دراسة عشر علامات حيوية محتملة لتحري عن الخلايا الجذعية للحيوانات المنوية == Study of Ten Potential Bio-markers to Detect Spermatogonial Stem Cells
Author name:
امل عواد عطشان الزيدي
Supervisor name:
محمد عبد الملك البيضاوي
General topic:
Biology
Specific topic:
Genetic Engineering
Degree:
Master
University:
University of Baghdad
Language:
English
University location:
Baghdad
Key words:
- Spermatogonial stem cells markers
- Tmem121
- immunohistochemistry
Abstract:
الخلايا الجذعية لحيوانات المنوية ((SSCs هي خلايا جرثومية ذكورية تقع في قاعدة الانابيب المنوية التي تؤدي الى تكوين حيوانات منوية وظيفية. تعتبر الخلايا الجذعية للحيوانات المنوية ضرورية للحفاظ على تكوين الحيوانات المنوية طوال فترة الحياة ، وفهم كيفية عمل هذه الخلايا له اثار مهمة لفهم العقم عند الذكور. ومن ثم هناك حاجة لتحديد المؤشرات الحيوية المحددة التي تسمح بعزل وتكاثر SSCs للحصول على نظرة ثاقبة لبيولوجيتها وتسخير امكاناتها. وقد اجريت هذه الدراسة للتحقيق في اكتشاف واسمات جديدة للكشف عن الخلايا الجذعية للحيوانات المنوية من خلال قياس التعبير الجيني لعشرة جينات معينة مع الفحص النسيجي. اشتملت هذه الدراسة على مجموعتين من ذكور الجرذان بعمر اربعة اشهر (ن = 20) وذكور جرذان بعمر عشرة ايام (ن = 20). اجريت هذه الدراسة في مختبرات معهد الهندسة الوراثية والتكنولوجيا الحيوية للدراسات العليا - جامعة بغداد خلال الفترة من 1 تشرين الثاني 2020 وحتى الاول من تشرين الاول 2021 اخذت ذكور الجرذان من البيت الحيواني في جامعة النهرين في بغداد. تم اجراء تحليل المعلوماتية الحيوية لتسمية واسمات محتملة للخلايا الجذعية متبوعة بدراسة جزيئية تضمنت الدراسة الجزيئية استخلاص الحمض النووي الرايبوزي RNA لجميع ذكور الجرذان وتضخيم جينات GAPDH و Thy-1 و Id4 و Nes و Etv5 و Tmem121 و CD29 و CD18 و Wt1 و Gli1 و Shh بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل PCR لعيناتcDNA المكونة. تم الكشف عن التعبير الجيني لـThy-1 ، Id4 ، Nes ، Etv5 ، Tmem121 باستخدام تقنية Real-Time PCR. اظهرت هذه النتائج مستوى معنويا (P <0.05) للتعبير الجيني لـ Id4 و Thy-1 و Nes و Etvs5 ووجد ارتفاعا معنويا (P <0.01) لـ Tmem121 بين ذكور الجرذان البالغة من العمر عشرة ايام (صغارا) بالمقارنة مع التعبير الجيني في ذكور الجرذان بعمر اربعة اشهر (بالغة). ومن خلال الفحص النسيجي ، اظهر الفحص المجهري ان ذكور الجرذان البالغة من العمر عشرة ايام لديها عدد اكبر من الخلايا الجذعية للحيوانات المنوية بالمقارنة مع ذكور الجرذان البالغة من العمر اربعة اشهر. ومن النتائج اعلاه كان مستوى التعبير الجيني متوافقا مع نتائج طريقة الكيمياء النسيجية المناعية عندما تم فحص كل من التعبير الجيني والبروتيني في عينات الخصية. حيث اظهر بروتين Tmem121 تعبير مميز في الخلايا القاعدية للانابيب المنوية. ويظهر مستوى التعبير عن Tmem121 كمؤشر حيوي واعد للكشف عن الخلايا الجذعية للحيوانات المنوية.
Full text:
ede92e134f.pdf
Summary:
e680358556.pdf
References:
5c401c677b.pdf
