Share
تاثير مستخلص نبات السذب (Ruta chalepensis) في التحليلات الوراثية الخلوية والمناعية في الفئران البيض == The Effect of Sudab plant (Ruta Chalepensis ) Extract in Cytogenetics and Immunological Analysis in Albino mice
Author name:
انتخاب محسن عبد علي الاسدي
Supervisor name:
مناهل نجيب بحو
General topic:
Biology
Specific topic:
Zoology
Degree:
Master
University:
Mustansiriyah University - College Of Science
Language:
Arabic
University location:
Baghdad
First pages:
24T3201 - p.pdf
Abstract:
اجريت الدراسة الحالية لتقييم المستخلص الخام الميثانولي الحار لاوراق نبات السذب Ruta chalepensis اذ جرى تقدير النسبة المئوية للمستخلص بالنسبة للوزن الجاف واجراء الكشف الكيميائي العام ,ومن ثم دراسة مدى سمية النبات،وذلك باجراء اختبار الجرعة الوسطية المميتة LD50 ( 50Lethal Dose ) في الفئران البيض ,ولتحديد التراكيز المثلى تم انتخاب (3 و5 و10) % من قيمة LD50 ،وتم استخدام هذه التراكيز في التجارب اللاحقة وهي (58و88و176) ملغم/كغم فضلا عن اجراء فحص السمية الخلوية لكريات الدم الحمراء للخروف ( SRBCs) Sheep Red Blood Cells باستخدام التراكيز الناتجة من اجراء تجربة LD50. لذلك شملت هذه الدراسة ثلاثة محاور : - اختبارات التحليلات الوراثية الخلوية Cytogenetics Analysis المتمثلة باختباري دليل الانقسام الخيطي Mitotic Index والتشوهات الكروموسوميةChromosomal Aberrationsفي خلايا نقي عظم الفارBone Marrow, وبعد التاكد من انعدام التاثيرات السمية الوراثية للمستخلص اجري التداخل مابين التراكيز (58و 88و 176) ملغم/كغم وعقار مايتومايسين - C بتركيز (0.5) ملغم/كغم, وبشكل ثلاث معاملات وهي المعاملة بالمستخلص (قبل) و(بعد) و(مع) المطفر (MMC) ,لاختبار فعالية المستخلص في منع اوتحوير او تقليل فعل العقار, ومعرفة الالية التي تعمل بها المركبات التي يحويها المستخلص. دراسة تاثير المستخلص في بعض الجوانب المناعية وبالتراكيز المستخدمة نفسها في التحليلات الوراثية الخلوية في نظام الفار الابيض من خلال المعايير الاتية : - - فحص الحساسية العاجل Arthus Reaction وفحص الحساسية الاجل Delayed type hypersensitivity test (DTH) . - فحص العيوشية Viability test والتفعيل Activation والبلعمة Phagocytosis للخلايا البلعمية الصفاقية. - فحص تثبيت المتمم (C.F.T) Complement Fixation Test. تقدير مدى العلاقة بين التحريات المختبرية الوراثية الخلوية والمناعية. وقد توصلت الدراسة الى النتائج الاتية : - 1 - احتواء المستخلص الميثانولي لاوراق نبات السذب على التانينات، والراتنجات، والكومارينات، والفلافونات، والقلويدات، والكلايكوسيدات والزيوت الاساسية وعدم احتواءه على الصابونيات، والتربينات والستيرويدات.2 - عدم وجود تاثير سمي على كريات الدم الحمراء للخروف للتراكيز الناتجة من اجراء تجربة LD50 . اما نتائج الدراسة الوراثية الخلوية فهي : - 1 - عدم وجود تاثير سام اومطفر للمستخلص الكحولي الميثانولي لاوراق نبات السذب بالتراكيز الثلاث عند حقنها في الحيوانات المختبرية.2 - اوضحت نتائج التداخل بين المستخلص الكحولي لنبات السذب والمطفر قدرة التراكيز الثلاث من المستخلص في رفع دليل الانقسام الخيطي وخفض التشوهات الكروموسومية وقد اعتمدت القدرة التثبيطية على نوع المعاملة فقد اظهرت المعاملة بالمستخلص قبل ومع المطفر قدرة اعلى من المعاملة بالمستخلص بعد المطفر. 3 - صنف نبات السذب على انه مضاد للطفرة الوراثية من النوع المباشر بالدرجة الاولى ومضاد حيوي للطفرات بالدرجة الثانية. اما نتائج الدراسة المناعية فقد توصلت الى مستويات جيدة وغالبا معنوية لاغلب الفحوصات المناعية مقارنة بالسيطرتين السالبة والموجبة, والنتائج كالاتي : - 1 - عدم وجود تاثير سمي على الخلايا البلعمية بدلالة فحص العيوشية وحصول استجابة مناعية لانوعية بدلالة زيادة النسبة المئوية لكل من التفعيل والبلعمة.2 - ظهور استجابة مناعية نوعية خلطية معتمدة على الخلايا اللمفاوية البائية بدلالة زيادة كل من معدلات فحص الحساسية العاجل وفحص تثبيت المتمم.3 - حصول استجابة مناعية نوعية خلوية معتمدة على الخلايا اللمفاوية التائية بدلالة زيادة معدلات فحص الحساسية الاجل بزيادة تركيز المستخلص. اظهر تقدير معامل الارتباط بان هناك علاقة قوية لمعظم التحريات المختبرية الوراثية الخلوية والمناعية, وهذا يدل على مدى العلاقة بين هذه التحريات من جهة ومدى تاثير المستخلص من جهة اخرى. | This study was designed to evaluated the hot crude methanolic extract for Ruta chalepensis . The percentage of extract was determine in percent to dried weight, and making the chemicals investigation for active compound. In addition to studying plant toxicity by making lethal dose(LD50) test in white mice to detected optimum concentration. Three percentage was selected which (3, 5, 10)% from (LD50) value, and these percentage represented by this concentration which (58,88,176) mg/kg. In addition to the cytotoxicity test was making on Sheep Red Blood ells (SRBCs) to these concentration. So that these study included three sides represented by : - Cytogenetics analysis tests which including mitotic index(MI) and chromosomal aberration(CA) tests in mice bone marrow, after certainly from loosing the genotoxic effects of extract, the interaction between three concentration (58, 88, 176) mg/kg and mitomycin (MMC) drug in concentrate (0.5) mg/kg was making in three forms of treatment of extract (before) (after) (with) mutagen MMC to asses extract activity in prevented or modulated or decreased the drug action , and to know the mechanisms which making it the active compound of the extract. - The study of some Immunological side of extract in same concentrates used in cytogenetics analysis which (58, 88, 176) mg/kg in white mice system represented by : - Measuring the body weight of animal before and after Immunization program, Arthus reaction and delayed type hypersensitivity test , Viability, Activation, Phagocytosis andComplement fixation tests. - Evaluating the relationship scope between cytogenetic, and Immunological laboratories investigations and the results of this study shown : - 1 - The methanolic extract of Ruta plant leaves is contain tannins, resins, comarins, flavonoids, alkaloids, glycosids, and essential oils and discontent of saponins, terpins, and steroids. 2 - No toxicity effects on (SRBCs) for concentrations resulted from LD50 test. 3 - No toxic or mutagenic effect of methanolic extract of Ruta plant leaves in this concentration when administration it in laboratories animal .4 - The MMC have mutagenic and cytotoxic effects in concentration (0.5) mg/kg indicate control positive animals test, these effects included the toxicity and mutagenecity for MMC by decrease the mitotic index and increase the chromosomal aberration for mice bone marrow. 5 - The interaction between methanolic extract and MMC shown the three concentration of plant extract is high efficiency in increase the mitotic index and decrease the chromosomal aberration, and these high efficiency independent on treatment type which shown the extract treatment before and with mutagen is highly efficiency from extract treatment after mutagen.6 - The Ruta chalepensis is classified as antimutagenic in first degree and Bioantimutagens in second degree. The results of Immunological study arrived to highly levels mostly significant in compare of negative (PBS) and positive (MMC) controls for most Immunological tests, The resulted shown 1 - Increasing the body weight means when the treatment by methanolic extract for ruta plant by increasing concentration of extract. 2 - No toxicity effect for phagocytic cells shown by Viability test and non specific immune response in indicate increasing all activation percentage and peritoneal phagocytosis 3 - Shown humeral immune response dependent on B - lymphocyte in indicate increased all of Arthus reaction and Complement fixation test.4 - Shown specific cellular immune response dependent of T - lymphocyte in indicate increased delayed type hypersensitivity Test mean by increasing extract concentration. - The correlation ship shown there are a strongly relationship between cytogenetic and Immunological laboratory investigations, and these indicated the relationship between laboratory investigations from side and the extracts effective scope by these test from other sides.