تاثير الصبغات الحيوية في مكونات الجدران الخلوية للبكتيريا المعزولة من المرضى المصابين بالاكزما الجلدية
Author name:
زينب عويد شاطي
Supervisor name:
سوسن حسن عثمان كورجي
General topic:
Biology
Specific topic:
Microbiology - Bacteria
Degree:
Master
University:
Mustansiriyah University - College Of Science
Language:
Arabic
University location:
Baghdad
First pages:
24T3298 - p.pdf
Abstract:
• جمعت 100 مسحة جلدية خلال الفترة من تشرين الاول 2013 لغاية اذار 2014 من المرضى الذين يعانون من الاكزما الجلدية من مستشفى الامام علي ومستشفى الشهيد الصدر في العاصمة بغداد والذين كانت تتراوح اعمارهم بين (5اشهر - 70 سنة) ,من مجموعهم كانت (72 %) موجبة الزرع البكتيري ,و( 38%) سالبة للنمو . وقد اظهرت النتائج التالي : • ان كلا الجنسين يتاثر بالاكزما ,مع ارتفاع النسبة لدى الاناث 57% على الذكور 43% ضمن الانواع المختلفة للاكزما .• ان اعلى ارتفاع للاكزما كان ضمن الفئة العمرية 5اشهر - 9 سنوات ( 45 %) ,متبوعة بالفئة العمرية 30 - 39سنة كانت( 14 %) بينما اقل نسبة (5%) كانت ضمن الفئة العمرية 20 - 29 سنة .• الاكزما التلامسية كانت اعلى نسبة للانتشار(57 %) , يليها الاكزما الولادية بنسبة ( 35 %) والاكزما القرصية( 5%) بينما الاكزما العصبية كانت (3%).• من مجموع 100 مريض يعاني من الاكزما في جميع مجاميع الدراسة ,ظهرت Staphylococcus aureusباعلى نسبة 20عزلة (57.14%) ,تليهاStaphylococcus haemolyticus بسبع عزلات ( 20%)Pseudomonas, fluorescens, خمس عزلات (14.28 %) ,وعزلتان لبكتريا Enterobacter aerogenes ( 5.7%) وعزلة واحدة لبكتريا Staphylococcus warneri (2.8%) .• اختبرت العزلات البكتيرية للمضادات الحيوية.• P. fluorescens كانت مقاومة 18 مضاد حيوي وحساسية لمضادي ( neomycin ,(nitrofurantoin, حيث اظهرت العزلات مقاومة 100 % لمضادات (lactams,erythromycin ,azithromycin ,oxacillin ,trimethoprimβ) ومقاومة 50 % لمضادات (levofloxacin ,rifampicin ,norfloxacin )• E. aerogenes قاومت مضادات البيتالاكتام بنسبة 100 % ,وكانت حساسة بنسبة 100 % لمضادات المجموعة الامينوكلايكوسيدية ((Amikacin ,gentamicin ,بينما اعطت مقاومة متوسطة لمضاد neomycin .• S.aureus قاومت 11 نوع من المضادات الحيوية وحساسة لثمانية انواع من المضادات ,بينما S.haemolyticus مقاومة 15 نوع من المضادات وحساسة لاربع انواع ومتوسطة لمضاد levofloxacin. وذلك يختلف عن S.warneri الحساسة 14 نوع من المضادات ومقاومة لخمسة انواع ومتوسطة لمضاد Oxacillin .• اختبرت قابلية البكتريا على النمو بوجود تراكيز مختلفة من الصبغات الحيوية (الصبغات الحيوية التي استخدمت الكرستال البنفسجية والمثيل الحمراء والمثيلين الزرقاء) مما سمح بتحديد التركيز المثبط الادنى للصبىغات ,فكان التركيز المثبط الادنى للمثيلين الزرقاء على S. haemolyticus , P.fluorescens بلغ 1ملغ\مل بينما على S .warneri , S .aureus 10 ملغ\مل ,بينما التركيز المثبط الادني للمثيل الحمراء كان 1 ملغ \مل لكل الانواع البكتيرية , التركيز المثبط الادنى للكرستال البنفسجية كان 0.1 ملغ\مل لكل الانواع ماعدا S.warneri التي كان التركيز المثبط لها 1ملغ\مل .• اظهرت البكتيريا السالبة لكرام اقل مقاومة للصبغات من البكتيريا الموجبة لكرام والصبغة المتعادلة ابدت تاثير اكثر من الصبغة الحامضية والقاعدية عند نفس التركيز , وسمحت الصبغة القاعدية بنمو البكتريا الموجبة لكرام بينما ثبطت السالبة لكرام .• اظهرت دراسة تاثير الصبغات على عوامل الضراوة للعزلات البكتيرية عدم تاثرانتاج الكبسولة ولكن تم تثبيط عوامل الالتصاق للعزلات البكتيرية بواسطة الصبغات , بينما استطاعت المعاملة بالصبغات اختزال قابلية العزلات البكتيرية على تكوين الغشاء الحيوي ,كذلك تناقصت القابلية العالية للعزلات البكتيرية على التلازن مع اللاكتين المستخلص من الخلايا الطلائية بعد المعاملة بالصبغات الحيوية .• استخدمت طريقة المطياف الضوئي لدراسة تاثير الصبغات على نفاذية غشاء الخلية فكانت الزيادة في امتصاص الاشعة فوق البنفسجية لعينات الخلايا دليل على تحلل الخلايا بتاثير الصبغات الحيوية.اذ كشفت النتائج ان الموقع الهدف لتاثيرالصبغات الحيوية هو غشاء الخلية .• استخلص عديد السكريد الدهني من بكتريا P.fluorescens ,وهو احد مكونات الجدار الخلوي ,وتمت دراسة تاثير الصبغة الحيوية على كمية الدهن والسكريد في عديد السكريد الدهني .