تاثير مستخلص نبات الكجرات Hibiscus sabdariffa على عوامل الضراوة لبكتيريا المكورات العنقودية الذهبية المعزولة من التهابات المجاري البولية == Effect of Hibiscus sabdariffa Extract on the Virulence Factors of Staphylococcuss aureus Isolated from Urinary Tract Infection
Author name:
صمود عبد الكاظم سلمان عبد
Supervisor name:
وجدان رضا تاج الدين
General topic:
Biology
Specific topic:
Microbiology
Degree:
Master
University:
University of Babylon - College Of Science - Department Of Biology
Language:
English
University location:
Babylon
First pages:
24T3513 - p.pdf
Abstract:
تم جمع 163 عينة ادرار من المرضى المصابين بالتهاب المجاري البولية لكلا الجنسين باعمار تتراوح من شهر واحد الى 60سنة من المراجعين في مستشفى القاسم ومستشفى الهاشمية العام خلال الفترة من اب 2016 الى كانون الاول 2016. وقد وجدت 112 (68.71%) عينة اعطت نموا بكتيريا ومن هذه النسبة وجدت36 (32.14%) عزلة موجبة لصبغة غرام و76(67.86%) سالبة لصبغة غرام . وقد تم تشخيص 23(20.5%) عزلة بكتيرية تعود للبكتريا العنقودية الذهبية Staphyllococcus aureus، تم تشخيص جميع هذه العزلات مظهريا ومجهريا وحيويا.تم اختبار حساسية المضادات الحيوية لجميع هذه العزلات. وكانت جميعها مقاومة 100% للامبسلين، يليها سيفوكسيتين 91.3 %. واظهرت هذه العزلات اعلى حساسية للمضاد الحيوي الكليندامايسين 78.2% , في حين كانت نسبة المقاومة للاميكاسين هي39.1% . وقد وجد ان نسبة المقاومة للتراسايكلين هي 47.8% . وقد اظهرت النتائج ان 20 (86.9%)عزلة مقاومة للمضاد الحيوي المثسيلين (MRSA) وقد تم الحصول على هذه النتيجة باستخدام تقنية تفاعل انزيم البلمرة التسلسلي (PCR).درست فعالية المستخلص المائي الحار والبارد لاربعة نباتات (كاس الكجرات جذور العاقول وقشور الرمان واوراق الخباز) ضد البكتريا العنقودية الذهبية ووجد من خلال التحليل الاحصائي وجود فروق معنويه 0.05 P< في حالة المستخلص المائي البارد للكجرات حيث اعطى فعالية تثبيطية تجاه هذه البكتريا لذا تم اختيار هذا المستخلص لدراسة تاثيره على عوامل الضراوة لهذه البكتريا. بعدها تم التحري عن المركبات الموجودة في هذا المستخلص وقد اظهرت النتائج ان المستخلص المائي يحتوي كلا من الفينولات , القلويدات , الفلافونات والتانينات.درست فعالية المستخلص المائي البارد الخام لكاس الكجرات المضادة للبكتريا بطريقه الانتشار بالحفر (agar well diffusion method) باستخدام التراكيز 2,5 و5و10و20و40و80 ملغم / مل. بعدها تم تحديد MIC لهذا المستخلص بطريقه الانتشار بالحفر( The modified broth macro dilution method) فكانت قيمته 25ملغم/مل.وقد اظهر المستخلص المائي البارد فعالية تثبيطية تجاه البكتريا العنقودية الذهبية بقطر 18 ملم بتركيز 40و80 ملغم /مل .تم استخلاص المركبات الفينولية من المستخلص المائي البارد للكجرات بعدها تم استخدام تقنيه الفصل الكروموتوكرافي عالي الجودة لعزل وتشخيص المركبات الفينوليه وقد تم الحصول على عدة مركبات. بعدها تم دراسة الفعالية التثبيطية لهذه المركبات ووجد بان المركب الفينولي الكويرسيتين قد اعطى اعلى فعالية تثبيطية تجاه البكتريا العنقودية الذهبية بتركيز 4 ملغم /مل وايضا تم تحديد MIC لهذا المركب وهي 2ملغم /مل .كما درس تاثير المستخلص الخام والكويرسيتين على عوامل الضراوة وقد اظهرت النتائج ان كلا منهم قد كان له تاثير على انتاج الهيمولايسين وعلى فعاليته وذلك بعد تنمية البكتيريا مع قيمة MIC للمستخلص الخام والكويرسيتين كلا على انفراد.كذلك تم دراسة تاثير هذه المستخلصات على تكوين البايوفيلم من قبل البكتريا وقد وجد ان 15 عزلة بكتيرية منتجة للبايوفيلم قد تحولت الى غير منتجة او الى منتجة ولكن من النوع الرقيق بعد تنميتها مع هذين المستخلصين.وقد اظهرت النتائج ايضا ان المستخلص الخام والكورسيتين للكجرات قد اثرا على فعالية كلا من الستافيلوكاينيز والبروتيز.تم التحري عن انتاج السموم المعوية من قبل البكتريا العنقودية الذهبية باستخدام تقنية الفار الرضيع وقد وجد بان جميع العزلات غير منتجة لهذه السموم.كذلك تم دراسة تاثير هذين المستخلصين على تسرب ايون البوتاسيوم من الخلايا البكتيرية خلال فترات زمنية معينة وقد وجد بان هذين المستخلصين قد عملا على زيادة تسرب هذا الايون من الخلايا البكتيرية مما يدل على ان هذين المستخلصين قد اثرا على نفاذية الغشاء الخلوي للخلية البكتيرية .كذلك وجد ان الجرعة القاتلة لنصف حيوانات التجربة قد زادت من 5,6 × 106 الى 3,9× 107 بعد معاملة البكتريا بالمستخلص المائي البارد لكاس الكجرات . ايضا تم دراسة تاثير المستخلصين الخام والكورسيتين على معايير الدم في الفاران المعاملة بالعالق البكتيري الذي يحتوي مستخلص نباتي والفاران المعاملة بالعالق البكتيري الذي يحتوي على الكورسيتين وقد وجد بان المستخلص الخام كان له تاثير اكبر من الكورسيتين في تحسين معايير الدم مقارنة بالبكتريا المعاملة بالعالق البكتيري بدون مستخلص نباتي ,كما تم دراسة امكانية استخدام النبات كعامل مختزل عن طريق معرفة الفعالية ضد التاكسدية وكانت قيمتها 3566,97 مايكرو مولاري بواسطة استخدام اختبار (CUPRAC). ايضا تم دراسة الفعاليه الخلويه السمية للمستخلص الخام على خلايا الكبد الطبيعية للانسان وعلى الخلايا السرطانية في الثدي وقد وجد بان هذا المستخلص ليس له فعالية سمية على خلايا الكبد الطبيعية وايضا له تاثير قاتل للخلايا السرطانية في الثدي .
