Share
تعبيرالعلامة المناعية النسيجية الكيميائية P57 في عذارية الخلد (الحمل العنقودي) الكامل والجزئي == Expression of P57 Immunohistochemical Marker In Complete and Partial Hydatidiform Mole by Using Tissue Microarray Technique
Author name:
رحاب خالد عباس
Supervisor name:
ختام رزاق كاظم الخفاجي
General topic:
Medicine
Specific topic:
Diseases
Degree:
Master
University:
University of Baghdad - Faculty Of Medicine
Language:
English
University location:
Baghdad
First pages:
19T1462 - p.pdf
Abstract:
تعتبرعذارية الخلد الحمل العنقودي شكل غير طبيعي من الحمل ويمكن تقسيمه الى نوعين : الحمل العنقودي الكامل والحمل العنقودي الجزئي . ويبقى الفحص النسيجي المفصل هو الاساس في تشخيص الحمل العنقودي . ان عدم الدقة في اخذ العينات والتنخر النسيجي والتفريغ المبكر للرحم يمكن ان يؤدي الى عدم التاكد في التشخيص وكذلك فان المعايير غير الموضوعية تؤدي الى تقلب ملحوظ بين الفاحصين.ان العلامة النسيجية المناعية الكيميائية (P57KIP2) هي مطبوعة الجين ابويا ومعبر عنها اموميا ووجود منتج البروتين يخدم كمؤشربديل لوجود جينات النواة الامومية ، ولان الحمل العنقودي الكامل هو النوع الوحيد من الحمل الذي ينقصه الجينات الامومية ، لذلك فان الصبغة المناعية P57KIP2 غير موجودة فيه بينما تكون موجودة في الحمل العنقودي الجزئي والحمل الطبيعي.الهدف من الدراسة1 - لتقييم اهمية العلامة النسيجية المناعية الكيميائية P57KIP2 في تشخيص الحمل العنقودي الكامل والحمل العنقودي الجزئي.2 - لمقارنة نتائج العلامة النسيجية المناعية الكيميائية P57KIP2 مع نتائج الصبغة المعتادة هيماتوكسيلين وايوسين.المواد وطرق العمل تم جمع سبعين حالة من خزع بطانة الرحم وتم تقييم جميع الحالات نسيجيا باستعمال الصبغة المعتادة هيماتوكسيلين وايوسين (H &E ) ثم تم تصنيفها الى حمل عنقودي كامل وحمل عنقودي جزئي (30) لكل منها و(10) حالات حمل طبيعي (اجهاض) وكذلك تم استخدام شرائح السيطرة السلبية. وقد تم جمع هذه الحالات خلال الفترة من كانون الاول 2011 الى اب 2012 من مختبرات مختلفة في العراق . وقد تم اعتماد تقنية جديدة في هذا البحث وهي طريقة مجاميع نسيجية صغيرة بتقطيع اثني عشرثقب صغيرمن عينات انسجة مختارة وبقطر 3ملم وصبها في كتلة واحدة ثم اخذ مقاطع من كتلة المجاميع النسيجية الصغيرة باستخدام المايكروتوم ووضعها على شريحة المجهر ثم صبغها بالصبغة المعتادة هيماتوكسيلين وايوسين ثم صبغها مرة اخرى بالصبغة النسيجية المناعية الكيميائية P57KIP2)). النتائجتم تشخيص 70 حالة حمل عنقودي وحمل طبيعي بواسطة استخدام الهيماتوكسيلين وايوسين في هذا البحث وكان معدل العمر للمرضى بين 17 سنة و50 سنة على النحو التالي : ( معدل الاعمار29 سنة ، والعمرالوسطي 27 سنة واكثر عمر تكرر20 سنة ) وكانت الغالبية من الحالات (50%) تتراوح اعمارها بين (20 - 29) سنة ولكن فقط (10%) من الحالات كانت اصغر من 19سنة. وكان الارتباط الاحصائي بين عمر المرضى ونوع الحمل العنقودي غير ملحوظ وقد كانت درجات مرضى الحمل العنقودي الكامل باستخدام الهيماتوكسيلين والايوسين على النحو التالي : الدرجة الاولى 43.3% ، الدرجة الثانية 53.4% والدرجة الثالثة 3.3% ولم يرتبط التوزيع العمري لكل درجة ارتباطا احصائيا . فيما يتعلق بتعبير الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57KIP2 عن حالات الحمل العنقودي الجزئي المشخصة سابقا بواسطة الهيماتوكسيلين والايوسين ، اظهرت 25 حالة من 30 حالة والتي تمثل 83.3% نتائج ايجابية ، بينما كانت نتائج الخمس حالات المتبقية والتي تمثل 16.7% سلبية ، وهذا يعني بانها كانت بالتاكيد حمل عنقودي كامل . وكانت هذه النتائج ذات دلالة احصائية عالية. ان نتائج تعبير الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57KIP2 عن حالات الحمل العنقودي الكامل المشخصة سابقا بواسطة الهيماتوكسيلين والايوسين ، كانت 26 حالة من اصل 30 حالة والتي تمثل 86.7% اظهرت نتائج سلبية مما يثبت تشخيص الحمل العنقودي الكامل ، بينما كانت نتائج الاربع حالات المتبقية والتي تمثل 13.3% ايجابية . وكانت هذه النتائج ذات دلالة احصائية عالية.