good growth on the different hydrocarbon sources used in the study which was considered as an indicator of their ability for degradation. While pH remained at (7.0) for two strains of M.roseus on kerosene one strain of M. luteus on diesel and two strains of M.roseus and one strain of M. luteus on crude oil. The decrease in pH was few as it reased (6.5) for two strains of M. luteus and M. varians growing on kerosene and crude oil one strain of M. roseus on diesel, B.circulans on kerosene and B. cereus, B. subtilis, B. megaterium on crude oil, this little decrease appeared in the strains which stopped growth at day four of the experiment Emulsification of media and disappeared of oil later of the surface was regarded as indicator for the ability of bacteria to consume hydrocarbon sources as most of hydrolytic strains showed complete emulsification.Gas chromatography (GC) and Infrared - IR techniques were used as indicators as disappearance of number of bands kerosene and diesel treated with the bacterial isolates used in the study compared with untreated sample of kerosene and diesel. And the disappearance of number of bonds was observed using IR technique, the carboxylic acid, amid and ester bonds appeared in bacterial treated sample. The bacteria isolated from polluted area have a good ability in the their hydrolytic activity.
