Share
العلامات البيولوجية لسايتوم النواة الصغيرة الشدقي في عينة من المرضى العراقيين المصابين بداء الذئبة الحمامية المجموعية == Buccal Micronucleus Cytome Assay in Patients with Systemic Lupus Erythematosus
Author name:
احمد خالد محمد
Supervisor name:
زياد شفيق الراوي | فائق ايشو كوريال
General topic:
Medicine
Specific topic:
Diseases - Joints
Degree:
Higher Diploma
University:
University of Baghdad - Faculty Of Medicine
Language:
English
University location:
Baghdad
First pages:
19T1555 - p.pdf
Abstract:
داء الذئبة الحمامية المجموعية هو مرض مجموعي منيع للذات مع تداخل عوامل وراثية وبيئية في عملية امراض الداء. عدة دراسات اكدت وجود تضرر في الدنا عند مرضى داء الذئبة الحمامية المجموعية.الهدف : لتقييم المورفولوجيا الخلوية والنووية لعينة من مرضى داء الذئبة الحمامية المجموعية من خلال المقايسة العددية للنواة الصغيرة الشدقية ولتقييم اثر خصائص المرضى على التغيرات النووية ان وجدت.المرضى والطرائق : شملت الدراسة 58 مريضا عراقيا مصابا بداء الذئبة الحمامية المجموعية و58 شخصا سويا كمجموعة ضبط متوافقة من حيث العمر والجنس.تم اخذ التاريخ المرضي الكامل واجراء الفحص السريري التام لكل افراد المجموعتين. ووثقت خصائص المرضى (العمر، والجنس، ومعيار كتلة الجسم، ومدة المرض، ومعامل مجموعة تقدير الذئبة للجزر البريطانية (بيلاج) لعام 2004، والتاريخ العائلي للامراض المنيعة للذات، والادوية المستعملة). تكون بروتوكول المقايسة العددية للنواة الصغيرة الشدقية من : جمع الخلايا من كلا الشدقين بواسطة ملوق خشبي وتحضير مباشر للشرائح مع تثبيت الخلايا بواسطة الكحول المطلق بواقع شريحتين لكل شخص. احتسبت 1000 خلية لكل شخص لتقدير تكرار النوى الصغيرة لديه. تم تلوين الخلايا بواسطة طريقة الفولغين - الثينوين المختصة بالدنا. تم التحري في الخلايا المفحوصة عن التشوهات النووية (النوى الصغيرة، والبراعم النووية، وازدواجية النواة، والخلايا القاعدية والمتخصصة، والكروماتين المكثف، والخلايا ممزقة النواة، والخلايا المتغلظة والخلايا حالة النواة).النتائج : اظهر مرضى الذئبة الحمامية المجموعية ارتفاعا واضحا في تكرار الخلايا ذات النوى الصغيرة (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، والبراعم النووية (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، وازدواج النواة (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، والخلايا القاعدية (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، والكروماتين المكثف (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، والخلايا ممزقة النواة (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001)، والخلايا المتغلظة (القيمة الاحتمالية=0.012)، والخلايا حالة النواة (القيمة الاحتمالية اقل من 0.0001) اكثر مما لدى مجموعة الضبط. لم يكن هناك تاثير معتد به للعمر او معياركتلة الجسم او مدة المرض او معامل مجموعة تقدير الذئبة للجزر البريطانية 2004 او الادوية المستعملة على عدد النوى الصغيرة ضمن مجموعات المرضى. كما اظهر البحث ان فحص المقايسة العددية للنواة الصغيرة الشدقية حساس ومعتد به في التحري عن داء الذئبة الحمامية المجموعية (القيمة الاحتمالية اقل من 0.01).الاستنتاج : مرضى الذئبة الحمامية المجموعية لديهم ارتفاع ذو اعتداد عال في الوسمات الحيوية لضرر الدنا وعيوب الحرائك الخلوية والكوامن التكاثرية والموت الخلوي بالمقارنة مع مجموعة الضبط. لا يوجد تاثير لخصائص المرضى على التشوهات النووية. فحص المقايسة العددية للنواة الصغيرة الشدقية هو طريقة حساسة وغير باضعة وبسيطة جدا يمكن استعمالها في التحري عن داء الذئبة الحمامية المجموعية | Systemic lupus erythematous (SLE) is a systemic autoimmune disease with both genetic and environmental factors implicated in disease pathogenesis. Several studies have addressed the presence of deoxynuclic acid (DNA) damage in SLE patients.ObjectivesTo assess cellular and nuclear morphology in a sample of SLE patients by buccal micronucleus cytome assay and to evaluate effect of patients' disease characteristics on nuclear abnormalities if present.Patients and methodsFifty eight Iraqi SLE patients and 58 healthy controls matched in age and sex were included in this study. Full history was taken and complete physical examination was done for individuals in both groups. Patients' baseline characteristics [Age, sex, body mass index (BMI), disease duration, British Isles Lupus Assessment Group (BILAG) 2004 score, family history of autoimmune diseases, and medications used] were recorded. The buccal micronucleus cytome assay protocol consisted of : cell collection from both cheeks with a wooden spatula; direct slide preparation and fixation with absolute alcohol. Two slides were prepared for every subject and 1000 cells were evaluated per subject to determine the micronucleus (MN) frequencies. Slides were stained with the DNA - specific Feulgen - thionin method. Cells were screened for nuclear abnormalities : micronuclei, nuclear buds, binucleation, basal and differentiated cells, condensed chromatin, karyorrhectic cells, pyknotic cells, and karyolytic cells.ResultsPatients with SLE showed significantly higher frequencies of micronuclei (p<0.0001), nuclear buds (p<0.0001), binucleated cells (p<0.0001), basal cells (p<0.0001), cells with condensed chromatin (p<0.0001), karyorrhectic cells (p<0.0001), pyknotic (p<0.012) and karyolytic cells (p<0.0001) than the control group. Patient's age, BMI, SLE disease duration, BILAG2004 score, and drugs used had no significant effect on micronucleus groups (p>0.05). Buccal micronucleus cytome was significant and sensitive method for SLE screening (p<0.01).ConclusionsSLE patients had a highly significant increase in the biomarkers of DNA damage, cytokinetic defects, proliferative potential, and cell death compared to controls. No significant effect of patients' baseline characteristics on nuclear abnormality. Buccal micronucleus cytome was a sensitive, non - invasive, and very simple method that can be used for SLE screening.