ووجد في هذه الدراسة بان التوزيع العمري للمرضى في مختلف درجات الحمل العنقودي الكامل والتي اعربت عن نتائج سلبية للصبغة المناعية النسيجية الكيميائية كان ( معدل الاعمار 28.5 سنة والعمرالوسطي 27 سنة واكثر عمر تكرر25 سنة ). وقد وجد بان غالبية المرضى من الدرجة الاولى كانوا من اعمار20 - 39 سنة ، وكانت غالبية المرضى من الدرجة الثانية من اعمار20 - 29 سنة ، بينما كانت حالة واحدة فقط من الدرجة الثالثة بعمر38 سنة . ونتيجة لذلك كان الارتباط الاحصائي بين درجات الحمل العنقودي الكامل وبين معدل اعمار المرضى غير ملحوظ .ان درجات الحمل العنقودي الكامل والتي كانت سلبية باستخدام الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57KIP2 كانت اغلبها من الدرجة الثانية والتي كانت تمثل 53.4% وكانت الاقلية من الدرجة الثالثة والتي كانت تمثل 13.3% . وقد لوحظ بان جميع الحالات الاربعة والتي اعربت عن نتائج ايجابية باستخدام الصبغة P57KIP2 كانت من الدرجة الاولى وهي تمثل 13.3% . وكان الارتباط الاحصائي بين درجات الحمل العنقودي الكامل ونتائج الصبغة P57KIP2 ذات دلالة احصائية ملحوظة.الاستنتاجات1 - ان الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57 عامل مفيد في التشخيص الصحيح للحمل العنقودي الكامل.2 - ان الاخطاء في التشخيص المظهري للحمل العنقودي الجزئي اكثر تواترا من الاخطاء في التشخيص للحمل العنقودي الكامل.3 - توجد اختلافات واضحة في التصنيف الصحيح للحمل العنقودي بين استخدام الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57 واستخدام الصبغة العادية الهيماتوكسيلين والايوسين.4 - ان حالات الدرجة الاولى للحمل العنقودي الكامل مرتبطة بوضوح مع الاخطاء في التشخيص المظهري المؤدية الى المبالغة في تشخيص الحمل العنقودي الكامل.5 - الصبغة المناعية النسيجية الكيميائية P57 هي تقنية بسيطة يمكن استخدامها في مختبرات علم الامراض لتصحيح تشخيص الحمل العنقودي والتمييز بين الحمل العنقودي الكامل من اشباهه خصوصا في الحالات صعبة التشخيص. | Hydatidiform mole is an abnormal form of pregnancy divided in to two types; complete hydatidiform mole and partial hydatidiform mole. Detailed histopathologic examination remains to be the basis for the diagnosis of hydatidiform mole (HM). However, poor sampling, necrosis, and earlier uterine evacuation can lead to uncertainty in the diagnosis. Also, the criteria are subjective, resulting in considerable interobserver variability.The P57KIP2 gene is paternally imprinted and maternally expressed, and the presence of its protein product serves as an adjuvant marker for the nuclear maternal genome. Because a complete HM is the only type of conceptus lacking a maternal contribution, P57 KIP2 immunostaining is correspondingly absent, whereas it is present in partial HM and normal pregnancy. Aim of the study : 1.To evaluate the significance of the immunohistochemical marker P57KIP2 in the diagnosis of complete and partial hydatidiform mole . 2.To compare the P57KIP2 immunohistochemical marker results with that of ordinary Hematoxylin and Eosin slides histopathology results . Materials and Methods : Seventy cases of endometrial biopsies were obtained. Histologic evaluation of all cases was performed on routine sections stained with Hematoxylin and Eosin (H & E) and classified in complete and partial hydatidiform mole (30 each) and (10 cases) of normal product of pregnancy (abortion), and negative control slides were also used. These cases were collected during the period from December - 2011 to Augest - 2012. New