اذ اظهرت النتائج مستوى عالي للدهن في النموذج غير المعامل بالصبغة 79.33 % ملغ\مل , بينما تناقص مستوى الدهن الى 45.8% ملغ\مل بعد المعاملة بالصبغة , اما كمية السكريد في عديد السكريد الدهني في النموذج غير المعامل بصبغة المثيل الحمراء كانت 123.4% ملغ\مل والتي انخفضت الى 74.2 % ملغ\مل في نموذج عديد السكريد الدهني المعامل بالصبغة . | • One hundred Skin swabs samples were collected during the period from November 2013 to March 2014 from patients suffering from eczema at Al - Sadder hospital and Al - Imam Ali hospital in Baghdad Province . A total of (72%) gave positive cultures ,while (28%) showed negative cultures and the results showed the following : • Both genders were suffering from eczema , with dominance in females (57%) comparable to males (43%) within variable type of eczema.• The highest incidence of eczema was found in age group five months to 9 years (45%) ,followed in the age group (30 - 39) years (14%) , while the lowest percentage (5%) is in age group (20 - 29) years .• Contact dermatitis is the highest percentage of incidence (57%) followed by Atopic dermatitis (35%) and Discoid dermatitis (5%) ,while the lowest percentage is for Neuro dermatitis (3%) .• Out of the one hundred patients with eczema in all study groups , results showed that Staphylococcus aureus isolated at a highest percentage 20 (57.14%), followed by Staphylococcus haemolyticus seven (20%), and Pseudomonas fluorescens five (14.28%) and two isolates of Enterobacter aerogenes (5.7%) ,and one isolate of Staphylococcus warneri(2.8%).• Pseudomonas fluorescens were resistance for 18 antibiotic ,and sensitive to only two antibiotics (Neomycin and Nitrofurantoin ) .The isolates were resistant 100% to β lactams antibiotics ,augmentin ,erythromycin, azithromycin ,oxacillin ,while resistance 50% to levofloxacin ,rifampicin, norfloxacin ,and ciprofloxacin .• Enterobacter aerogenes isolates were resistant to βLactam antibiotics (100%) and appeared sensitivite to Aminoglycosides Antibiotic (amikacin ,gentamicin) in 100% percentage ,but gave intermediate resistance to neomycin .• Staphylococcus aureus isolates were resistant to 11 type of antibiotics and sensitive for eight . While Staphylococcus haemolyticus isolates were resistant to 15 type of antibiotics and sensitive to four and intermediate to Levofloxacin .And that differ from Staphylococcus warneri isolates which sensitive to 14 type of Antibiotics ,while resistant to only five antibiotics ,and intermediate to only Oxacillin. • Testing ability of Bacterial isolates to growth in presence different concentration of biostains (the biostains used are Crystal violet , Methylene blue and Methyl red ) allowed to detecting the sub MIC. the MIC of the methylene blue against S. haemolyticus and P.fluorescens were (1) mg/ml, while against S .warneri and S.aureus were (10) mg/ml ,and the MIC of the methyl red was (1) mg/ml against all type of these isolates , while the MIC of crystal violet against all these isolates were (0.1) mg/ml except against S. warneri was (1) mg/ml .• Studying the effect of biostains on virulence factors for bacterial isolates appeared their were'nt any effect for these biostains on capsule production in these isolates ,and inhibition of adherence factor for these isolates by the stains ,while the treating of bacterial isolates with biostains could reduce the ability of these isolates for forming biofilm ,and the highly ability of these isolates which isolated from eczema patients to agglutinated with the lectin extracted from epithelial cells. But the percentage of agglutination decrased due to the treatment with biostains . • Spectrophotometric method is used to investigate the effect of biostains on cell permeability ,the results revealed that the target of biostains is the cell membrane.• Extracting lipopolysaccharide from Pseudomonas fluorescens which is one of the component of cell wall ,and studying the effect of biostain on the quantity of lipid and sugar, The results showed high level of lipid 79.33mg/ml in sample which not treated with biostain , while the lipid level decreases to 45.8 mg/ml when treated bacteria with the stain, as well as the quantity of sugar in lipopolysaccharide was high in sample not treated to biostain 123.4 mg/ml but decreased to 74.2 mg/ml when sample treated with methyl red stain.
