عزل وتشخيص الفطريات المرافقة لاعلاف الدواجن والتحري عن مستوى التلوث بالافلاتوكسين == Isolation and identification of fungi associated with poultry feeds and detection of aflatoxin contamination level
Author name:
هـبـة فـرحان دلــــي
Supervisor name:
مهند محمد نوري المفتي | هادي مهدي عبـود
General topic:
Biology
Specific topic:
Plant
Degree:
Master
University:
Mustansiriyah University - College Of Science
Language:
Arabic
University location:
Baghdad
First pages:
24T3437 - p.pdf
Abstract:
هدفت الدراسة الى تحديد مدى تلوث بعض اعلاف الدواجن(خليط من بذور بعض المحاصيل) المعروضة في بعض الاسواق المحلية لبعض محافظات العراق بالفطريات ، وتحديد قابلية عزلات الفطر Aspergillus flavus على انتاج الافلاتوكسينات فضلا عن تقييم كفاءة اربعة ممد صات كيميائية في ٳمدصاص سم الافلاتوكسين B1 من الاوساط السائلة . اظهرت نتائج عزل وتشخيص الفطريات المعزولة من 52 عينة من اعلاف الدواجن من محافظات بغداد ،ديالى ،بابل ،السماوة ،كربلاء ،القادسية وميسان تواجد الانواع الفطرية الاتية في الاعلاف : Alternaria alternaria وAspergillus candidus وAsp.clavatus وAsp.flavipesوAsp.flavus وAsp.fumigatus وAsp.niger وCephalosporium spp. وCladosporium cladosporioids وFusarium graminearum وF.moniliforme وF.oxysporum وGonatosbotrys simplex وMucor sp. وPenicillium citrinum وP.chrysogenum وP.cyclopium وP.expansumوP.griesofulvum وP.oxalicum وUlocladium sp. ومجموعة Mycelia sterila fungi. وفيما يخص نسبة التواجد فقد كان الجنس Aspergillus sp. هو الاعلى في معظم العينات المفحوصة اذ بلغت نسب تواجده 99.15 ،100 ،100 ،94.55 ،100 ،98.58 ،100 و95.24% في العينات B4 ،B11 ،B13 ،B16 ،B17 ،Kh6 ،M1 وM3. وسجل النوع Aspergillus flavus اعلى نسبة مئوية للتواجد بالنسبة لبقية انواع الجنسAspergillus sp. اذ بلغت نسب تواجده 88.03 ،85.71 ،71.43 و% 87.5 في العينات B4 ،B17 ،C2 وC3. في حين ظهر الفطر Cladosporium cladosporioids بشكل متوسط وبنسب مئوية 41.67 ،56.25 ،72.22 ،71.43 و50 % في العينات B¬1 ،B2 ،B6 ،B7 وC1 . اما الفطر Gonatobotrys simplex فقد سجل اقل نسبة مئوية للتواجد بلغت 0.5 % في العينة Di1. وفيما يـخـص تـكـرار العـزل قـد اظهر الجـنـس Aspergillus sp. اعـلـى تكرارات بـلـغت 19 : 18 ،7 : 7 ،3 : 3 ،3 : 3 ،6 : 5 ،6 : 6 و8 : 8 % فـي عـيـنات مـحافـظات بـغـداد ، ديالـى ، بابـل،السماوة ، كـربلاء ، القادسيـة ومـيـسان ومـن بـيـن انـواع الجـنـس Aspergillus sp. سجـل النـوع Aspergillus flavus اعـلـى تكرارات عـزل بـلـغت 19 : 15 ،7 : 5 ،3 : 3 و3 : 3 % فـي عـيـنات مـحافـظات بـغـداد ، ديالـى ، بابـل ، الســماوة على التوالي . اظهر الفـطـر Cladosporium cladosporioids تـكـرار عــزل بلغت متوسطاته 19 : 8 ،7 : 3،6 : 2 و8 : 4 % في عينات محفظات بـغـداد ، ديالـى ، كربلاء وميسان . اما اقل تكرار عزل فسجله الفطر Gonatobotrys simplex اذ بلغ 7 : 1 % في عينات محافظة ديالى . وبالنسبة لبقية الفطريات فقد اظهرت نسب تواجد وتكرارات عزل متباينة حسب مصدر العينات ومكوناتها . وفيما يخص الحمل الفطري فقد سجلت محافظة كربلاء اعلى معدل للحمل الفطري بلغ 253×106 وحدة مكونة للمستعمرة /غم علف جاف ، وسجلت محافظة القادسية معدل حمل فطري متوسط بلغ 140×106 وحدة مكونة للمستعمرة /غم علف جاف ، في حين كان اقل معدل حمل فطري لمحافظة السماوة اذ بلغ 3.4×106 وحدة مكونة للمستعمرة /غم علف جاف . اظهرت نتائج قابلية 37 عزلة من الفطر Aspergillus flavus على انتاج الافلاتوكسين ان 13 عزلة فقط اظهرت قابلية على انتاج الافلاتوكسين B1، وتفوقت العزلة 6B من محافظة بغداد على بقية العزلات في القابلية على الانتاج اذ سجلت قابلية فائقة في الانتاج (++++) . اظهرت نتائج الكشف بتقانة TLC كفاءة كل من قشور الرمان والفحم المنشط والكايتوسان كعوامل ممدصة ، وكانت قشور الرمان اكفا هذه العوامل اذ اظهرت اكبر مساحة بقعة واشد تالق مقارنة ببقية المعاملات