Share
التوصيف الجزيئي لبعض الفطريات الانتهازية المعزولة من المرضى الضعاف مناعيا واختبار حساسيتها تجاه مستخلص الثوم == Molecular Identification of Some Opportunistic Fungi Isolated from Immunocompromised Patients and Their Testing Sensitivity Against Extract of Garlic ( Allium sativum)
Author name:
هند حبيب عبد الامير الفرطوسي
Supervisor name:
ياس خضير عباس | ميثاق ستار عبود
General topic:
Biology
Specific topic:
Microbiology - Fungi
Degree:
Master
University:
University of Thi-Qar - College Of Education For Pure Sciences - Department Of Biology
Language:
Arabic
University location:
Dhi Qar
First pages:
24T3036 - p.pdf
Abstract:
تضمنت الدراسة الحالية العزل والتوصيف الجزيئي والمظهري لبعض الفطريات الانتهازية من القناة التنفسية السفلى للمرضى الضعاف مناعيا المراجعين لقسم الاورام في مستشفى الحبوبي والمراجعين للعيادة الاستشارية للامراض الصدرية في محافظة ذي قار (جنوب العراق) حيث تم جمع 130عينة قشع sputum للفترة من 1/10/2015 الى 1/5/ 2016 . بلغ عدد العينات الموجبة للزرع 85عينة وبنسبة 65.38% , اذ شكل عدد عينات الاناث الموجبة 21 عينة وبنسبة 46.67 % , اما عدد عينات الذكور الموجبة فقد بلغ 64 عينة وبنسبة 75.29% . ظهرت اعلى نسبة عزل عند الفئة العمرية 61 - 70 سنة وبنسبة 32.94 % بعدها الفئة العمرية 31 - 40 سنة وبنسبة 15.25 % . وتم الحصول على 106 عزلة فطرية . باستخدام طرق التشخيص المظهرية والجزيئية, بينت هذه الدراسة ان اعلى نسبة ظهور للفطريات المعزولة تمثلت بجنس spp. Candidaثم جنس Aspergillus spp.تلاه جنس Penicillium spp. بالنسب المئوية 49.41% 38.32 % 21.17 % وبالترتيب . كما ظهرت Candida albicans ثم Aspergillus flavus بالنسب المئوية 36.47 % , 12.94% بالترتيب, كما تم تسجيل 15 عزلة من الفطريات المعزولة في البنك الجيني الدولي . شملت الدراسة استخدام اربعة مذيبات عضوية وهي الايثانول, الاسيتون, الميثانول والماء بحيث كان قد استخدم من المذيبات الثلاثة غير الماء التراكيز 50%, 70% فضلا عن التركيز المطلق للحصول على مستخلص الثوم. اختبرت اربعة تراكيز من كل مذيب ضد 11 نوعا من الفطريات المعزولة, واظهر المستخلص المائي كفاءة جيدة في تثبيط جميع انواع الفطريات المدروسة بالمقارنة مع المذيبات العضوية الاخرى اذ بلغ اعلى معدل تثبيط عند التركيز400 مايكروغرام\مل بحيث ابدى الفطر Penicillium notatum تاثرا كبيرا للمستخلص المائي الذي بلغ اعلى معدل تثبيط له (60 مليمتر) عند التركيز المذكور . حددت الفعالية الحيوية لكل مذيب ضد كل الفطريات المدروسة وتم مقارنة المستخلص مع ثلاثة مضادات فطرية Miconazole وNystatin وAmphtericin B واظهر المضادان الاول والثاني تاثيرات متباينة اما المضاد الثالث فلم يظهر اي تاثير على الفطريات المختبرة . تم تحديد السمية الخلوية للمستخلص المائي الخام باستخدام كريات الدم الحمر ولم يتسبب في اي تحلل دموي. كذلك تضمنت الدراسة الكشف عن المركبات التي يحتويها المستخلص المائي للثوم باستخدام الكشوفات النوعية وتقنية كروماتوغرافيا الغاز GC فكشفت تلك الطرائق وتقنية كروماتوكرافيا الغاز بان المستخلص يحتوي على القلويدات والفينولات والفلافونويدات والتربينويدات والتانينات والكاروتينات بالاضافة الى وجود الاحماض الامينية ومركبات كبريتية اهمها الاليسين allicin واخرى اروماتية | The current study included isolation and molecular and phenotypic identification of some the opportunistic fungi from the lower respiratory tract of the immunocompromised patients in the Department of Oncology and Thoracic Consultant Clinic of Alhaboobi hospital at Thi - Qar Province ( South of Iraq). The specimens of sputum were 130 which collected during 1/ October /2015 until 1/May/2016. The study showed that 85 of the collected specimens appeared as positive results which were 65.38% of the ratio in which the females ones were 21 (46.67%) specimens while 64 (75.29%) for males. In addition that, the highest ratio of the positive results was recorded in the ages of 61 - 70 years, followed by 31 - 40 years which were 32.94% and 15.25%, respectively. Totally, 106 isolates of the isolated opportunistic fungi appeared from the positive specimens. Through using morphological methods and molecular techniques, this study showed the first rank of the isolated fungi was Candida spp followed by Aspergillus spp, and Penicillium spp which possessed ratios of 49.41%, 38.32% and 21.17, respectively. According to the species, the first ratio of the isolation was Candida albicans followed by Aspergillus falvus, as 36.47%, 12.94%, respectively. Fifteen fungal isolates of the present study were recorded in the Gene Bank of NCBI. In this study, the extracts of Allium sativum were separately obtained by using four organic solvents (ethanol, acetone, methanol and water) and three concentrations (50%, 70% and absolute) of each solvents except water. Four concentrations of each extract were tested against 11 species of the isolated fungi in which the water extract gave the best value of the bioactivity including highest inhibitory value (60 mm) against Penicillium notatum by using 400µg\ml compared with the extracts of ethanol, acetone, and methanol. The bioactivity of Allium sativum extracts of each solvent was done against the tested fungi in comparison with Amphotericin B, Nystatin and Miconazole in which two of them produced the different bioactivities while Miconazole had no effect. The blood cytotoxicity of the crude water extract was performed against red blood cells and it did not appear any hemolysis. The chemical tests and Gas Chromatography (GC) revealed that the water extract contains alkaloids, phenols, flavonoids, terpenoids, tannins and carotenes in addition to sulfur formations, such as allicin as well as aromatic compounds.
