عزل وتشخيص بكتريا الاشريكية القولونية (O157: H7) بالطرق التقليدية والجزيئية من اللحوم والحليب ومنتجاتهم == Isolation and Identification of E.coli (O157:H7) by Conventional and Molecular Methods from Meat and Milk Products.
Author name:
حارث باسم ابراهيم خليل
Supervisor name:
خالد محمود حماد | امال عزيز كريم
General topic:
Biology
Specific topic:
Microbiology
Degree:
Master
University:
Aliraqia University - Faculty Of Education - Department Of Biology
Language:
Arabic
University location:
Baghdad
Key words:
- E. coli
- O157:H7
- Isolation
- Identification
- Meat products
- Milk products
- Pathogen
- Microbial analysis
- Food safety
- Contamination
- stx2 12.stx1 13.rfbE
First pages:
T108282 - p.pdf
Abstract:
تناولت هذه الدراسة فحص وجود سلالة O157:H7 من بكتيريا Escherichia coli في منتجات الحليب واللحوم في محافظة بغداد، مع التركيز على الجينين Stx2 وrfbE اللذين يعدان من عوامل الضراوة. تم جمع 300 عينة من منتجات الحليب واللحوم من اسواق مختلفة في بغداد خلال الفترة من 21 فبراير الى 25 ابريل 2023. بعد نقل العينات الى مختبرات كلية التقنيات الصحية والطبية، تم تطبيق طرق تقليدية وجزيئية للعزل والتشخيص، مما اسفر عن الحصول على 30 عزلة من E. coli O157:H7 بنسبة 10%. اظهرت النتائج ان نسبة الاصابة في اللحوم كانت اعلى (73.33%) مقارنة بالحليب (26.67%). وكان اعلى مستوى من التلوث في منطقة حي العدل (25% للحوم)، بينما كانت النسبة صفر في منطقة البياع. كما اظهرت منطقة الشعلة تلوثا بنسبة 14.3% للحليب، وادنى نسبة كانت في منطقة ابي غريب (2.8% للحليب). استخدم نظام Compact VITEK لتاكيد التشخيص وتحديد التركيز المثبط الادنى (MIC) لـ18 مضادا حيويا. اظهرت النتائج مقاومة البكتيريا لستة مضادات (30%)، بينما كانت حساسة لتسعة مضادات (45%)، واظهرت ثلاثة مضادات حساسية متوسطة (15%). تم اختبار قابلية تكوين الاغشية الحيوية لـ30 عزلة باستخدام طريقة Microtiter plate، حيث اظهرت 10 عزلات من اللحوم (76.92%) قابلية عالية، بينما اظهرت 3 عزلات من الحليب (17.65%) ذات قابلية عالية ايضا. تم استخراج الحمض النووي DNA لجميع العزلات وعقد تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) للتحري عن الجينات Stx2 وrfbE. اظهرت النتائج ان خمسة عزلات من E. coli O157:H7 تحتوي على الجين rfbE، بينما لم تحتوي على الجين Stx2. تم تسجيل هذه العينات في المركز الوطني للمعلومات التقنية الحيوية (NCBI) كسلالات جديدة. اجري التتابع الجيني للجين rfbE، واظهر تطابقا بنسبة 73% لاربع عينات و75% لعينة واحدة. اظهرت محاذاة التسلسل وجود عدد قليل من الطفرات، وكان هناك تشابه مع التسلسلات في قاعدة بيانات NCBI. اجريت ايضا دراسة على السم SLT باستخدام الترسيب بسلفات الامونيوم وتنقيته بواسطة التبادل الايوني، حيث تم تحديد تركيز 1036.5 ملغ/مل. اظهرت الاختبارات الفعالية ضد عدة انواع من البكتيريا والفطريات، حيث كان التركيز المثبط الادنى للسم ضد فطر Candida albicans هو 125 ملغ/مل. كما اظهر فعالية جيدة ضد E. coli O157 وKlebsiella pneumonia بتركيز 250 ملغ/مل، بينما كان التركيز 500 ملغ/مل كافيا لقتل عدة انواع من البكتيريا مثل Salmonella وStaphylococcus وStreptococcus. باختصار، تبرز هذه الدراسة اهمية مراقبة وتحديد سلالات E. coli O157:H7 في المنتجات الغذائية، بالاضافة الى فعاليات البيولوجيا الجزيئية في فهم مقاومة المضادات الحيوية وتكوين الاغشية الحيوية.
Full text:
e09736149f.pdf
Summary:
5d78df4cd5.pdf
References:
d9f9a2066b.pdf
