Share
دراسة جزيئية ومناعية لفايروس النورو والفايروس الغدي نمط 40 و41 في الاطفال المصابين بالاسهال == Molecular and Immunological Study of Norovirus and Adenovirus types 40 and 41 in Diarrheic Children
Author name:
رمله احمد محمد حسن العميدي
Supervisor name:
مهدي حسين محيل العمار
General topic:
Biology
Specific topic:
Life Science
Degree:
Doctorate
University:
University of Kufa - College Of Science - Department Of Biology
Language:
English
University location:
Najaf
First pages:
24T3031 - p.pdf
Abstract:
هدفت هذه الدراسة الى التحري عن فايروسي النورو والفايروس الغدي نمط 40 / 41 في الاطفال المصابين بالاسهال واجراء تحليل لمعدل الاصابة وطبيعتها ودراسة الطبيعة الجزيئية للفايروسين وكذلك التحري عن قدرة الفايروسين على حث الجهاز المناعي وتحديد بعض الحركيات الخلويه عند الاطفال المصابين بالفايروسين.بالاضافة الى دراسة بعض ملامح الاصابه مثل تغاير الفصول والعمر وتحديد افضل الطرق لتشخيص الفايروسين. اجريت الدراسة الحالية في محافظة النجف الاشرف /مستشفى الزهراء التعليمي للولادة والاطفال خلال الفترة من كانون الثاني2014 الى كانون الاول 2014 والتي تضمنت 314 عينه من البراز والدم من الاطفال المصابين بالاسهال والذين تتراوح اعمارهم بين شهر الى خمسة سنوات.حيث اعتمد التحري في عينات البراز استخدام اختبار الكروماتوغرافيا المناعي السريع للكشف عن المستضدات الفايروسية للفايروسين النورو والغدي نمط 40 / 41.كما تم تاكيد العينات الموجبة بواسطة تقنية PCR Real Time لفايروس النورو تقنية PCR للفايروسالغدي نمط40 / 41،والتي اظهرت فيها النتائج بان معدل الاصابة كان 11.7% لفايروس النوروو8.9% للفايروس الغدينمط 40 / 41.كذلك تم فحص العينات الموجبة بواسطة المجهر الالكتروني والتي بينت مظهر للفايروسين في عينات البراز . وتشير الدراسة الى ان التقنيات الجزيئية المستخدمة في فحص العينات هي الاكثر كفاءة للتشخيص الروتيني للفايروسين مقارنة مع المجهر الالكتروني لتشخيص عينات الاسهال.وطبقا للفئات العمرية ،اظهرت النتائج ان الفئة العمرية 13 - 24 شهر سجلت ارتفاع عالي للاصابة بالفايروسين النورو والغدينمط 40 / 41.الحالات الايجابية كانت بين الاطفال الذين يتغذون على الحليب الجاف الاصطناعي (31 حاله) مقارنة مع الرضاعة الطبيعية من الام (14 حاله).اما نتائج الاعراض السريرية في الاطفال المصابين بالفايروسين فاظهرت ان كل الحالات تبين وجود اسهال من النوع المائي المخاطي وبنسبة 100% يليها الالم البطن بنسبة 94.5% و82.1 %،التقيؤ بنسبة 81 % و78.5 % واخيرا الحمى بنسبة 78.3% و71.1 % لكلا من النورو والغدي نمط 40 / 41 على التوالي. كما كشفت الدراسة الحالية بان معدل الاصابة المرتفع لفايروس النوروكان من شهر كانون الثاني الى اذار والتي كانت بنسبة 81%من الحالات الموجبة ، اما بالنسبة لفايروسالغدينمط 40 / 41كان معدل الاصابة المرتفع من شهر كانون الثاني الى نيسان والتي كانت بنسبة 89.2% من الحالات الموجبة. كما اظهرت النتائج وجود ارتفاع كبيرفيالحركيات الخلويه (السايتوكينات) لمصل الاطفال المصابين مقارنة مع السيطرة. وفقا للفئات العمرية ،اظهرت الفئة( 49 - 60) شهر ارتفاع عالي في مستويات الانترفيرون كاما ، الانترلوكين - 6((IL - 6 والانترلوكين - 12 (12 IL - (حيث كانت للفايروس النورو(90.8, 56.7, 84.3) جزء من الغرام /مل على التوالي،بينما كانت لفايروسالغدي(106.5, 59, 87.5)جزء من الغرام /ملعلى التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة. | Norovirus and adenovirus types (40 and 41) are the important causes of gastroenteritis infections in children worldwide. The present study was designed to determine the incidence and nature of infection of norovirus and adenovirus types (40 and 41) at molecular and immunological levels, as well as some features such as seasonal variation , age distributions and detected the most effective and suitable method for diagnosis of the two viruses . The study was carried out in Al - Najaf province, in AL - Zahra teaching hospital for maternity and children, during the period from January, 2014 to December, 2014. Stool and blood samples were collected from 314 children with diarrhea, their age range (from 1months to 5 years). Immunochromatographic assay for norovirus and adenovirus used to detect their antigens in stool samples, the positive results were confirmed by reverse transcriptase real time PCR technique for norovirus and polymerase chain reaction technique for adenovirus types (40 and 41), which showed incidence of 11.7% and 8.9% for norovirus and adenovirus, respectively. Transmission electron microscopy examination gave clear positive norovirus and adenovirus types (40 and 41) appearance in diarrheal stool samples .The study indicates that molecular methods are most suitable and sufficient tests for routine diagnosis of norovirus and adenovirus types (40 and 41) as compared to transmission electron microscopy analysis for diarrheal samples. According to age groups, the results showed that the majority of infections with norovirus and adenovirus were recorded among age group (13 - 24) months. The positive cases were highly among infants fed with bottle fed (31 cases) compared with infants fed with breast fed (14 cases). Regarding the clinical features of children with viral diarrheal infections , the results showed that all of the cases of both viruses complained of watery or mucosal consistence stool (100%) followed by abdominal pain (94.5%) and (82.1%), vomiting (81%) and (78.5%) , and fever (78.3%) and (71.4%) for norovirus and adenovirus positive children respectively. The present study also revealed that a higher incidence of norovirus was detected from January - March 2014, when it was found in 81% (30/37) of the positive cases, whereas the incidence of adenovirus was higher from January - April 2014, during which it was found in 89.2% (25/28) of the positive cases. The current study for cytokines profile detection showed that significant elevation in patients with norovirus and adenovirus than control. The age groups 49 - 60 months have shown a high level in cytokines Interferon gamma, Interleukin - 6 and Interleukin - 12 with concentration were (84.3, 56.7, 90.8) pg./ml , respectively for norovirus while adenovirus were (87.5, 59, 106.5) pg./ml , respectively as compared with control group . Conclusion of the study shows incidence norovirus genotypeII (GII) and adenovirus types (40 and 41) by rapid chromatographic test from infected children in Al - Najaf province. The study indicates that molecular techniques are most suitable and sufficient tests alternatively for transmission electron microscopy when there is good facility and both can replaced by rapid chromatographic test . Interferon gamma, Interleukin - 6 and Interleukin - 12 were increased in all patients with norovirus and adenovirus infections and showed high level in age group (49 - 60) months
