التباين الوراثي في جينات TNF - ?, VEGF - A and IL - 10 المصاحبة لداء الصدفية == Genetic Polymorphism in TNF - ?, VEGF - A and IL - 10 genes associated with Psoriaasis
Author name:
خالد عبد الكاظم هادي الطائي
Supervisor name:
علي حمود السعدي | وسام علي امين عوض
General topic:
Biology
Specific topic:
Biotechnologies
Degree:
Doctorate
University:
University of Babylon - College Of Science - Department Of Biology
Language:
English
University location:
Babylon
First pages:
24T3509 - p.pdf
Abstract:
هدفت هذه الدراسة الى تقصي بعض التغايرات الوراثية لكل من (TNF - α, VEFGF and IL10) لدى مرضى داء الصدفية وعلاقتها بشدة الاصابة باستخدام تقنيات تفاعل البلمرة المتسلسل وتباين اطوال قطع التقيد . بينما قدر مستوى الحركيات المناعية باستخدام تقنية الايلايزا.اجريت هذه الدراسة في الفترة من نيسان 2016 الى اذار 2017، حيث جمعت العينات مرضى داء الصدفية المراجعين لمستشفى مدينة مرجان الطبية، محافظة بابل / العراق. شملت الدراسة 64 عينة لمرضى داء الصدفية 40) ذكر و24 انثى) يبلغ متوسط اعمارهم (9 - 70 سنة)، كما شملت الدراسة 38 شخصا من الاصحاء (21 ذكر و17 انثى) يبلغ متوسط اعمارهم 15 - 65 سنة كمجموعة السيطرة جارت مجاميع المرضى.اظهرت النتائج زيادة معنوية في مستوى كل من TNF - α وIL10 في المصل لدى مرضى داء الصدفية مقارنة بمجموعة السيطرة (P<0.01) . كما اظهرت الدراسة ارتباط معنوي بين مستوى TNF - α وشدة الاصابة ( - r=0.49, p=0.0001) بينما كان معامل الانحدار عكسي غير معنوي بين مستوى IL10 في المصل وشدة الاصابة ( - r= 0.29, P=0.0109) , وكان الانحدار عكسي معنوي بين مستوى IL10 و( - r= - 0.29) (p=0.0028) TNF - α. كما اظهرت النتائج ارتفاعا معنويا (P<0.01) في مستوى VEGF في المصل لدى مرضى داء الصدفية مقارنة بمجموعة السيطرة بينما كان الانحدارغير معنويا بين مستوى VEGF وشدة الاصابة( - r= - 0.05) .اظهرت النتائج وجود ثلاث انماط وراثية للتغايرات في موقع الجين TNF - α - 308 حيث كانت النسب AA 5 (7.81%) ,AG 24 (37.50% وGG 35 (54.69% في مجموعة السيطرة كانت 10 (26.31%) , 16 (42.11% و12 (31.58% اما توزيع الانماط الوراثية الناتجة من تحليل جين VEGF+405 كان النمط الوراثي CG هو السائد 24 (37.05) لدى مرضى الصدفية والنمط الوراثي CC هو الاقل ظهورا 1 (1.56%).. اضافة الى ذلك اظهر نتائج تحديد تتابع النيكليوتيدات للموقع الوراثي IL10 - 1082 نمطين وراثين حيث كان النمط الوراثي GG هو الاكثر تواجدا لدى مرضى داء الصدفية ( 47.5%) والنمط GA بنسبة (28.5%) مقارنة بمجموعة السيطرة التي جاءت جميعها بالنمط الوراثي GG. | Psoriasis is an immune mediated skin disease with a wide - world prevalence involves both genders and different age, it is a multifactorial disease influenced by genetic and environmental factors. The current study aims to evaluate the association of (Interleukin 10, Tumor Necrosis Factor - α and Vascular Endothelial Growth Factor) genes polymorphism in psoriasis. Single Nucleotide Polymorphism (SNPs) determined by Polymerase Chain Reaction (PCR), restriction fragment length polymorphism (PCR - RFLP) and DNA sequencing techniques, while there serum levels determined by ELISA. This case - control study is done in a period of March 2015 to December 2017, where the samples collected from Marjan Medical City in Babylon Province. The number of samples was (64) patients psoriasis (40 males and 24 females ) with an average age ( 9 - 70 year), (50) of them were with type 1 psoriasis and (14) type 2. In addition, the study included 38 apparently healthy people who were (21 males and 17 females) with an average age (15 - 65 year), as control matched with disease group. The present study revealed a significant increasing (P<0.01) of Tumor Necrosis Factor - α (TNF - α) and Interleukin 10 (IL10) in patients compare with controls. In addition, there is a significantly regression between severity of disease and TNF - α serum level (r =0.49, p=0.0001) and non - significant invers regression with IL10 serum level (r= 0.29, P=0.0109). In addition, the results established an A significant negative correlation which has been found between IL10 and TNF - α (r= - 0.29) (p=0.0028). Physiological, the study shows significant increasing in Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) level in patient compare with control (P<0.01). There is no correlation between Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) serum level and severity or onest of disease (r= - 0.05).Genetically, analysis of the Single Nucleotide Polymorphisms PCR - RFLP genotyping for TNF - α - 308 G/A (rs1800629) SNP, Genotype distribution in patient were GG 35 (54.69%), AG 24 (37.50%) and AA 5 (7.81%) while in control were AG16 (42.11%), GG 12 (31.58%) and AA10 (26.31%).The genetic analysis of the Single Nucleotide Polymorphisms of VEGF +405 SNP, genotype distribution CC homozygous was predominant in patient 39(60.94%) and GG homozygous was 24 (37.05) While the GCwas the least 1 (1.56%). Comparing with the control group was CG 18(47.37%), CC 13(34.21%) and GG 7(18.42%).On the other hand , the statistical analysis for the role of genotyping for TNF - α - 308 SNP in the Serum levels of TNF - α were different between TNF - 308 AA (126.90 ± 14.96) patients and TNF - α GA(106.55 ± 16.42) and GG (57.94 ± 7.72) genotypes (p < 0.01). Analysis for the role of genotyping for VEGF +405 SNP non - significant difference between homozygous CC (408.30 ± 0.00), homozygous was GG (326.00 ± 34.81) and heterozygous CG (376.41 ± 58.63).This result promotes that the both of TNF - α - 308 SNP polymorphism and VEGF +405 SNP strongly implicated in the pathogenicity, severity and onest of psoriasis.PCR - sequencing for IL10 - 1082 A/G (rs1800896) locus shows a significant difference of percentage distributions of alleles and genotypes for IL10 - 1082 (rs1800896) locus between patient and control, GG homozygous was predominant in patient (71.5%) while the AG heterozygous was (28.5 %). Comparing with control group GG (100%).