technique is adopted in this research that is; Tissue microarray in which twelve small cores of representative tissue samples, each measure 3 mm in diameter Sections from microarray block are cut using a microtome, mounted on a single microscope slide and then analyzed by staining with Hematoxylin and Eosin, then another section made for the immunohistochemical staining with P57 KIP2 antibody. Results : • In this study of the 70 cases diagnosed as molar and normal pregnancies by H&E, the actual age range was from 17 to 50 years old, and the age distribution were; (mean 29 , median 27 , mode 20 years old), the majority of the cases (50%) were between the age of (20 - 29) years old whereas only (10%) of the cases were younger than 19 years old, the correlation between the age of the patients and the type of the Hydatidiform Mole (HM) was not significant. • Grades of patients with CHM based on H&E category were; 43.3% grade I, 53.4% grade II, and 3.3% grade III, and the age distribution for each grade was not statistically correlated. • Regarding the expression of p57KIP2 IHC Marker in cases of PHM diagnosed previously by H&E, 25 cases out of 30 cases which represented 83.3% expressed positive results. The remaining 5 cases which represented 16.7% expressed negative results, this means that they were definitely CHM. These findings were statistically highly significant.The results of P57KIP2 IHC Marker expression in cases of CHM diagnosed previously by H&E, were 26 cases out of 30 cases which represented 86.7%, expressed negative results this confirm the CHM diagnosis. The remaining 4 cases which represented 13.3%, expressed positive results this means that they were most probably PHM. These findings were statistically highly significant.• The age distribution of the patients in different grades of the CHM which expressed negative results for the IHC Marker p57KIP2 (Mean= 28.5, median=27, mode=25 years old), it was found that the majority of patients in grade I were from age 20 to 39 years old, and the majority of patients in grade II were from age 20 to 29 years old, while the only one case of grade III was 38 years old. The correlation between grades of CHM and patients ages was not significant.• The grades of the CHM which are negative for the IHC Marker p57KIP2, the majority of the patients were grade II which represent 53.4% and the minority of the patients were grade III which represent 3.3%. It was noticed that all four cases which expressed positive immunostaining for the IHC marker p57KIP2 were; grade I, and they represented 13.3%. The correlation between the grades of the CHM and the results of the p57KIP2 IHC marker was statistically significant.Conclusions : • P57KIP2 IHC marker is a useful adjunct, providing a definitive diagnosis of CHM. • Errors in morphologic analysis resulted primarily in over diagnosis of PHM are more frequent than in CHM.• There are significant differences in correct classification of hydatidiform mole between using P57KIP2 IHC marker and using H&E stain. • Cases in grade I of CHM were correlated significantly with the errors in morphological analysis resulted primarily in over diagnosis of CHM. • P57KIP2 IHC marker is a relatively simple method can be used in pathology laboratories to refining the diagnosis of molar pregnancy and distinguish CHM from its mimics in a subset of challenging cases.