الاخرى، في حين اظهر الفحم المنشط كفاءة جيدة في الامدصاص ولكن بمستوى اقل من الدباغ. اما فيما يخص الكايتوسان قد اظهر كفاءة قليلة كعامل مدمص بينما اظهر الطين عدم كفاءته كعامل مدمص الا انه اظهر كفاءة عالية في التحطيم حيث ادى الى اختفاء السم من الراشح والراسب. | This study was aimed to determine the fungal contamination levels of poultry feeds(grains mixture of agricultural crops) exhibited in local markets of some Iraqi governorates, the aflatoxin toxigenic activity of Aspergillus flavus isolated isolates and evaluation of four materials as detoxification agents. The results of fungal isolation and identification of 52 poultry feed samples collected from Baghdad, Deila, Babil, Seemawa, Karbala, Kadisia and Maysan governorates revealed presence of the following fungal species : Alternaria alternaria,Aspergillus candidus, Asp.clavatus, Asp.flavipes, Asp.flavus, Asp.fumigatus, Asp.niger, Cephalosporium ssp., Cladosporium cladosporioids, Fusarium graminearum, F.monilforme, F.oxysporum, Gonatobotrys simplex, Mucor sp., Penicillium citrinum, P.chrysogenum, P.cyclopium, P.expansum, P.griesofulvum, P.oxalicum , Ulocladium sp. and Mycelia sterile fungi group. Genus Aspergillus showed the highest percentage of occurence in most tested samples which recorded 99.15 ,100 ,100 ,94.55 ,100 ,98.58 ,100 and 95.24 % in samples B4 ,B11 ,B13 ,B16 ,B17 ,Kh6 ,M1 and M3, respectively. Species Asp.flavus recorded the highest percentage of occurence among other Aspergillus species which recorded 88.03 ,85.71 ,71.43 and 87.5% in samples B4 ,B17 ,C2 and C3, respectively, while the fungus Cladosporium cladosporioids appeared in moderate percentage when recorded 41.67 ,56.25 ,72.22 ,71.43 and 50 % in samples B1 ,B2 ,B6 ,B7 and C1, respectively. Fungus Gonatobotrys simplex showed the lowest percentage of occurence (5.0% in Di1). The genus Aspergillus also recorded highest isolation frequencies (18 : 19 ,7 : 7 ,3 : 3 ,3 : 3 ,5 : 6 ,6 : 6 and 8 : 8 %) in (samples Baghdad, Deila, Babil, Seemawa, Karbala, Kadisia and Maysan).However, among isolated species, Asp.flavus recorded highest frequencies 15 : 19 ,5 : 7 ,3 : 3 and 3 : 3 % in samples Baghdad, Deila, Babil and Seemawa respectively, while Cladosporium cladosporioids showed moderate isolation frequencies 8 : 19 ,3 : 7 ,2 : 6 and 4 : 8 % in samples Baghdad, Deila, Karbala and Maysan respectively and the Gonatobotrys simplex the lowest (1 : 7 %) in Deila samples. Other fungal isolates showed different percentages of occurence and isolation frequencies according to the source and components of the collected Samples. Karbala governorate recorded highest rate of fungal load (253×106 CFU / gm feed), moderate rate (140×106 CFU / gm feed) recorded by Kadisia samples, while the lowest (3.3×106 CFU / gm feed) by Seemawa samples. The results of toxigenic activity of 37 isolates of Asp.flavus showed that only 13 of them have toxigenic activity, and isolate B6 was the most toxigenic than other isolates. The results of TLC showed the efficiency of Pomegranate pericarp , activated carbon and chitosan as absorption agents. Pomegranate pericarp was the most efficient as manifested by area and severe fluorescence of it's sopt followed by activated carbon and chitosan which recorded the lowest efficiency, while clay had no efficiency as absorption agents but it showed high efficiency in toxin degradation as manifested by the disappearance of the toxin in both filterate and precipitate.
